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1.
目的探讨从噬菌体抗体库分离杀伤细胞抑制受体(KIRs)特异性ScFv(singlechainFv)的可行性及其特征。方法所用KIR为NKAT2,其可溶性形式为NKAT2-IgG1。噬菌体抗体库为Nissim等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的NKAT2-IgG15次筛选后,可溶性ScFv由IPTG诱导细菌而获得,筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单位及DNA酶切图谱分析。ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹分析ScFv特异性及免疫学特征,并进行DNA的序列测定。结果5次筛选后,噬菌体得到200倍的富集,酶切图谱也显示某种构型噬菌体的富集。40个克隆的细菌上清经测试,37个显示与NKAT2有较强的反应。ScFv经聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹显示相对分子质量为30×103,其DNA序列完全相同,重链CDR3区编码氨基酸为ESNLVTC,重链其它部分与DP35一致。结论研究初步结果表明,用噬菌体抗体库可以快速、简便地产生用于KIR研究的较高特异性的试剂。  相似文献   
2.
4、高分辨显带(High ResolutionBanding) 前期和前中期染色体的高分辨标本的命名法是1971年巴黎会议和1978年ISCN所制定的中期染色体带型命名法的扩展。巴黎命名体制已考虑到将有更多的带会被扩充进去。现已做了少量改动,并在图9的注释和图中给予了特别注明。  相似文献   
3.
用地高辛配基标记探针原位杂交检测单拷贝基因   总被引:1,自引:0,他引:1  
用地高辛配基标记探针原位杂交检测单拷贝基因乔旭刚,朱平,李崇高我们探讨地高辛配基随机引物法标记探针的原位杂交在人类染色体上检测单拷贝基因的可行性。1材料与方法1.1材料与试剂正常人染色体标本来自本室工作人员外周血。DNA探针:T细胞表面受体β链基因探...  相似文献   
4.
用流式细胞仪检测两个自然杀伤细胞抑制受体的单链抗体(NKAT2-scFv;NKAT4-scFv),识别细胞表面受体分子的能力。单链抗体是吸附固相的抗原筛选一噬菌体抗体库而获得。结果显示,含NKAT2-scFv的细菌上清及胞质提取物均可识别到表达在细胞表面的NKAT2受体分子,但含NKAT4-scFv的细菌上清及胞质提取物均未成功  相似文献   
5.
目的与方法:用Nisim等噬菌体抗体库经细胞筛选,分离自然杀伤细胞抑制受体(NKAT1)的单链抗体。结果:8次筛选循环后,分离到的单链抗体不但可以特异性识别到表达在细胞表面的NKAT1分子,而且也能与纯化的NKAT1蛋白结合,这些单链抗体为31kDa的分子。结论:用噬菌体抗体库可以简便、快速产生自然杀伤细胞抑制受体特异性的单链抗体  相似文献   
6.
用一噬菌体抗体库分离人杀伤抑制受体特异性的单链抗体。经ELISA分析显示,50个克隆中有14个与NKAT4蛋白反应呈强阳性。这些克隆的重链可变区胚系为DP 47。WesternBloting显示表达在上清中的单链抗体为单体。本研究结果表明,从一噬菌体抗体库可比较简便地分离到杀伤抑制受体的特异性单链抗体。  相似文献   
7.
本文用免疫酶标法测定IL—2分泌细胞和细胞膜IL—2受体。其结果表明急性非淋白血病细胞条件培养液(即含白血病细胞相关抑制活性)对PHA诱导的正常人外周血IL—2分泌细胞和细胞膜IL—2受体表达均有明显抑制作用,但对PHA诱导的正常人外周血单个核细胞培养上清的IL—2活性无明显影响。  相似文献   
8.
用噬菌体抗体分离NK细胞抑制受体特异性的ScFv片段   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨从噬菌体抗体库分离杀伤细胞抑制受体特异性ScFv的可行性及其特征。方法 所用KIR为NKAT2,其可溶性形式为NKAT2-IgG1。噬菌体抗体库为Nissim等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的NKAT2-IgG15次筛选后,可溶性ScFv由IPTG诱导细菌而获得,筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单体及DNA酶切图谱分析。  相似文献   
9.
染色体原位杂交技术是建立在DNA变性、复性动力学基础上,利用核酸分子的碱基序列配对的互补性,将已知的带有标记的DNA探针与细胞标本的染色体上经变性解链后的单链DNA,通过二者特定碱基序列互补,结合成长性核酸杂交分子,经放射性、非放射性方法在染色体上显示出其位置。1970年Pardue等在细胞学标本上建立了DNA-DNA杂交方法标记着染色体原位杂交方法的产生。1974  相似文献   
10.
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