改良式小梁切除联合深层巩膜切除术

小梁切除术一直是最为经典的抗青光眼手术,也是适应证最广、降眼压幅度最大的外滤过性手术代表。根据小梁切除术的降眼压机制及其术式改良的演变与发展,本文在既往各种术式改良的基础上,总结了一种较为优化的术式——小梁切除联合深层巩膜切除术。此术式发挥了多种引流机制、降眼压幅度大、可有效避免滤过泡相关远期并发症;手术适应证与小梁切除术相同,更适合于中晚期青光眼患者;操作简单、易学;术后并发症相对较少。(眼科,2022,31:175-180)     

乳腺干细胞培养基的建立及有效性验证

背景：干细胞培养基,尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。目的：利用Sca-1＋乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。方法：用BM培养基培养乳腺器官样小体,6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选出MaECM培养基,培养乳腺细胞6 d后,免疫磁珠筛选Sca-1＋和Sca-1-细胞群,流式细胞术分析Sca-1阳性细胞的纯度,1×10^4 Sca-1＋或Sca-1-细胞种植在4只鼠双侧乳腺脂肪垫上,6-8周后取出乳腺脂肪垫,以卡红整体染色和苏木精-伊红染色分析长出乳腺的结构数量。结果与结论：乳腺器官样小体用BM培养基培养6 d后,检测到大量Sca-1和vimentin阳性的成纤维细胞,说明BM培养基不适合分离Sca-1＋乳腺干细胞。筛选出的MaECM培养基能够抑制成纤维的生长。磁珠筛选后,流式细胞术检测Sca-1＋细胞在Sca-1＋和Sca-1-细胞群的纯度分别是92%和5%。移植实验显示在8个种植Sca-1＋细胞的脂肪垫生长出6个乳腺结构;而在8个种植Sca-1-细胞的脂肪垫中除1只鼠死亡,其余脂肪垫中均未长出乳腺结构。提示MaECM培养基适用于培养鼠乳腺干细胞。     

成骨诱导或干扰素γ预处理对胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞免疫活性的调节

背景：骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后，理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥，但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下，有可能分化成一种仍具有免疫调节活性的终末细胞，不被机体的免疫识别系统清除掉。 目的：在体外运用成骨诱导及干扰素γ预处理来模拟体内组织分化及炎性因子微环境，观察在此作用下胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞是否能够保持其在自然条件下所呈现的免疫学活性。 设计、时间及地点：细胞学体外对照观察，于2007-09/2008-05在北京协和医学院基础学院完成。 材料：2例骨髓样品取自流产胎儿，由北京回龙冠妇产医院提供。外周血样品取自15~35岁健康志愿者，由北京三○七医院提供。地塞米松等诱导因子和干扰素γ为美国Sigma公司产品。 方法：Ficoll法分离胎儿骨髓单个核细胞，取白环层以上细胞，以1×106/cm2密度接种，贴壁法纯化，采用阴性分选法去除CD45+、GlyA+和CD34+细胞，分离扩增得到Flk-1+骨髓间充质干细胞。以淋巴细胞分离液梯度离心分离外周血单个核细胞，用于混合淋巴细胞培养实验及有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖实验。 主要观察指标：流式细胞仪鉴定细胞表型，用成骨、成脂、成软骨和成内皮诱导液检测其分化潜能，成骨诱导或干扰素γ预处理后细胞表面抗原表达、对淋巴细胞增殖及活化抗原CD69、CD25表达的影响，对白细胞介素10和转化生长因子β分泌水平的影响。 结果：光镜下骨髓来源的间充质干细胞为成纤维细胞样贴壁生长，均高表达Flk-1，同时高表达黏附分子CD29、CD44、CD105，造血细胞标志CD34、CD45呈阴性；可向成骨、成脂肪、成软骨和成内皮方向分化；低表达MHC-Ⅰ类分子，不表达　　　　MHC-Ⅱ类分子，成骨诱导能上调MHC-Ⅰ表达，干扰素γ预处理可上调MHC-Ⅱ表达。骨髓源Flk-1+间充质干细胞经成骨诱导7 d或干扰素γ预处理48 h后，仍呈低免疫原性，不激发异基因淋巴细胞增殖，抑制植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖效果明显增强（t=2.57，P < 0.05），可进一步抑制CD69和CD25的表达，ELISA检测显示其培养上清分泌白细胞介素10水平增强（t=2.66，P < 0.05），但分泌转化生长因子β水平经成骨诱导后无明显变化，干扰素γ预处理后则明显升高。 结论：经成骨诱导或干扰素γ预处理后，骨髓源Flk-1+间充质干细胞仍能保持低免疫原性，且免疫调节活性进一步提高。     

伴有茶色尿的糖尿病酮症酸中毒1例分析

一、病例摘要 患者女，26岁，恶心、呕吐、间断发热、腹痛，伴肌痛、多尿、多饮、乏力和谵妄6天。既往健康。曾口服避孕药，无服用中药及饮酒史。其父患2型糖尿病。表现轻度谵妄，过度通气，有脱水征。BW133磅，P110／min，BP102／62mmHg。其他检查大致正常。血常规WBC24 800／ml。尿呈茶色，尿糖( )，酮体( )，RBC(-)，WBC(-)。     

餐前与餐后的血糖控制

24小时内7个时点(三餐前、后和睡前)的血糖谱中，哪些时点血糖值对HbA1c影响最大?     

