不同时间穴位贴敷对过敏性哮喘大鼠免疫指标的影响

目的观察不同时间穴位贴敷对过敏性哮喘大鼠行为学及血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-?(IFN-?)水平的影响,探讨穴位贴敷治疗哮喘的作用机制。方法 50只Wistar雄性大鼠按体重采用随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(哮喘模型组)、C组(地塞米松组)、D组(穴位贴敷2 h组)和E组(穴位贴敷4 h组)。以鸡卵白蛋白(OVA)制备大鼠哮喘模型,14 d后各组分别给予相应治疗。观察大鼠治疗前后引喘潜伏期和发作总持续时间变化;采用HE染色检测大鼠肺组织病理改变,ELISA法测血清中IgE、IL-4和IFN-?水平变化。结果与A组比较,B组引喘潜伏期显著缩短、发作持续时间显著延长(P0.05);病理显示肺组织炎症明显;IgE、IL-4显著升高,IFN-?显著降低(P0.05)。与B组比较,C组、D组、E组治疗后引喘潜伏期明显延长、哮喘发作持续时间明显缩短(P0.05);肺病理组织观察显示穴位贴敷后支气管及肺实质炎性改变显著改善;血清中IgE和IL-4水平显著降低,IFN-?水平显著升高(P0.05)。D组、E组各指标比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论穴位贴敷可以通过改善肺组织炎症,减低Ig E、IL-4,升高IFN-?的表达来治疗哮喘,且不同贴敷时间对治疗效果无明显影响。     

对慢性疾病住院患者不同健康教育方式效果的调查分析

目的 调查慢病患者住院期间对不同健康教育方式的效果评价,并检验床旁智慧健康教育方式是否适合住院患者使用。方法 采用自行设计的问卷调查全科医学科60例慢性疾病住院患者对4种健康教育方式(床旁智慧健教系统、健康教育交流会、健康教育处方、病区宣传栏/宣传手册)的主观感受并进行评分。结果 4种健康教育方式的总评分比较,床旁智慧健教系统得分高于健康教育交流会、健康教育处方、病区宣传栏/宣传手册。床旁智慧健教系统与宣传栏/宣传手册、健康教育处方的10项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与健康教育交流会相比较,在内容的实用性、简明性、可推广性、内容满意度上有统计学意义(P<0.05),在可接受性、指导性、互动性等方面差异无显著统计学意义(P>0.05)。不同性别、年龄及文化程度对于床旁智慧健教系统的评价差异无显著统计学意义。结论 4种健康教育方式在慢病患者住院期间均起到了健康宣教的作用,但是就健康教育方式本身而言,床旁智慧健教系统获得的认可度更高,且不受性别、年龄及文化程度的影响,因此,对于住院患者来说此种方式是可以在病区推广使用的。     

Otoconin 90蛋白在豚鼠内耳的表达

目的观察Otoconin 90蛋白在内耳的表达情况,探讨其在耳石代谢中的意义。方法采用免疫组织化学SP方法 (streptavidin-perosidase,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)检测正常豚鼠内耳切片各主要部位Otoconin 90表达情况。结果 Otoconin 90蛋白不只在椭圆囊和球囊囊斑的感觉上皮有表达,在与其临近和相对位置的非感觉上皮,以及壶腹、半规管和耳蜗等多个部位均有丰富表达,在椭圆囊和球囊囊腔、半规管内等也有染色阳性物质出现。结论 Otoconin 90蛋白在内耳呈现出"多点"表达的特点,提示内耳多处产生Otoconin 90,可能最后转运至椭圆囊和球囊囊斑,在此与钙离子相互作用形成耳石。     

MEIS1在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨骨髓嗜病毒整合位点1(MEIS1)在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义。方法选取45例子宫内膜样腺癌患者的病变组织(内膜癌组),以及12例非内膜病变患者的正常子宫内膜组织(对照组),采用免疫组织化学染色检测2组组织中MEIS1蛋白的阳性率,分析内膜癌组MEIS1蛋白与临床病理特征、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)间的关系。结果子宫内膜样腺癌组织中,MEIS1蛋白主要表达于腺上皮细胞胞核中。内膜癌组的MEIS1蛋白阳性率高于对照组(P <0.05)。子宫内膜样腺癌组织中,MEIS1的表达与腺癌细胞分化级别、分期、肌层浸润深度、淋巴结转移、脏器转移等均无关(P均> 0.05),与ER、PR的表达有关(P均<0.05)。结论 MEIS1在子宫内膜样腺癌中呈高表达,并与ER、PR的表达相关,可能参与了子宫内膜样腺癌的发生机制。     

118例宫腔粘连患者的临床指标分析

目的 探讨重度与非重度宫腔粘连（IUA）患者各项临床指标之间的差异。方法 收集经宫腔镜确诊IUA的118例患者的临床资料,根据IUA AFS评分标准将患者分为重度IUA组（重度组,41例）和轻中度IUA组（非重度组,77例）,并分析2组患者各项临床指标间的差异。结果 与非重度组患者比较,重度组患者的孕次较多、2次以上清宫史者比例较高、宫腔镜电切操作次数较多（P均< 0.05）。2组中人工流产术后、宫腔镜下电切术后、子宫动脉栓塞术联合清宫术后宫腔操作史者比例比较差异均有统计学意义（P均< 0.05）。重度组患者中宫腔操作次数 ≥3次者比例（85%）高于非重度组（P < 0.05）;重度组患者中经阴道彩色多普勒超声提示宫腔异常（回声不均、连续性中断、显示不清或粘连）者的比例高于非重度组（P < 0.05）。结论 人工流产术、宫腔镜下电切术和子宫动脉栓塞后清宫术可增加IUA发生的风险,经阴道彩色多普勒超声对重度IUA有较好的诊断价值。     

