胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制。方法体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3 U/L)或T(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48 h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30 U/L INS和10-5mmol/ml T刺激Ishikawa细胞24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响。结果(1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INS浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INS浓度自0.3~30 U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。INS浓度达60、90 U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30 U/L相似。不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显。T浓度自10-7、10-6、10-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),T浓度达10-4、10-3mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10-5mg/ml相似。(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内。(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P<0.01,P<0.05),INS组比T组减弱更明显(P<0.05),且INS和T作用24和48 h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关。     

主动免疫治疗原因不明复发性流产1005例疗效评价

目的:评价原因不明复发性流产(URSA)主动免疫治疗的临床效果。方法:2001年2月至2015年2月在我院门诊就诊的URSA患者1005例为研究对象,取其丈夫或与女方无血缘关系的第三方男性的肘静脉血20 ml,分离淋巴细胞于孕前后注射于患者前臂,使其产生主动免疫,并随访妊娠结局。结果:1005例URSA患者中共妊娠894例(88.96%),其中足月分娩718例(71.44%),随访截止时,尚在妊娠中91例(9.05%),再次自然流产85例(8.46%);无早产病例;未受孕111例(11.04%)。年龄32岁者流产率明显高于≤32岁者(P0.05)。孕后免疫治疗2~3次者比孕后未治疗或仅治疗1次者的足月分娩率明显更高(P0.05),流产率明显更低(P0.05)。结论:主动免疫治疗URSA患者疗效肯定,妊娠成功率高,年龄大于32岁者妊娠后应早期保胎治疗;免疫治疗后3个月内受孕,确认早孕后再免疫治疗2~3次效果更好。     

基于单次促排卯周期的累积分娩/活产率专家共识北大核心CSCD

目前,如何评价辅助生殖治疗的成功尚存在争议,越来越多的学者呼吁将一次完整卵巢刺激周期的累积分娩/活产率作为一次促排卵的关键衡量指标。结合近年来国内外相关研究进展,本文对累积分娩/活产率的定义、临床意义、计算方法以及影响因素达成部分专家共识,以指导一次促排卵累积分娩/活产率的临床应用。     

蛋白激酶C 参与内源性大麻素花生四烯乙醇胺对L型钙电流的抑制作用

目的：研究内源性大麻素物质花生四烯乙醇胺是否通过改变蛋白激酶C（ PKC）活性从而抑制心肌L型钙电流,并进一步探讨可能改变PKC活性的信号途径。方法应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流（P ＜0 n．05）;应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统（ Promega）检测PKC活性;Elisa试剂盒测定细胞中二脂酰甘油（ DAG）的含量;western blot 技术测定磷脂酶Cβ（ PLCβ）和磷酸化磷脂酶C β（ p-PLCβ）表达。结果应用花生四烯乙醇胺灌流心肌细胞后显著抑制心肌L型钙电流（ P ＜0．05）,预先应用大麻素1型受体（ CB1）阻断剂AM251或PKC非特异性激动剂佛波醇酯（PMA）可以完全阻断此抑制效应,而大麻素2型受体（CB2）阻断剂AM630没有阻断花生四烯乙醇胺抑制L型钙电流的作用。检测心肌细胞PKC活性发现,花生四烯乙醇胺明显抑制PKC活性（ P ＜0．05）,同样预先应用AM251或PMA完全阻断花生四烯乙醇胺对PKC活性的抑制效应,而AM630无此效应。应用花生四烯乙醇胺没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化。结论本实验首次证明内源性大麻素花生四烯乙醇胺激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与。     

提高胚胎移植技巧的方法

在体外受精-胚胎移植过程中胚胎移植技巧相当重要,备受关注.为提高此项技巧需避免胚胎移植过程对胚胎着床的不利因素,其方法有:试验性胚胎移植、超声测定正确估计子宫腔,使用柔软移植管、轻柔操作、尽量避免使用宫颈钳减少对子宫刺激引起收缩,去除宫颈黏液,在尽量减少对子宫内膜损伤的情况下保证移植管通过宫颈内口,将胚胎轻柔地送入子宫腔内,从而最终提高临床妊娠率.     

