人胚胎干细胞系HUES4的培养和染色体核型分析

目的建立人胚胎干细胞无动物源性饲养层培养方法,同时对长时间体外培养的人胚胎干细胞核型变化进行分析。方法人胚胎干细胞系HUES4细胞分别培养于小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞饲养层,并对其干细胞特性进行鉴定;在培养传代过程中,收获P27、P34、P41和P44细胞进行染色体核型分析,P27细胞还进行DNA短串联重复序列多态性分析。结果生长于人包皮成纤维细胞饲养层的HUES4细胞碱性磷酸酶染色以及SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81抗原阳性,SSEA-1抗原阴性。所检测的4代细胞中均见46,XY/46,XY,t（9;15）（q22;q26）核型嵌合现象,且异常核型百分比随传代次数增加有上升的趋势。结论培养人胚胎干细胞的饲养层细胞可由无动物源性的饲养层细胞替代;长期体外培养有增加细胞染色体核型异常的风险。     

胎儿超声及染色体产前诊断对唐氏综合征产前筛查为临界风险的临床价值

目的 探讨中孕期唐氏综合征筛查为临界风险的胎儿超声及染色体检查的临床意义.方法 回顾性分析中孕期唐氏综合征产前筛查临界风险的2 281例胎儿超声检查结果,以低风险2 500例为对照,比较两组单发软指标、多发软指标、单发畸形、多发畸形等异常检出率.并分析其中1 332例知情选择羊膜腔穿刺术者胎儿染色体产前诊断结果.结果 ①临界风险组胎儿超声检查检出单发软指标异常696例(30.51％)、多发软指标异常118例(5.17％)、单发畸形18例(0.79％)、多发畸形7例(0.31％).低风险组检出单发软指标异常308例(12.32％)、多发软指标异常82例(3.28％)、单发畸形5例(0.20％)、多发畸形1例(0.04％).临界风险组各项异常检出率明显高于低风险组(P ＜0.05,P＜0.01).②选择羊膜腔穿刺术胎儿染色体产前诊断1 332例临界风险组中,合并单发软指标异常135例,多发软指标异常83例,单发畸形11例,多发畸形5例者胎儿染色体检查结果均正常.③1 332例临界风险组中检出常染色体结构异常10例,性染色体结构异常1例.异常检出率0.08％.其中,染色体平衡易位7例,臂间倒位3例,等臂染色体1例.9例系母系或父系来源,2例为新发突变.11例染色体结构异常的胎儿超声检查均无明显异常发现.结论 胎儿超声检查能为唐氏综合征临界风险孕妇的遗传咨询提供有价值的信息;唐氏综合征临界风险亦提示胎儿染色体结构异常风险增加.     

云南省育龄人群红细胞叶酸水平与出生缺陷的关联研究

目的:通过检测有不良孕产史育龄人群的红细胞叶酸与正常人群红细胞叶酸水平,了解叶酸缺乏和不良孕产史之间的关系。方法:2013年1月~2013年12月收集到云南省第一人民医院遗传诊断中心进行孕前咨询有过不良孕产史育龄人群,检测两组人群与正常人群的叶酸水平,对出生缺陷的相关因素进行统计分析,评估叶酸对于不良妊娠的影响。结果:通过对正常人群组2 639例与不良生育史246例患者的分析,正常人群组与脑部异常儿生育史患者的叶酸水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),正常人群组与胎儿畸形、自然流产和胎停育、神经管缺陷引产史、唐氏综合征生育史、其他染色体异常生育史组间叶酸水平比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:增补叶酸对预防出生缺陷有一定意义,育龄人群应适时增补叶酸。     