处理细胞培养污染的新方法

在进行细胞组织培养时,虽然做了大量的消毒和灭菌工作,实验中又注意做到无菌操作,但仍不能完全避免污染。细胞培养产生的污染最常见的是细菌和真菌污染。一般处理污染采用比常用量大5～10倍的冲击(即青霉素和链霉素合用,剂量为每毫升培养液各500～1000U)。但这种方法常常不能清除培养液中的微生物。     

OMC685的几种病毒感染观察(研究简报)

病毒必须依赖敏感的活细胞才能复制.对细胞的种类,病毒常常有一定、甚至是十分严格的选择性.体外的病毒感染细胞试验,不但是研究病毒致病机理的重要途径,也是分离和鉴定病毒的常用的方法.肿瘤细胞系的建议,为研究病毒提供了非常有用的实验材料.我们用万启惠等建立的卵巢粘液性囊腺癌细胞系细胞OMC685[1],分别感染脊髓灰质炎病毒(来自中国医学科学院医学生物学研究所,昆明)、麻疹病毒、腺病毒(2种病毒均来源于上海市防疫站)、单纯疱疹病毒(来源于北京病毒研究所)、流感病毒(来源于北京流行病学微生物学研究所)和狂犬病毒外,都能观察到病毒在细胞内增殖的情况.     

玻璃注射器三种不同包装方法微粒检测对比

输液中不溶性微粒(下简称微粒)对人体所造成的潜在性危害已为人们所共识。目前,多数医院仍普遍采用多次使用的玻璃注射器。对玻璃注射器在加入注射药的同时使输液微粒增加已有许多报道[1～3]。洗涤虽然是去除热原和微粒的关键操作,但也不可忽视包装方法在其间所产生的吸附作用。为了寻找一种减少微粒的包装方法,1998年11月我们对本室回收的150副50ｍｌ玻璃注射器经同样程序清洗后,选用三种不同包装方法包装然后灭菌,并对灭菌后的玻璃注射器进行微粒检测对比。现将结果报告如下。1　仪器材料ＹＪ-875Ａ型净化工作台(苏州净化设备厂生产);ＺＷ…     

肺移植患者生活质量现状及影响因素研究

目的调查肺移植术后患者的生活质量现状及其影响因素,为制订改善肺移植患者生活质量方案提供参考。方法采用一般资料问卷和SF-36量表,对217例肺移植术后门诊随访患者进行横断面调查。结果肺移植患者的生理功能、生理职能、躯体疼痛、总体健康、社会功能、情感职能维度得分显著低于国内常模(均P0.01);躯体方面生活质量的影响因素为照顾者、是否发生血液系统并发症和腹泻天数;心理方面生活质量的影响因素为是否发生血液系统并发症和工作状态(均P0.05)。结论肺移植术后患者生活质量较低,术后生活质量受多因素的影响,应重点关注患者移植后并发症的发生情况,做好针对性护理。     

穴位电刺激对卒中后大鼠认知功能及氧化应激水平影响

目的 研究穴位电刺激对卒中模型大鼠认知功能的影响及可能作用机制。方法 将36只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组10只和手术组26只。手术组采用改良Longa线栓法建立大脑中动脉缺血(MCAO)模型,假手术组仅作颈动脉分离,不进行造模。大鼠完全清醒后,按照Zea Longa评分法将手术组1-3分大鼠随机纳入模型组和治疗组。造模后1d对治疗组大鼠神庭、百会穴施以连续2周的电针治疗。模型组和假手术组大鼠只固定时间抓取,不给予任何干预措施。治疗结束后,采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知功能,取大鼠脑组织检测脑组织含水量、酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量、qPCR法检测大鼠脑组织PI3k、Akt mRNA表达水平。结果 模型组、治疗组和假手术组逃避潜伏期依次缩短,目标象限停留时间依次延长,穿越原平台次数依次增加,脑组织含水量依次减少,脑组织SOD含量依次增高,MDA含量依次降低(P<0.05);治疗组PI3k、Akt mRNA表达水平明显高于假手术组及模型组。结论 百会、神庭电针干预可改善脑卒中大鼠认知功能,缓解脑水肿,其作用机制可能与改善脑组织SOD活性,减轻脑组织MDA蓄积,上调PI3k/Akt通路表达有关。