GLUT4在多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜中的表达及意义

目的： 探讨葡萄糖转移因子4（GLUT4）在多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠子宫内膜中的表达，评价其与子宫内膜胰岛素抵抗(IR)的关系。方法: 54只85日龄SD雌性大鼠，随机分为：① 对照组（20只）；② PCOS组（17只）；③ 二甲双胍治疗组（17只）。其中后两组先参照Poretsky等的方法复制PCOS大鼠模型，造模成功后，再分别喂服安慰剂或二甲双胍， 14 d后断头处死各组大鼠并取材。采用免疫组织化学染色Elivision^TM Plus两步法检测对照组、PCOS组及治疗组大鼠子宫内膜GLUT4蛋白的表达。结果: PCOS组大鼠子宫内膜腺上皮中GLUT4和INS-R蛋白表达明显低于对照组（P＜0.01，P＜0.05），INS蛋白表达水平明显高于对照组水平（P＜0.01）；治疗组GLUT4表达显著高于PCOS组（P＜0.01），但仍低于对照组（P＜0.01），INS表达较PCOS组显著降低（P＜0.05），但仍高于对照组（P＜0.05）；子宫内膜间质中无GLUT4的表达，INS和INS-R表达情况与腺上皮相似。结论: PCOS大鼠子宫内膜GLUT4表达减少和子宫内膜的IR有关。     

河北省42万余例孕妇无创产前检测结果回顾性分析一线筛查方案评价

目的评价无创产前检测(NIPT)做为一线筛查方法在胎儿染色体非整倍体筛查实践中的效果。方法河北省自2019年7月开展"NIPT民生项目", 为辖区内符合条件的孕妇(不适用人群除外)提供NIPT一线筛查, 高风险孕妇接受遗传咨询、产前诊断和指导干预, 低风险和假阳性孕妇继续进行产前检查, 发现异常后再次到产前诊断中心遗传咨询并产前诊断。对所有孕妇进行随访, 了解妊娠结局与新生儿健康状况。收集2019年7月至2020年7月接受NIPT一线筛查孕妇的检测结果和临床数据, 统计分析NIPT一线筛查的检测性能指标。结果 (1)筛查人群基本信息:共筛查孕妇424 330例, 成功检测423 596例, 检测成功率为99.83%(423 596/424 330)。成功检测孕妇的年龄为(28.8±4.5)岁, 筛查孕周为(16.6±2.3)周, 高龄孕妇(≥35岁)占比为10.18%(43 132/423 596), 体外受精-胚胎移植(IVF-ET)受孕孕妇占比为1.58%(6 713/423 596), 双胎妊娠孕妇占比为1.38%(5 849/423 596), 初产妇占比为34.23%(144...     

月经周期中内源性大麻素与性激素和促性腺激素的相关性研究分析

目的分析月经周期中不同时期正常女性血浆中N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)的水平变化及其与性激素和促性腺激素的相关性。方法选择2015年5~10月因输卵管梗阻或男方因素到本院生殖医学科就诊并欲行IVF助孕、月经周期和排卵正常的育龄妇女为研究对象。根据实验目的分为横断面研究组(79例)和纵向研究组(10例),检测AEA在两组女性月经周期中不同时期的变化,以及AEA与FSH、LH、E2、P之间的相关性。结果横断面研究组中早卵泡期、晚卵泡期、排卵期和黄体期AEA水平分别为(9.71±0.86)ng/ml、(10.61±1.05)ng/ml、(12.24±0.73)ng/ml和(7.46±0.71)ng/ml。排卵期AEA水平最高,黄体期最低(P0.05)。纵向研究组4个时期AEA水平分别(8.76±0.91)ng/ml、(11.61±1.28)ng/ml、(13.85±1.18)ng/ml、(8.50±1.08)ng/ml,排卵期AEA水平最高,黄体期最低(P0.05)。横断面研究组和纵向研究组各个时期的AEA水平比较均无显著性差异(P0.05)。AEA与FSH、LH、E2之间存在显著的正相关(P0.05),与P水平则无显著相关性(P=0.067)。结论正常女性血浆内AEA的浓度随月经周期的变化而变化,且与性激素和促性腺激素呈明显相关。但AEA与FSH、LH、E2、P之间的具体作用机制,有待进一步研究。