鸡羽根管作为组织工程支架材料的初步研究

目的 了解鸡羽根的结构特点,观察其在活体组织内的降解情况及其对周围组织的影响,为其作为组织工程备选支架材料提供依据.方法 健康鸡羽根,采用序贯的、不同程度(轻、中、重)理化处理程序,得到3种鸡羽根角蛋白(CCK-Ⅰ、CCK-Ⅱ、CCK-Ⅲ),光学显微镜/扫描电镜观察其形态结构.大鼠背部肌组织内植入鸡羽根角蛋白片(实验组)和未处理鸡羽根片(对照组),以及坐骨神经束间植入鸡羽根角蛋白丝(实验组)和未处理羽根丝(对照组),于不同时间点取材,观察其降解情况和组织相容性.结果 (1)光镜:鸡羽根管壁从内到外依次为4个致密层:嗜碱性均质状粗线,3～5层的嗜酸性角质层,60～100层含大量色素颗粒的环行角蛋白束和10～20层含少量色素颗粒的角蛋白束.扫描电镜:未处理的鸡羽根结构致密,管壁平整,无孔洞;处理后结构较疏松,可见大小、深浅不等的孔洞.(2)肌组织内植入:第8周材料呈细丝状或散在细颗粒状,部分被降解吸收,仍有少量炎性细胞,可见多核巨细胞;第12周材料降解为细小碎片.对照组各时间段材料结构完整.(3)神经束间植入:引起的组织反应与细胞类型同肌组织内植入组,神经组织无变性、坏死.结论 未处理的鸡羽根由多层致密的角蛋白束构成,含色素颗粒和少量基质.处理后表面出现许多孔洞,结构疏松,且体内可降解,其降解产物不引起机体组织的变性、坏死.鸡羽根有可能成为组织工程化器官或组织构建的备用支架材料.     

台式水银血压计测量血压教学规范化流程及拓展设计

课程是人才培养的核心要素。建设“两性一度”式的一流课程,创新教学方法,是提高学生培养质量的重要途径。南方医科大学在课堂实施台式水银血压计测量血压的案例中,按照科学实验的流程或者不同专业岗位胜任力对实验课堂进行重新设计,将以人为本、以患者为中心、安全意识、规范意识、工匠精神等职业素养和思政元素自然融入实验教学的全过程,使课程思政可操作化;同时,着力贯穿基于胜任力的学生学习理念,将问题导向的批判性思维贯穿全程,从而培养学生的科研思维、创新能力以及医学人文精神。     

鸡羽根角蛋白管毒性作用的研究

目的 观察鸡羽根角蛋白管作为组织工程材料的毒性作用.方法 分别制备不同处理强度的3种鸡羽根角蛋白管的浸提液并测定其化学成分.采用皮肤致敏实验(大鼠)、皮内刺激实验(家兔)、小鼠全身急性毒性实验以及体外细胞毒性实验观察鸡羽根角蛋白管浸提液的体内和体外毒性作用.结果 鸡羽根在浸出液中释放的主要物质为中等分子量的肽类物质,大分子蛋白释放不多.皮肤致敏实验和皮内刺激实验显示对浸提液不引起皮肤及皮内红斑、水肿和坏死现象.小鼠全身急性毒性实验中,腹腔注射浸提液的小鼠未出现死亡、衰竭、发绀、震颤、严重的腹膜刺激、眼睑下垂及呼吸困难等毒性症状.体外细胞毒性实验示浸提液细胞毒性接近于0级.结论 鸡羽根角蛋白管可被水解,释放一些肽类物质,其浸提液对皮肤无致敏作用,皮内刺激反应弱,不引起全身急性毒性症状,无细胞毒性.     

胶原膜包裹及环孢素A对鸡羽根角蛋白移植物组织相容性的改善作用

背景:前期实验提出将鸡羽根角蛋白管作为神经桥按材料这一设想,发现机体组织对鸡羽根角蛋白有一定的免疫捧斥作用埋植十于料周围组织中有人量炎性细胞出现.目的:观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白材料在体埋植对周围组织的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-1012007 01在南方医科大学组织学与胚胎学实验室完成.材料:选择SD大鼠42只,按随机数字表法分成5组,空白对照组6只,其余备组各9只.方法:参照胶原蛋白提取方法,由牛跟腱提取胶原蛋白.将经特殊处理的鸡剁根角蛋白埋植入大鼠竖脊肌组织中,鸡羽根角蛋白材料 环孢素A组大鼠材料埋植后2 周腹腔注射环孢素A5 mg/(kg·d):鸡羽根角蛋白材料浸泡环孢素A组将材料组仅埋泡于2.5 g/L 环孢素A后埋植:胶原膜包裹鸡羽根角蛋白材料组应用胶原膜包裹材料后埋植:单纯鸡羽根角蛋白材料组仅埋植材料:空白对照组仅作切口,不埋植材料.主要观察指标:分别于材料埋植后2,4,8周取材,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,应用免疫组织化学方法检测周围组织巨噬细胞的浸润情况.结果:①材料埋植后备组大鼠一般状况良好,刨口未见肿胀及渗液.②材料埋植后2,4,8周,材料埋植周围组织可见大量巨噬细胞,尤其足多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料:炎性细胞数量较少,以鸡羽根角蛋白材料 环孢索A组为著.③材料埋植后2,4,8周各组材料埋植周围组织均可见CD68阳性表达细胞,其中4周时巨噬细胞阳性数比其他两个时点多(P<0.05).结论:短期应用免疫抑制剂可显著改善鸡羽根角蛋白的在体组织相容性;鸡羽根角蛋自在体内可降解,巨噬细胞尤其是多核巨细胞参与了该过程.     