中孕期唐氏综合征三联筛查与二联筛查的筛查效率

目的:比较中孕期唐氏综合征产前筛查中三联筛查与二联筛查的筛查效率,以及评估游离雌三醇(uE3)在产前筛查中的价值。方法:采用时间分辨荧光免疫检测技术,对同意接受产前筛查的孕14~20+6周单胎妊娠以及已经确诊唐氏综合征妊娠孕妇的冻存血清标本进行检测,测定甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素游离β亚基(freeβ-HCG)、uE3浓度,应用L ifeCyc le软件分别计算三联筛查(AFP+freeβ-HCG+uE3)和二联筛查(AFP+freeβ-HCG)的风险值,比较三联筛查与二联筛查对唐氏综合征的检出率和假阳性率。结果:在1 078例中孕期产前筛查以及10例冻存血清标本的唐氏综合征孕妇中,当风险截断值为1/270时,三联筛查与二联筛查对唐氏综合征的检出率均为66.7%,假阳性率分别为4.6%与7.2%;当截断值为1/380时,三联筛查的检出率高于二联筛查(91.7%vs 75.0%),假阳性率分别为7.5%与10.1%。结论:三联筛查是比二联筛查更有效的唐氏综合征筛查方法,有必要制定适合本地区人群的风险切割值,以提高产前筛查的筛查效率。     

宫颈分泌物中性粒细胞弹性蛋白酶预测早产临床研究

目的:探讨宫颈分泌物中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)预测早产的临床价值。方法:选择2008年1月～2009年4月在我院住院保胎并分娩的孕28～36周单胎妊娠符合条件的78例为研究对象。检测宫颈分泌物NE水平,同时观察宫颈分泌物中性粒细胞百分率,比较不同保胎时间,不同分娩孕周,不同孕周胎膜早破(PPROM)NE水平及中性粒细胞百分率,并分析NE水平与中性粒细胞百分率的相关性。结果:保胎时间<7天宫颈分泌物NE水平及中性粒细胞百分率明显高于保胎时间7～14天和>14天(P<0.01);分娩孕周<32周宫颈分泌物NE水平和中性粒细胞百分率明显高于分娩孕周≥32周(P<0.01,P<0.05);孕周<32周发生PPROM明显高于孕周≥32周(P<0.01);孕周<32周的PPROM宫颈分泌物NE水平和中性粒细胞百分率明显高于孕周≥32周的PPROM(P<0.01);保胎时间<7天、分娩孕周<32周和≥32周及孕周<32周的PPROM宫颈分泌物NE水平与中性粒细胞百分率均呈正相关(P<0.05)。结论:保胎时间<7天、分娩孕周<32周以及孕周<32周的PPROM宫颈分泌物NE水平明显升高,宫颈分泌物NE可能成为早产预测指标,尤其对较早期的早产更有意义。     

建立云南地区11～13+6周胎儿颈项透明层厚度正常中位数值的临床意义

1992年Nicolaidis等[1]首次提出胎儿颈项透明层这一概念.随颈项透明层厚度(nuchal translucency thickness,NT)增加,胎儿患唐氏综合征(Down's syndrome,DS)的风险增加[2].早孕期血清学产前筛查增加NT测量值联合评估胎儿患DS风险,可在设定假阳性率为5％时,将DS检出率由62％提高到96％,因此NT测量具有重要的临床意义.11 ～13+6周胎儿NT值随孕周稍有增加趋势,不同孕周有不同的正常中位数值.本研究根据我院随访受检孕妇妊娠结局,统计了云南地区11～13+6周胎儿NT正常中位数值,分析其临床应用价值.     

FISH技术快速诊断胎儿染色体数目异常

目的:使用荧光原位杂交(FISH)技术对胎儿染色体数目异常进行快速检测并评估其临床应用价值。方法:使用第13、18、21、X和Y5条染色体特异性的FISH探针对245例孕妇采用未经培养的新鲜羊水进行产前诊断,并与同时进行的羊水染色体检查结果进行对照。另外,选取36例染色体分析结果异常的存档标本(包括20例羊水标本和16例外周血/脐带血标本)对该检测技术进行验证。结果:使用FISH方法成功诊断唐氏综合征9例,18-三体综合征2例,性染色体数目异常3例,和同时进行的常规羊水染色体检查结果一致。但有4例经羊水染色体检出的染色体数目和结构异常,FISH因固有技术限制无法检出。在验证实验中,36例存档标本,全部染色体数目异常均能成功检出,成功率100%。结论:荧光原位杂交(FISH)技术检测第13、18、21、X和Y数目异常是准确快捷的产前诊断方法,值得推广应用。     

