帕金森病临床治疗药物的制剂改良策略

帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一种慢性神经退行性疾病,目前主要以左旋多巴等药物进行多巴胺补充治疗,但左旋多巴在胃肠道吸收不稳定且半衰期短,长期服用会导致剂末现象、异动症、开关效应等症状的发生,因此需要研发新型制剂以提高药效、降低不良反应或提高患者用药依从性,基于以上临床需求,本文通过案例分析介绍了用于帕金森病治疗的制剂改良策略,以期为相关制剂的研发提供思路。     

兔胫骨骨膜细胞膜片的体外构建

目的 体外采用维生素C构建兔胫骨骨膜细胞膜片并检测其基本生物学特性。 方法 培养兔胫骨骨膜细胞,采用维生素C诱导构建兔胫骨骨膜细胞膜片。采用显微镜对膜片进行观察,苏木精-伊红(H-E)及Masson染色检测膜片的结构及胞外基质;细胞活死荧光染色观察膜片的活力。 结果 体外成功分离培养兔胫骨骨膜细胞,CCK-8检测结果显示骨膜细胞增殖曲线呈S型增长,结晶紫染色显示其具有克隆形成能力,并具有多向分化能力。采用维生素C连续诱导14 d,可获得半透明乳白色膜样结构。H-E及Masson染色显示膜片由多层细胞及胞外基质构成,细胞活死荧光染色显示膜片由大量绿染的活细胞构成。 结论 维生素C可成功诱导兔胫骨骨膜细胞膜片,有望应用于骨缺损再生修复。     

远志与炆远志化学成分差异及对大鼠胃肠运动的影响

目的 探讨远志甘草炆制前后化学成分差异及对大鼠胃肠运动的影响。方法 采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱（UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS）法鉴定远志与炆远志化学成分,运用正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）和t检验分析远志与炆远志化学成分差异;将远志与炆远志提取物灌胃15 d后,酚红法测定大鼠胃排空率和小肠推进率,采用BL-420N+生物机能实验系统测定大鼠胃肠肌电生理活动。结果 从远志中鉴定出80个成分,从炆远志中鉴定出91个成分;远志与炆远志化学成分具有显著差异,共筛选出包括皂苷、寡糖酯、黄酮类、有机酸类、糖类等42个差异成分;远志炆制后远志皂苷、寡糖酯类成分含量呈现降低或上升趋势,■酮类成分含量降低,有机酸类成分含量升高,新增甘草中皂苷类、黄酮类、香豆素类差异成分。远志可显著降低大鼠的胃排空率、小肠推进率,并可显著降低大鼠胃和十二指肠肌电快波、慢波频率,而炆远志对上述指标无明显影响。结论 远志炆制后化学成分种类和含量发生显著变化,并可有效缓解远志对大鼠胃肠运动的抑制作用。     

骨质疏松大鼠骨髓巨噬细胞的体外培养研究

目的体外分离培养骨质疏松大鼠骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)并探讨其生物学行为。方法采用双侧卵巢切除术建立大鼠绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMO)动物模型并分离培养骨质疏松大鼠BMMs。通过倒置显微镜和瑞氏-姬姆萨染色对细胞进行形态学观察;通过CCK-8法检测骨质疏松大鼠BMMs的增殖能力;运用免疫荧光染色及荧光定量PCR法分析骨质疏松状态下大鼠BMMs的极化及炎症相关因子的表达情况。结果成功建立大鼠PMO模型并分离培养骨质疏松大鼠BMMs。骨质疏松大鼠BMMs主要呈多角形及煎蛋样。与假手术组相比,BMMs的增殖能力较高。免疫荧光染色可见骨质疏松大鼠BMMs高表达CCR7,低表达MRC1。荧光定量PCR检测结果提示,骨质疏松大鼠BMMs促炎因子TNF-α及IL-6的表达较高,而抗炎因子IL-10及TGF-β的表达相对较低。结论去卵巢可影响大鼠BMMs的增殖能力、细胞表面极化标志物以及炎症相关因子的表达水平。     

“通督益肾”法温针灸联合功能磁刺激治疗脑卒中后尿潴留的临床研究

目的：基于“通督益肾”法探讨温针灸联合功能磁刺激治疗卒中后尿潴留的临床疗效。方法：将70例卒中后尿潴留患者随机分为对照组和观察组,每组各35例。其中对照组给予常规针刺和功能磁刺激,观察组在对照组的基础上另对百会、肾俞（双）、命门（双）、膀胱俞（双）、太溪（双）进行温针灸,2组治疗各30min,均每日1次,共治疗4周。观察2组治疗前后的膀胱尿动力学、排尿情况、导尿次数等指标差异及治疗后的临床疗效。结果：治疗后,2组的最大膀胱容量、最大尿流率、排尿次数、排尿量均较治疗前增加（P<0.05）,充盈期逼尿肌压力、膀胱残余尿量及导尿次数均较治疗前减少（P<0.05）,且观察组均优于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组总有效率高于对照组（97.1%,77.1%,P<0.05）;结论：“通督益肾”法温针灸优于单纯针刺,且联合功能磁刺激显著提高了卒中后尿潴留的临床疗效,可以改善患者临床症状,促进神经功能恢复,提高患者的预后。     

骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片制备过程中纤维连接蛋白表达检测

目的 探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片体外构建过程中纤维连接蛋白(FN)的表达情况。 方法 体外分离培养骨质疏松大鼠BMSC,采用含50 μg/mL维生素C的培养基连续培养构建细胞膜片,通过倒置显微镜和组织学染色对细胞膜片进行形态学观察; 利用免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测细胞外基质中FN在基因和蛋白水平的表达情况。 结果 采用含维生素C的培养基连续培养可获得含多层细胞及丰富胞外基质的BMSC细胞膜片。免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测结果显示所构建的细胞膜片高表达FN。 结论 以浓度为50 μg/mL的维生素C培养基连续培养可成功构建骨质疏松大鼠BMSC细胞膜片,膜片富含FN,有望应用于骨质疏松状态下牙槽骨缺损的治疗。     

可溶性髓样细胞触发性受体-1在不同牙周状态的龈沟液中表达研究

目的　分析比较可溶性髓样细胞触发性受体-1（soluble triggering receptor expressed on myeloid cells,sTREM-1）在不同牙周状态的龈沟液（gingival crevicular fluid,GCF）中表达情况,探讨sTREM-1在慢性牙周炎发生发展过程中的作用。方法　选取2017年1月至2018年6月于福建医科大学附属口腔医院牙周科就诊的18 ~ 60岁患者85例。根据牙周临床检查,将所有患者分成5组：健康对照组（牙周组织健康者18例）、慢性牙龈炎组（18例）、轻度慢性牙周炎组（14例）、中度慢性牙周炎组（15例）和重度慢性牙周炎组（20例）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测比较不同牙周状态的GCF中sTREM-1的表达,并与患者的牙龈指数（GI）、牙周袋探诊深度（PD）及附着丧失（CAL）情况进行相关性分析。结果　慢性牙龈炎组患者及轻度、中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均高于健康对照组,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。与慢性牙龈炎组相比,中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均显著增高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）;重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM1的表达水平显著高于轻度慢性牙周炎组,差异有统计学意义（P < 0.05）;其余组间两两比较,差异均无统计学意义（均P > 0.05）。此外,sTREM-1的表达水平与牙周临床指标GI、PD及CAL均呈正相关。结论　GCF中sTREM-1的表达水平与牙周组织的炎症程度密切相关。检测GCF中sTREM-1的含量对判断牙周组织的炎症状态具有潜在应用价值。     

抗菌钛合金Ti6Al4V-6Cu表面构建成骨细胞膜片的实验研究

目的:探讨大鼠颌骨成骨细胞在抗菌钛合金Ti6Al4V-6Cu表面构建细胞膜片的可行性。方法:体外培养大鼠颌骨成骨细胞,采用富含维生素C培养基在抗菌钛合金Ti6Al4V-6Cu表面构建细胞膜片（细胞膜片组）,并以单纯培养基作对照（对照组）,检测膜片形成过程中碱性磷酸酶（ALP）和成骨相关基因ALP、I型胶原（Col-1）、骨形成蛋白2（BMP-2）的表达情况。结果:采用富含维生素C的培养基连续培养可在抗菌钛合金Ti6Al4V-6Cu表面成功构建成骨细胞膜片,该细胞膜片由多层细胞构成,富含胞外基质。相对于对照组,细胞膜片组的膜片形成过程中成骨细胞ALP活性及成骨相关基因ALP、Col-1、BMP-2的表达均显著增高。结论:在抗菌钛合金Ti6Al4V-6Cu表面可成功构建成骨细胞膜片,有望与Ti6Al4V-6Cu联合应用于引导性骨再生术。     

人参二醇型皂苷抑制肝癌细胞转移体内外实验研究

目的:探讨人参二醇型皂苷(PDS)体内体外对肝癌细胞转移的影响.方法:采用CCK-8法测定PDS对人肝癌Bel-7402细胞增殖的影响.利用人工基质胶模拟细胞外基质观察其对Bel-7402细胞黏附作用的影响,利用Transwell小室分析其对Bel-7402细胞迁移和侵袭的影响,通过小管形成实验观察其对人脐静脉内皮细胞...     

骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的体外构建研究

目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的构建及基本生物学特性。方法建立大鼠绝经后骨质疏松症(PMOP)模型,分离培养骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(O-r BMSCs),并以O-rBMSCs为种子细胞构建细胞膜片。通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜及透射电镜对细胞膜片进行形态学检测;以免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白的表达情况。结果成功建立了大鼠PMOP模型,体外分离培养的O-rBMSCs具有多向分化潜能。显微镜下可见细胞复层生长,采用富含维生素C的培养基连续培养10 d左右即可获得白色膜样结构,该细胞膜片具有较好的弹性,HE染色及扫描电镜观察发现O-rBMSCs膜片由多层细胞及丰富的细胞外基质组成。透射电镜下可观察到细胞间连接。免疫组织化学染色示O-rBMSCs膜片高表达Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白。结论 O-rBMSCs体外采用富含维生素C的培养基连续培养可构建细胞膜片,该细胞膜片富含细胞外基质,有望应用于骨质疏松机体的组织再生。