HPLC法测定丁酸氢化可的松软膏中丁酸氢化可的松含量

目的 探讨丁酸氢化可的松软膏中氢化可的松含量的测定方法.方法 采用HPLC法进行含量测定(岛津CIS-ODS柱,(150 mm×4.6 mm,5 μm).流动相为甲醇∶水∶乙醚(62∶38∶2),流速1.0 ml/min.检测波长240 nm.结果 在30～450 mg/L浓度范围内呈良好线性关系,r＝0.9993.平均回收率为99.89%(RSD为0.54%).结论 HPLC法测定丁酸氢化可的松软膏中的丁酸氢化可的松含量,方法简便、快速、准确,对药品的质量控制有重要意义.     

人参皂甙Rb1对大鼠局灶性脑缺血脑组织GDNF表达的影响

目的从蛋白水平探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后的胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的表达规律性及人参皂甙Rb1对其的影响。方法阻塞大鼠大脑中动脉（middle cerebral artery，MCA）2小时再灌注3小时至5天制备脑缺血模型，通过免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色观察GDNF表达的改变与分布的特点及人参皂甙Rb1对其的影响。结果脑缺血再灌注损伤后GDNF表达在3小时与2天分别有两个高峰。给予人参皂甙Rb1后，GDNFmRNA与蛋白表达在2天达高峰。单纯脑缺血再灌注组和人参皂甙Rb1给药组，GDNF阳性细胞数主要分布于额顶皮质缺血周边区，其次为纹状体缺血周边区，下丘脑缺血周边区GDNF阳性细胞数最少。根据两组间GDNF免疫组织化学（IHC）染色的强弱比较，给予人参皂甙Rb1后，在同一时间点，同一缺血周边区GDNF阳性细胞数染色增强。对GDNF阳性细胞数统计分析显示，人参皂甙Rb1给药组各时间点GDNF阳性细胞数远远高于与单纯脑缺血再灌注组同时间点的GDNF阳性细胞数（P〈0．01），提示人参皂甙Rb1诱导GDNF表达。结论脑缺血再灌注后GDNF的表达与缺血性损伤有一定的联系，人参皂甙Rb1对中枢神经系统有保护作用。     

Ryanodine受体活性的蛋白质调控研究新进展

钙离子是细胞内最重要的第二信使之一,机体的每种活动都与钙离子息息相关,如神经肌肉兴奋性的维持、心脏跳动、大脑信息的处理等.正常情况下,胞内钙离子是处于稳态平衡的,一旦严重失去平衡,机体就会趋向死亡,所以钙信号是生存和死亡的信号.胞内钙离子的平衡是胞内钙库对钙离子释放和摄取保持平衡的结果.Ryanodine受体（RYR）是一类最主要的钙离子释放通道,至少有三种亚型：RYR1（骨骼肌中）、RYR2（心肌中）、RYR3（非肌细胞中）.RYR介导的胞内钙库释放钙离子对保持胞内钙的平衡起着重要作用.自从RYR发现以来,其性质和功能的研究一直是生命科学研究的热点.研究发现：RYR的活性受到多种物质的调控,诱导胞内钙库释放、升高胞内钙浓度、激发钙火花,对钙激活钾通道的开放、兴奋收缩藕联等多种生理功能的完成有重要意义.RYR的活性受到许多小分子物质（如[Ca^2＋]、[Mg^＋]、NO、咖啡因等）和一些大分子物质如蛋白质的调控.而蛋白质对RYR调控的研究是目前研究的热点.本文就与RYR活性调控相关的几种蛋白的研究进展作一综述.     

在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响

目的:利用膜片钳技术,研究咖啡因对钙激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)的作用机制,及咖啡因存在时兰尼定(ryanodine)对KCa的影响以阐明冠状动脉平滑肌的调控机制。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录猪冠状动脉平滑肌钿胞上KCa电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。应用PCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在内面向外式(inside-out)膜片下,咖啡因(0.1、0.5、1.0、5.0mmol/L)可浓度依赖性地增加通道开放概率,而对电流幅值无明显影响,开放概率增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P0.01);洗去药物后通道活性可以恢复到对照水平;5.0mmol/L咖啡因对KCa激活作用最大(P0.01)。在细胞贴附式(cell-attached)膜片上,咖啡因激活KCa后,ryanodine(10-40μmol/L)浓度依赖性地抑制通道开放概率,开放时间缩短,关闭时间延长,对电流幅度无明显影响。结论:在inside-out膜片下,咖啡因能够直接激活猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道。在cell-atta-ched构型上,ryanodine可通过胞内一定的信号通路浓度依赖性间接抑制咖啡因对KCa激活。     

