国内应用甲苯咪唑驱治肠道线虫研究进展

甲苯咪唑系驱治肠道线虫新药,具广谱、高效、低毒等优点。70年代即已在国内外广泛使用。为落实卫生部《全国寄生虫病防治“八五”计划和2000年规划》的防治目标,我国在对该药的不同剂型、不同剂量的服药方法进行了效果观察,现综合报道如下。一、不同剂型的驱虫效果甲苯咪唑片剂常规剂量,蛔虫200mg顿服,bid,虫卵阴转率可达85～100％;钩虫每     

重组MHCⅠ类分子K^b-EGFP分子的构建及表达

目的 构建绿色荧光蛋白标记的MHCⅠ类分子K^b(K^b-EGFP融合蛋白)，并在哺乳动物细胞中获得功能性表达。方法 RT-PCR的方法获得小鼠MHCⅠ类分子K^b cDNA，克隆入真核表达载体pEGFP-N1中EGFP分子的上游，脂质体转染COS-7细胞，G418加压筛选获得抗性重组细胞。荧光显微镜下观测重组分子的表达及胞内定位情况。结果 分子克隆的方法获得了预期的重组质粒，质粒经DNA序列测定证实阅读框无误，转染COS-7细胞后的抗性克隆胞浆内可以观察到明亮的绿色荧光，特征性地分布于细胞质膜，及核周、膜下的囊泡结构中。结论 所构建的K^b-EGFP融合蛋白在细胞内表达后具有MHCⅠ类分子的特征性分布，提示该重组分子具有野生型MHCⅠ类分子的生物学特性和胞内分布特征，为进一步深入研究MHCⅠ类分子胞内动态分布及分子功能提供了良好的细胞和分子模型。     

豚鼠内淋巴囊上皮细胞Na+,K+-ATP酶不同β亚基的mRNA表达

目的　进一步研究内淋巴囊上皮细胞Na ,K -ATP酶不同 β亚基的表达。方法　采用豚鼠内淋巴囊冰冻切片、原位杂交的方法检测Na ,K -ATP酶不同 β亚基mRNA在内淋巴囊上皮细胞中的表达。结果　在内淋巴囊上皮细胞胞浆内可见Na ,K -ATP酶不同 β亚基的阳性颗粒 ,β1亚基表达较弱 ,β2 亚基表达较强。结论　结合其他报道 ,内淋巴囊上皮细胞具有多种亚基异构体组成的Na ,K -ATP酶的表达 ,而结肠上皮、肾小管上皮的Na ,K -ATP酶几乎仅有α1β1型 ,提示其离子转运过程可能不同。     

小鼠肥大细胞瘤P815特异抗原P1A的克隆与表达

目的 克隆小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞株的ＰＩＡ基因以制备肿瘤ＤＮＡ疫苗,方法 用ＲＴ－ＰＣＲ方法制备ＰＩＡ基因,以哺乳细胞高效表达质粒ｐＣＩ－ｎｅｏ为载体,构建重组ＤＮＡ疫苗。重组体用克隆位点上游和下游的Ｔ７和Ｔ１３启动了序列为测序引物,用自动测序仪测定鉴定克隆的正确性。再将鉴定过的重组质粒用磷酸钙法转化２９３细胞,用ＲＴ－ＰＣＲ法鉴定转化细胞中ＰＩＡ基因的表达。结果 正确构建了ＰＩＡ／ｐＣＩ－ｎ     

CHEK2基因多态性与食管癌淋巴结转移的关系

目的:研究中国汉族人群中细胞周期检测点激酶2(checkpoint kinase 2,CHEK2)基因多态性与食管癌淋巴结转移风险性的关系.方法:采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析380例食管癌和380例非肿瘤对照CHEK2基因多态性,并分析85例有淋巴结转移的食管癌和270例无淋...     

β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用

目的 构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法.方法 构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与,12细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位.结果 构建了B2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定.结论 β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定.     

抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在诊断类风湿性关节炎中的意义

目的 探讨抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(anti-mutated citrullinated vimentin antibody,Anti-MCV)在诊断类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中的价值.方法 选取确诊的RA患者51例(RA组)、非RA自身免疫性疾病患者36例(疾病对照组)和健康查体者30例(对照组)作为研究对象.根据临床资料计算DAS28评分,将RA组分为活动组和稳定组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中的抗MCV抗体、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)及白细胞介素-6(IL-6)水平,采用免疫比浊法检测血清中C-反应蛋白(CRP)的浓度水平,并进行比较.结果 RA组抗MCV抗体的浓度水平显著高于非RA组和对照组(P均＜0.01);活动组抗MCV抗体的浓度水平显著高于稳定组和对照组(P均＜0.01);经Spearmau相关性分析,抗MCV抗体的浓度水平与CRP及IL-6呈正相关,而与DAS28无相关性;抗MCV抗体与抗CCP抗体的诊断效率无显著差异,但是灵敏度高于抗CCP抗体.结论 抗MCV抗体具有较高的灵敏度和特异性,并且能提示RA病情的活动情况,可以成为新的辅助RA诊断的血清学指标.     

CTL表位预测的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位是抗原蛋白中经抗原提呈细胞(APCs)处理,与MHC-Ⅰ类分子结合并共同被T细胞抗原受体(TCR)特异性识别从而诱导相应的CTL克隆产生免疫应答的短肽.     

辛伐他汀含药血清对兔血管平滑肌细胞增殖及原癌基因表达的作用及意义

目的　探讨辛伐他汀对体外培养兔血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及机制。方法　 16只雄性新西兰兔随机分为空白血清对照组和 3个不同剂量的辛伐他汀组 (5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg) ,7d后采血并混合每组 4只兔血 ,无菌分离制备分组辛伐他汀含药血清。另采用内皮素 1刺激原代培养正常喂饲兔主动脉VSMC建立增殖模型 ,采用MTT及3 H TdR法检测分组辛伐他汀含药血清对VSMC增殖的作用 ,采用免疫细胞化学方法检测VSMCc myc、c fos抗原表达、RT PCR半定量检测c myc及c fosmRNA表达。结果　与对照组相比 ,不同分组辛伐他汀含药血清呈剂量依赖性抑制血管平滑肌细胞增殖 (P <0 0 5～ 0 0 1) ;免疫细胞化学及RT PCR结果表明 ,不同分组辛伐他汀含药血清呈剂量依赖方式抑制VSMCc fos和c mycmRNA表达(P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论　兔口服辛伐他汀后的血清抑制VSMC增殖 ,而辛伐他汀含药血清抑制c fos和c myc表达可能是其抑制VSMC增殖和抗动脉粥样硬化的机制之一。     

丝状噬菌体随机呈现肽库的构建与鉴定

目的：构建一个随机２０个氨基酸的丝状噬菌体肽库。方法：扩增随机合成ＤＮＡ模板,经限制性内切酶ＸｈｏⅠ＋ ＳｐｅⅠ酶切后克隆进噬菌粒ｐＴＭＢ２,构建随机丝状噬菌体肽库并检验其库容及随机性。结果：完成丝状噬菌体随机肽库的构建,其库容为２．１×１０８,其氨基酸分布于理论频数无显著差异。结论：丝状噬菌体随机肽库被成功构建。