广东省湛江市农村人群肠道蠕虫感染调查

目的了解湛江市农村人群肠道蠕虫感染现状。方法随机采集村民新鲜粪便,用直接涂片法及饱和盐水浮聚法检查虫卵,用盐酸左旋咪唑驱虫法检查感染钩虫种类。结果粪检190人,虫卵阳性78人,总感染率为41．1％。检出3种肠道蠕虫卵,其中钩虫感染率25．8％,蛔虫感染率12．1％,鞭虫感染率10．5％,有2种或3种虫卵阳性率为6．8％;不同地点各虫感染率不同;钩虫以50—70岁人群感染率较高,蛔虫、鞭虫以20岁以下人群常见;女性的钩虫感染率明显高于男性。药物驱虫后检获有十二指肠钩虫成虫、美洲钩虫成虫及雄性蛔虫,其中,十二指肠钩虫占钩虫比例87．4％,美洲钩虫占钩虫比例12．6％。结论湛江市农村人群感染蛔虫、鞭虫及钩虫常见,其中以钩虫感染最为严重。钩虫感染率较高与旱作生产生活方式密切相关。十二指肠钩虫在该地钩虫流行中占了重要地位。     

以低钠血症为首发症状的席汉综合征1例

现将我院收治的1例以低钠血症为首发症状的席汉综合征病例报道如下： 1病例资料 患者,女,52岁,以“头昏、乏力、畏寒5年,加重伴食欲下降、恶心、呕吐1周”入院,入院前曾在其他医院拟诊“慢性胃炎”,予以相关对症处理,症状无缓解。入科时查体：BP 100/60mmHg,意识清楚,精神萎靡,表情淡漠,浅表淋巴结未及肿大,     

氯通道在不同生长周期的鼻咽癌细胞迁移中的作用

目的：研究不同生长周期的鼻咽癌低分化上皮细胞（CNE-2Z）的迁移能力及氯通道在迁移过程中所起的作用。 方法： 运用血清饥饿法、化学药物双阻断法、有丝分裂药物阻断及摇落法分别将CNE-2Z细胞同步化至细胞周期的G1、S、M期，流式细胞仪检测其同步化效果。结合应用迁移小室和图像分析法，测定迁移率。台盼蓝活细胞染色法测定药物的细胞毒性。 结果： 不同生长周期的细胞迁移能力不同，G1期细胞迁移能力最强，随后是M期， S期迁移能力最弱。氯通道阻断剂（ATP、NPPB、tamoxifen）抑制CNE-2Z细胞迁移，但不同的氯通道阻断剂对不同生长周期CNE-2Z细胞迁移的阻滞效应不相同。 结论： CNE-2Z细胞的迁移能力与其所在的生长周期密切相关，氯通道在各期CNE-2Z细胞的迁移过程中起着重要作用。     

美洲钩虫纤溶酶抑制剂NaKuI10的表达与活性鉴定

目的从美洲钩虫(Necator americanus)cDNA中扩增编码NaKuI10基因片段,构建原核表达系统,重组表达并纯化rNaKuI10,采用化学发色法和平板溶解试验等检测其对有关丝氨酸蛋白酶的抑制作用及纤溶活性。方法根据GenBank MH218867序列,从美洲钩虫cDNA中扩增出编码成熟肽NaKuI10基因片段并连接入表达载体,构建原核表达重组质粒pET32a-sumo/NaKuI10,鉴定正确的重组质粒转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,超声破碎细菌后用镍亲和层析纯化表达产物,在纯化柱上用SUMO蛋白酶切割融合标签获得rNaKuI10,用发色底物法检测rNaKuI10对各丝氨酸蛋白酶的抑制活性,通过纤维蛋白平板法和纤维蛋白原降解试验观察rNaKuI10对纤溶酶纤溶活性的抑制作用。结果成功构建了重组质粒pET32a-sumo/NaKuI10,表达产物纯化后获得可溶性rNaKuI10。2倍及等摩尔比的rNaKuI10分别能抑制100%及90.4%的人纤溶酶活性,22.4%及10.3%的人胰蛋白酶活性。但1、2、5倍摩尔比的rNaKuI10对人中性粒细胞弹性蛋白酶,组织蛋白酶G,蛋白酶3,胰糜蛋白酶,胰弹性蛋白酶,凝血酶,凝血因子Xa(FXa)、FXIa、FXIIa、FIXa,活化蛋白C,血浆激肽释放酶及FVIIa/TF均无明显抑制作用。rNaKuI10对人纤溶酶的抑制常数(ki)为(0.83±0.10)nmol/L。2 000nmol/L的rNaKuI10接近完全抑制1 000nmol/L的人纤溶酶对纤维蛋白平板中纤维蛋白的溶解作用,等摩尔比的rNaKuI10可完全抑制人纤溶酶对纤维蛋白原的降解作用。结论 NaKuI10是一种抑制活性强且特异性较好的纤溶酶抑制剂,其生物学功能还需进一步研究。     