抗人结肠癌单抗MC5的功能性ScFv在大肠杆菌中的可溶性表达

目的：制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段（ScFv）。方法：从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA，RT-PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因（VH和VLDNA），经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1，转化菌经辅助噬菌体M13KO7感染后，获得重组噬菌体。以高表达MC5结合抗原的人结肠癌细胞系SW480对重组噬菌体进行2轮筛选后，经ELISA筛选呈现抗体ScFv片段的噬菌体单克隆。取2个强阳性克隆的噬菌体感染大肠杆菌HB2151，用于表达可溶性ScFv。经点印迹和Western印迹对可溶性ScFv进行鉴定，经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。结果：所获得的VH、VL和ScFvDNA分别约为340、320和750bp。对重组哓菌体经2轮亲和筛选后，经ELISA从25个克隆中筛检出10个抗原阳性克隆。源于2个强阳性克隆的可溶性ScFv的分子质量为32000u，且浓集于细菌周质腔中，可溶性ScFv具有抗原结合活性，其结合位点与亲本单抗MC5相同。结论：针对MC5的具功能活性的可溶性ScFv的成功制备，为人结肠癌的体外（乃至体内）研究提供了新的靶向载体分子。     

血栓弹力图在血液肿瘤患者预防性输注血小板的价值

目的探讨血栓弹力图(TEG)对指导血小板减少的血液肿瘤患者进行血小板预防性输注的预示价值。方法选择2014年1~10月该院血液科收治的血小板减少(PLT50×10~9/L)的血液肿瘤患者30例,根据是否有出血症状分为出血组12例,未出血组18例。空腹抽取患者血液,分别进行PLT、TEG及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)血凝四项检测。结果出血组与未出血组的PLT与TEG的MA值分别为(8.1±4.2)×10~9/L、(25.3±10.6)×10~9/L与(24.8±5.2)、(42.1±6.3)mm,差异有统计学意义(P0.05),并且PLT与MA值呈正相关(r=0.811 7,P0.05)。凝血四项在两组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。以PLT≤20×10~9/L,MA≤40 mm为临界值,两者预示血小板减少出血的敏感性均为100.0%,而特异性则分别为55.6%、94.4%。结论血小板的凝血功能与其数量和功能有关,TEG可综合测定血小板的凝血活性,其预测血小板减少引起的出血特异性要比PLT高,所以TEG可以成为预测血小板减少引起的出血并作为血小板预防性输注的指标。     

针刺结合有氧训练对脑卒中后肢体偏瘫的康复疗效观察

目的观察脑卒中后肢体偏瘫患者进行针刺结合有氧训练的临床效果。方法共120例偏瘫患者随机分为实验组和对照组,各60例。分别进行针刺后有氧训练和单纯针刺疗法。治疗周期为4周,每周5次,针刺时间相同,有氧训练时间为30分钟。分别评定其生理耗能指数(Physiological cost index,PCI)、10米最大步行速度测试(10m maximum walking speed,10m MWS)及Barthel指数(BI),并记录实验组结束后所测最大心率和患者耐受时间。结果治疗前实验组PCI、10m MWS、BI指数与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。两组患者治疗后与组内治疗前比较,PCI、10m MWS、BI指数各评定差异有显著性意义(P<0.05),实验组疗效明显优于对照组(P<0.01)。实验组结束后所测最大心率和患者耐受时间较治疗前明显延长(P<0.05)。结论针刺结合有氧训练对脑卒中肢体偏瘫功能的恢复有积极作用,有助于患者心肺功能的提高,明显改善患者日常生活自理能力并增强生存信心。     

GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化

目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。     

日本血吸虫TGF-β受体Ⅰ基因胞外段的克隆与表达

目的获得日本血吸虫TGF-β受体I胞外段(SjTβRIout)的序列,行原核克隆和表达,并分析其蛋白的免疫学功能。方法应用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)方法获得SjTβRI基因cDNA部分序列,用RT-PCR方法扩增SjTβRI胞外段(SjTβRIout)基因,构建pET28a(+)重组原核表达载体,并测序鉴定。将质粒转入大肠埃希菌,IPTG诱导表达,并使用Ni离子亲和层析并透析处理获得纯化重组蛋白。使用纯化蛋白与弗氏佐剂共同免疫SD大鼠获得抗血清,使用ELISA方法检测血清中SjTβRIout特异抗体IgG含量。结果成功构建SjTβRIout原核表达载体。测序鉴定显示SjTβRIout包含399bp,编码133个氨基酸,并且与曼氏血吸虫TGF-β受体I的同源性较高。重组蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为20000,与目的基因编码蛋白的预测分子量相符。经重组蛋白免疫的SD大鼠产生高效价(>1:100000000)的抗原特异性IgG抗体。结论首次获得pET28a(+)-SjTβRIout的重组蛋白,并且证明其具有良好的免疫原性。