精液标本采集质量控制方法与应用评价

目的 探求精液标本采集的质鼍控制方法,并对其实效性进行评价.方法 202名受检者依照制定的精液标本采集质量控制程序,在3周内连续两次留取精液标本,评价其标本采集状况,比较不同评价模式组标本精液常规分析结果的差异性;对3名精液标本采集符合"完整"评价标准的志愿者的精子密度与活力进行为期1年的连续监测.结果 两次精液采集均被评价为"完整"的标本组,其组内各项精液参数检测重复性好(P>0.05),组间检测结果变异系数最小(P<0.05);1年时间内3名志愿者精子密度与前向运动精子百分比的极值波动幅度分别为207%～394%和138%～267%.结论 对精液标本采集实施质量控制是必要和可行的;加强精液标本采集环节的质量控制,可将精液的生理波动控制在有限的范围内.     

精子成熟障碍对孕早期自发性流产与胚胎停育的影响

目的:研究精子不成熟度实验诊断指标在女方孕早期自发性流产、胚胎停育男性病因分析中的价值。方法:应用非匹配的病例对照研究方法,调查病例组(孕早期有自发性流产和/或胚胎停止发育史妇女的配偶,161例)与对照组(正常生育男性98例)精子-透明质酸未结合率、精子核蛋白不成熟率、精子DNA碎片率、精子形态和精液常规等指标的水平;二分类Logistic回归分析筛选致病因素,ROC曲线分析各项指标的诊断效率。结果:精子-透明质酸未结合率(OR=1.028,95%CI:1.007￣1.048;ROC曲线下面积为0.642)和精子核蛋白不成熟率(OR=1.040,95%CI:1.012￣1.069;ROC曲线下面积为0.649),是导致女方孕早期自发性流产、胚胎停育的独立因素;两者联合使用可进一步提高诊断效率(ROC曲线下面积为0.739,灵敏度0.679,特异性0.796,阳性似然比3.33,阴性似然比0.40)。结论:精子成熟障碍是导致女方孕早期自发性流产、胚胎停育的男性危险因素,精子-透明质酸未结合率和精子核蛋白不成熟率是有效的病因诊断指标。     

固相透明质酸法优选精子的效果观察

目的：对比研究高通量的固相透明质酸（HA）分离新技术较传统密度梯度法在精子优化分离效果方面的优势性。方法：收集新鲜精液标本31份,每份标本液化后被均分成2部分,一部分精液以固相HA法分离精子,即将精液加入到底部表面包被有HA的培养皿中,洗脱掉未结合的精子,分离、收集与HA结合的精子：另外一部分精液以传统的密度梯度法优化分离精子,观察2种方法提取后精子各项研究指标的差异性,以及相对变化幅度。结果：与密度梯度法组相比,固相HA法组处理后精子的正常形态率、获能2h酪氨酸磷酸4~（TP）、ATP（精子获能2hTP率一未获能精子TP率）、诱发顶体反应（AR）和△AR（诱发AR率一自发AR率）等指标明显增高CP〈0．001）,增长幅度依次为：1．55倍（95％CI=1．04,~2．81）、1．81-fg-~（95％CI=0．89-6．11）、3．35-9}（95％CI=1．04-10．32）、1．37倍（95％CI=0．96～2．71）和1．88倍（95％CI=1．09,-4．71）;而固相HA法组自发AR、核蛋白不成熟度和DNA碎片率显著降低（P〈O．001）,分别是密度梯度法组的68％（95％CI=19％-102％）、47％（95％CI=2~／~103％）和21％（95％CI=0％～70％）;2种方法处理后精子的前向运动率和活动率无统计学差异（P〉0．05）。结论：基于成熟精子头部具有HA受体可与外源性HA特异性结合原理的精子。固相HA分离技术,与传统的密度梯度法相比,分离后的精子具有更优的受精潜能和成熟度,可显著提高分离精子的整体质量,有望进一步改善辅助生殖结局。     

己酮可可碱和水溶性维生素E在精子优选过程中对精子质量的影响

目的:探索在精子优化分离过程中,己酮可可碱(pentoxifylline,PF)和水溶性维生素E(water-soluble vitamin E,WsVitE)对改善精子质量的价值。方法:分别以密度梯度法、上泳法常用精子分离液作为对照组,在同批号对照组分离液中添加PF和/或WsVitE后作为试验组;将32份新鲜精液标本每份分为4份,分别以密度梯度法、上泳法2种方式优化分离,每种分离方式均设对照组和试验组;比较分离后精子的质量差异。结果:2种分离方法处理后的新鲜精子,其前向运动率、获能后酪氨酸磷酸化水平、Ca2+载体诱发精子顶体反应率,试验组均优于对照组(P<0.01);25℃孵育24 h后,试验组较对照组的精子前向运动率、活动指数、正常形态率更高,而DNA碎片、脂质过氧化水平更低(P<0.01);上泳法试验组分离率精子各项指标总体优于密度梯度法试验组(P<0.05)。结论:在精子分离液中加入抗氧化剂VitE和磷酸二酯酶抑制剂PF可明显改善分离后精子的质量;上泳法分离后的精子质量更高、损伤更轻。