十二指肠钩虫巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达

目的克隆、表达十二指肠钩虫巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)AduMIF-1基因。方法设计、合成特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduMIF-1基因。将获得的AduMIF-1编码序列克隆至原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a/AduMIF-1。重组表达质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达并分离纯化重组AduMIF-1。结果成功扩增到AduMIF-1全长编码序列,完整阅读框长度为360bp,编码119个氨基酸。构建了重组表达质粒pET32a/AduMIF-1,经IPTG诱导表达和分离、纯化,获得了重组AduMIF-1,融和蛋白分子质量单位约为33ku。结论本研究从十二指肠钩虫中分离到MIF基因,并成功进行了重组表达、分离与纯化,为进一步研究AduMIF-1的生物学功能奠定了基础。     

内镜黏膜下剥离术治疗胃底黏膜下肿瘤的围手术期护理

目的：总结内镜黏膜下剥离术（ endoscopic submucosal dissection ,ESD）治疗胃底黏膜下肿瘤的围手术期护理体会。方法对40例胃底黏膜下肿瘤患者进行胃镜及超声内镜检查,并采用ESD进行治疗,围手术期针对专科特点,给予优质的护理并观察预后。结果所有患者均顺利完整切除瘤体,其中3例在术中出现小穿孔,予止血夹夹闭,5例患者术后胃管吸出少量血性液体,未特殊处理均自行好转,无大出血及迟发型穿孔发生。结论 ESD是目前治疗胃底黏膜下肿瘤安全有效的微创技术,在围手术期,根据病人的病理生理学特点,正确运用护理程序,可提高手术的安全性。     

人体寄生虫学教学方法改革的探讨

鉴于当前医学高等教育的发展趋势和人体寄生虫学教学中遇到的问题,从多方面探讨了对教学方法的改革,以期增加学生学习的主动性,提高教学质量,提升学生综合素质。     

十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶AduGST-1基因的克隆和重组表达

目的克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶(GST)AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1。方法设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因。将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1。重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况。结果成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank(accession no.JQ812812)。AduGST-1编码序列长度为624bp,编码307个氨基酸残基。成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21(DE3)中表达并纯化了重组AduGST-1。结论首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础。     

十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶AduGST-1基因的克隆和重组表达

目的克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶（GST）AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1。方法设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因。将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1。重组质粒转化至大肠埃希菌BL21（DE3）,用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况。结果成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank（accession no.JQ812812）。AduGST-1编码序列长度为624bp,编码307个氨基酸残基。成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21（DE3）中表达并纯化了重组AduGST-1。结论首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础。     

日本血吸虫尾蚴弹性蛋白酶结构的生物信息学分析

目的分析日本血吸虫尾蚴弹性蛋白酶（SjCE）的结构,为药物靶标、疫苗研究提供参考。方法用Prot-param、SignalP、DNAMAN、SOSUI、Emini、BepiPred、MLRC、Geno3d等软件对SjCE的蛋白质理化参数、亲水性、可溶性、表面可及性、二级结构、三级结构、抗原表位等进行分析及预测。结果 SjCE由263个氨基酸残基组成,理论分子质量单位为28.5 ku,等电点为6.94,属于可溶蛋白;有6个表面可及性区域;BepiPred 1.0 Server预测有7个抗原表位;二级结构以无规则卷曲为主;三级结构分子建模显示,该蛋白含有丝氨酸蛋白酶活性部位,位于裂隙区的中间。结论 SjCE具有丝氨酸蛋白酶活性位点,是可溶性蛋白。该蛋白有6个潜在的抗原表位,是潜在的疫苗候选分子和药物作用靶标。