无宫颈病变的高危型HPV感染者2年随访研究

目的:了解单一高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染而无宫颈细胞病变妇女的自然转归,探讨宿主自然清除HPV病毒感染的相关因素。方法:选取单一HR-HPV感染、无宫颈细胞病变且随访资料完整的妇女149例,知情同意后,每3月随访1次,连续随访2年,统计分析HPV自然清除的时间和相关因素。结果:单一HR-HPV感染者149例,自然清除时间为7.7±5.3月,其中1年内自然清除率占79.2%(118/149),2年内自然清除率占88.6%(132/149)。不同年龄组(20~29岁、30~39岁、40~49岁、≥50岁)的妇女单一HR-HPV感染清除平均时间分别为7.12±4.23月、7.44±5.86月、8.32±5.09月和11.50±8.89月,4组比较,差异有统计学意义(P0.05),感染者年龄与自然清除HPV病毒时间呈正相关关系(r=0.871,P=0.023),而初诊HPV检测值与HPV病毒清除时间无相关性(r=0.106,P=0.192)。结论:单一HR-HPV感染而无宫颈细胞病变的妇女,大部分2年内能够自然清除HPV感染;年龄与自然清除HPV病毒时间相关。姑息或期待处置,可减少药物或物理治疗的使用。     

中孕期母体血清游离β-HCG水平过高与不良妊娠结局相关性的研究

目的:探讨中孕期母体血清人绒毛膜促性腺激素游离β亚基(游离β-HCG)水平异常与早产、出生缺陷、死胎等不良妊娠结局的相关性。方法:回顾分析分娩产妇在中孕期测定的血清游离β-HCG水平,按血清游离β-HCG中位数倍数(MOM)分组,统计分析不同组间早产等不良妊娠结局发生率的差异,探讨不良妊娠结局与中孕期母体血清游离β-HCG水平异常的相关性。结果:中孕期母体血清游离β-HCG过高(≥2.0MOM)的产妇组,早产等不良妊娠结局发生率为31.23%(149/477);母体血清游离β-HCG过低(≤0.5MOM)组,早产等不良妊娠结局发生率为5.12%(29/566);母体血清游离β-HCG正常(0.51～1.99MOM)组中,早产等不良妊娠结局的发生率为1.49%(32/2147)。经Spearman相关性分析,母体血清游离β-HCG水平过高与早产、死胎、肢体畸形、染色体异常等不良妊娠结局的发生显著正相关;母体血清游离β-HCG水平过低与染色体异常发生显著负相关。结论:中孕期孕妇血清游离β-HCG水平过高,与早产、死胎、肢体畸形的发生相关。中孕期孕妇血清游离β-HCG水平过高或过低均提示胎儿患染色体疾病的风险增高。     

3 335例妇女HPV感染状况调查及治疗随访

摘要：目的：调查云南省第一人民医院就诊的妇女人乳头瘤病毒（HPV）各亚型的子宫颈感染状况,探讨流式荧光杂交技术在HPV治疗监测中的作用。 方法：用Luminex流式荧光杂交法检测3 335例妇女的宫颈脱落细胞刷标本,并检测140例HPV阳性者配偶的尿道分泌物,对262例HPV阳性患者进行随访监测。 结果：在3 335例标本中HPV阳性率为16.1%（536/3 335）,常见亚型为HPV 52、16、58、39和59型。140例配偶中HPV阳性率为23.6%（33/140）,常见亚型为HPV 58、56、52和6型。随访HPV阳性感染者发现治疗后有56例HPV转阴,其中单一感染49例,双重感染6例,三重感染1例;其余在治疗过程中吸光度值均有所下降。 结论：3 335例妇女最常见的HPV亚型为HPV 52、16、58、39和59型。流式荧光杂交技术可用于HPV亚型鉴定和半定量评估。