细胞毒素Ⅳ对吗啡依赖大鼠已形成条件位置偏爱的影响

目的 探讨舟山眼镜蛇毒细胞毒素Ⅳ对吗啡诱导的已形成的条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)的影响及其自身是否引起CPP。方法:（1）雄性SD大鼠皮下注射吗啡(10mg/kg)训练8d,形成稳定的CPP模型后,实验组给予不同剂量的细胞毒素Ⅳ(0.0275~0.08mg/kg),观察其对吗啡已形成的CPP的影响。(2)雄性SD大鼠细胞毒素Ⅳ0.08mg/kg、0.04mg/kg）训练8d,训练方式同吗啡组,第10天测定CPP,观察其是否形成CPP。结果 吗啡(10mg/kg)可诱导大鼠产生明显的CPP,细胞毒素Ⅳ高、中、低剂量组均不能引起CPP;不同剂量的细胞毒素Ⅳ可明显抑制吗啡已形成的CPP。结论 一定剂量的细胞毒素Ⅳ连续用药可拮抗吗啡已形成的CPP,且自身不引起CPP,表明该细胞毒素有治疗阿片类药物精神依赖性及戒断症状的潜力。     

人参皂甙Rb1对大鼠局灶性脑缺血脑组织GDNF表达的影响

目的 从蛋白水平探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的表达规律及人参皂甙Rb1对其的影响.方法 阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)2 h再灌注3 h至5 d制备脑缺血模型,通过免疫组织化学(IHC)染色观察GDNF表达的改变与分布的特点及人参皂甙Rb1对其的影响.结果 脑缺血再灌注损伤后GDNF表达在3 h与2 d分别有两个高峰.给予人参皂甙Rb1后,GDNFmRNA与蛋白表达在2 d达高峰.单纯脑缺血再灌注组和人参皂甙Rb1给药组,GDNF阳性细胞数主要分布于额项皮质缺血周边区,其次为纹状体缺血周边区,下丘脑缺血周边区GDNF阳性细胞数最少.人参皂甙Rb1给药组各时间点GDNF阳性细胞数远远高于与单纯脑缺血再灌注组同时间点的GDNF阳性细胞数(P<0.01).结论 脑缺血再灌注后GDNF的表达与缺血性损伤有一定的联系,人参皂甙Rb1对中枢神经系统有保护作用.     

银杏达莫对2型糖尿病baPWV及hs-CRP影响

目的探讨银杏达莫对糖尿病脉搏波(b a P W V)、大动脉弹性指数(C1)、小动脉弹性指数(C2)、颈动脉中膜内层厚度((intimalmedial thickness,IMT)及hs-CRP的影响.方法112例糖尿病患者分为对照组和银杏达莫治疗组,测量baPWV,C1、C2、IMT及hs-CRP水平.结果治疗组使用银杏达莫后可明显降低糖尿病患者baPWV、IMT及hs-CRP水平,明显改善C2.结论银杏达莫对防治2型糖尿病患者血管病变有重要作用.     

复方银杏通脉口服液对实验性心肌缺血缺氧的保护作用

研究复方银杏通脉口服液对实验性心肌缺血、缺氧小鼠的保护作用.方法:在垂体后叶素构建的大鼠急性心肌缺血模型上,观察复方银杏通脉口服液对实验动物心电图T波影响;观察复方银杏通脉口服液对异丙肾上腺素皮下注射致小鼠急性心肌缺血模型小鼠存活时间影响;观察在常压和减压条件下缺氧对小鼠存活时间影响;结果:复方银杏通脉口服液实验组与模型组相比,可以明显改善心肌缺血性性改变,复方银杏通脉口服液高,低剂量组均都可使动物平均存活时间延长,心肌耗氧量降低.结论:复方银杏通脉口服液可有效改善冠脉循环血流量,对缺血心肌有保护作用,延长动物成活时间.     

活血通脉胶囊对急性心肌缺血缺氧的实验研究

目的：观察活血通脉胶囊对实验性心肌缺血、缺氧的保护效应。方法：用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型,观察活血通脉胶囊对心电图T波的影响;用异丙肾上腺素皮下注射致小鼠急性心肌缺血模型,观察活血通脉胶囊对小鼠存活时间的影响,在常压和减压条件下,观察缺氧时对小鼠存活时间的影响。结果：活血通脉胶囊组与模型组相比,可以显著改善心电图缺血性改变（P〈0．05）,其高、低剂量组均能延长小鼠平均存活时间,降低心肌耗氧量。结论：活血通脉胶囊可以有效改善冠脉循环,保护缺血心肌,延长小鼠成活时间。     

Cell-attached膜片上,咖啡因对猪冠状动脉平滑肌细胞KCa的调节作用

目的:研究咖啡因对猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道的调控机理,以期揭示胞内钙库RyR激活后,局部钙离子浓度升高和KCa的关系。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录大脑皮层神经元猪冠状动脉平滑肌细胞上KCa通道电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。实验数据应用CLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在cell-attached膜片上咖啡因对KCa通道有明显的作用,咖啡(0.1-5.0 mM)可以增加通道的开放概率(NPo),呈现出浓度依赖性,开放时间延长,关闭时间也随之缩短,而对电流幅值无明显影响,开放概率的增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P<0.05);洗去药物后通道活性可以一定程度的恢复到对照水平,再加入一定浓度咖啡因(如1.0mM)可再次激活KCa,激活程度与洗脱前较接近。结论:在细胞贴附式构型上咖啡因浓度依赖性地激活KCa,有饱和性。可能是通过影响胞内信号转导过程而调控KCa活性。