抗MRSA-PBP2a卵黄抗体的制备及酶联寡聚核苷酸吸附试验的建立北大核心CSCD

目的制备耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)抗原的卵黄抗体IgY,建立检测MRSA的酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)方法。方法用大肠埃希菌原核表达并纯化PBP2a,采用胸部肌肉多点注射方式免疫产蛋母鸡,水稀释法粗提IgY,BCA法测定蛋白浓度,Western blot分析其特异性;以IgY抗体为捕获分子,以生物素标记的PBP2a特异性适配体为检测分子,建立检测MRSA的ELONA方法;对IgY包被量、生物素标记适配体用量及HRP标记链霉亲和素稀释度进行优化,测定该方法的灵敏度、特异性和重复性。结果成功表达和纯化PBP2a蛋白,Western blot显示IgY抗体能特异识别PBP2a蛋白。建立了检测MRSA的ELONA方法,其最佳包被用IgY稀释度为1∶1 600,生物素标记适配体用量为400nmol/L,HRP标记链霉亲和素稀释度为1∶2 000。优化的ELO-NA对MRSA的检测限为2.87×10~2 CFU/ml;重复性试验的变异系数为4.7%。用该方法检测34株临床分离的金黄色葡萄球菌,与梅里埃VITEK2Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统分析结果一致性为100%。结论制备的抗MRSA PBP2a卵黄抗体具有较高特异性,基于该抗体建立的ELONA方法灵敏、特异、重复性好,可用于MRSA PBP2a的检测。     

结核分枝杆菌基因编辑的研究进展

结核分枝杆菌是结核病的病原菌,利用基因编辑技术研究结核分枝杆菌未知基因功能,对于发现新的抗结核药物靶标、改进卡介苗或开发新疫苗具有重要的研究意义。本文就基因编辑技术在结核分枝杆菌研究中的应用作一综述。     

DNA氧化损伤标志物8-OHdG检测方法及其生物学应用

正活性氧自由基(ROS)是一类具有强氧化作用的化学活性物质,广泛参与机体的生理与病理过程。机体在细胞正常新陈代谢过程中,在外源性化学致癌物质和辐照(X射线,γ-射线和紫外线)条件下可产生ROS,导致多种形式的DNA损伤:如碱基修饰、链内/间交联、链断裂、碱基丢失等。通常情况下,机体内一定数量自由基的存在是生物体维持正常生理功能所必需的,并且体内的抗氧化系统可以及时地清除多余     

结核分枝杆菌α晶体蛋白(Rv2031c)的T、B细胞抗原表位在线分析

目的预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白α晶体蛋白(Rv2031c)的抗原表位。方法 BLAST在线分析Rv2031c与人类蛋白的同源性;利用DNAStar软件包中的Protean模块预测其B细胞和T细胞抗原表位;RANKPEP和SYPEPITHI在线预测辅助性T(Th)细胞抗原表位;SYFPEPI、BIMAS和Net CTL方法在线预测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位。结果 Rv2031c与人类蛋白同源性较低,有8个潜在的B细胞抗原表位,7个候选Th细胞抗原表位和3个候选CTL表位。结论 Rv2031c含有较多潜在的人类B细胞、Th细胞和CTL抗原表位,可作为新的结核病疫苗研发的候选靶蛋白。     

临床分离肠球菌耐药性和耐药基因分布及其相关性研究

目的:研究临床分离肠球菌的耐药性、耐药基因分布及其相关性.方法:采用Vitek2 compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行临床分离肠球菌的鉴定和药敏试验;提取细菌基因组DNA,通过PCR法检测14种肠球菌耐药相关基因;采用SPSS25.0软件对肠球菌耐药性和耐药基因相关性进行统计学分析.结果:临床分离的89株肠球...