调控Smo活性对成年大鼠神经干细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened（Smo）对成年大鼠神经干细胞（ANSCs）增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法 培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验（CCK8）检测其对ANSCs增殖的影响;细胞划痕实验检测其对ANSCs迁移能力的影响;实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测Sonic Hedgehog（Shh）信号通路的细胞表面Patched蛋白（Ptch1）、G蛋白偶联受体Smo、转录因子（Gli1）以及神经导向因子（Slit1）和脑源性神经营养因子（BDNF）表达量的变化。结果 Smo激动剂PM对ANSCs的增殖有明显促进作用,48 h后PM组ANSCs的吸光度明显升高（P<0.01）;PM可以促进ANSCs的迁移,48 h后的PM组ANSCs划痕面积显著减小（P<0.01）;Smo抑制剂CPM对ANSCs的增殖和迁移均有显著的抑制作用;RT-PCR实验显示PM组细胞中的Ptch1、Smo、Gli1及Slit1、BDNF表达水平均明显增加（P<0.05）。结论 调控Smo的活性可以促进或抑制成年神经干细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调节BDNF和Slit1的表达有关。     

胶原膜包裹或应用环孢素A改善鸡羽根角蛋白材料的组织相容性

目的 观察经胶原膜包裹或应用免疫抑制剂后,鸡羽根角蛋白(CCK)材料在体埋植对周围组织的影响.方法 30只SD大鼠,随机均分为5组.将经特殊处理的CCK埋植入竖脊肌组织中.实验组:A组为CCK材料埋植加术后两周腹腔内注射免疫抑制剂环孢素A(CsA,日剂量5 mg/kg),B组为CCK材料浸泡CsA(2.5 mg/ml)后埋植,C组为胶原膜包裹CCK材料后埋植,D组仅埋植CCK材料.空白对照组仅作切口,不埋植材料.分别于术后2、4、8周取材,常规切片染色,光镜下观察埋植材料的降解情况及对周围组织的影响,免疫组织化学术检测周围组织内T淋巴细胞浸润情况.结果 术后各组大鼠一般状况良好,术后第2、4、8周,可见大量巨噬细胞,尤其是多核巨细胞分布于材料边缘,吞噬材料.炎性细胞数量较少.第2、4、8周A组CD3阳性表达细胞数较B组少,与D组有显著差异(P＜0.05),A组与空白对照组无显著差异(P＞0.05).结论 短期应用免疫抑制剂可显著改善CCK的在体组织相容性;CCK在体内可降解,巨噬细胞,尤其多核巨细胞参与了该过程.     

卵胞质移植-问题和展望

人类卵细胞间的胞质转移最近作为人类辅助生殖生物技术的手段并成为研究热点。许多研究表明线粒体对卵母细胞的受精和胚胎发育有显著影响。但是,卵胞质转移伴随着DNA异质即线粒体的异质性。本文对国内外近年来卵胞质转移的研究进展进行综述,并结合克隆技术对其进一步的发展提出自己的见解-逆克隆技术。     

卵胞质移植、克隆与逆向克隆

目的:最近人类卵细胞间的胞质移植被作为人类辅助生殖生物技术的手段并成为研究热点。本文回顾了该领域的研究进展和存在的问题,并以此为基础提出“逆向克隆技术”这一新概念。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1998-01/2006-12期间的相关文章,检索词为“ooplasmic transfer,mitochondria heteroplasmy,animal cloning”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1998-01/2006-12期间的相关文章,检索词为“胞质转移,线粒体异质性,动物克隆”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与卵胞质移植、克隆或逆向克隆研究相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到126篇相关文献,31篇文献符合纳入标准,排除的95篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的31篇文献中,17篇涉及卵胞质移植,13篇涉及动物克隆,1篇涉及逆克隆。资料综合:人类的生殖技术领域发展迅速,卵胞质移植技术得到广泛应用。研究表明,卵胞质对受精和胚胎发育具有重要作用,其中线粒体与受精和胚胎发育关系最为密切。大量实验对细胞质与细胞核的相互作用、基因组的重编程机制上进一步研究,同时也在技术上不断改进。克隆技术有广阔的应用前景,同时也存在着不少问题,基于此提出以胞质转移为基础的“逆向克隆技术”。结论:线粒体对卵母细胞的受精和胚胎发育有显著影响,但卵胞质移植可能导致线粒体的异质性及其潜在的问题还需要进一步研究。以卵胞质转移为基础的“逆向克隆技术”是否能达到克隆动物的结果前景喜人。     

实验形态学中"课程思政"实施方法探索与反思

实验形态学是临床医学生必修的一门专业基础课,在教学中贯彻"课程思政"具有天然的合理性,如何把思政教育简化、通俗地融入到专业课程教学中,是对教师的挑战,也是教改的机遇.专业课程自身蕴含着思政教育元素和承载着思政教育功能,是隐性思政教育的有效形式,也是课程育人本质的回归.思政课程与课程思政是人才培养的"一体两翼",逐步建立显性思政教育与隐性思政教育协同与融和机制,是实现全程育人的有效途径.实验形态教学以获得人体标本和实验动物为开端,贯彻课程思政理念,不仅学到实验知识和技能,还培养了学生爱岗敬业,精益求精,吃苦耐劳,严谨细致的人文精神,为下一步健康成长打下坚实的基础.