多种细胞因子检测在儿童噬血细胞综合征诊断中的意义

目的检测噬血细胞综合征患儿多种细胞因子水平,观察和比较它们在HLH诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测18例HLH患儿、20例对照组儿童及7例一般感染患儿血清中8种细胞因子[干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、可溶性IL-2受体β(IL-2R-β)、可溶性IL-2受体α(sCD25)和sCD163],分析它们在HLH中的表达水平,以及与诊断的相关性。结果与对照组、非HLH感染组相比,HLH组中各细胞因子水平明显升高,3组之间差异有统计学意义(P0.05)。IL-12、sCD25和sCD163 3种细胞因子受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)均在0.9以上,诊断HLH的准确性高,尤其是sCD163和sCD25,AUC高达0.95。采用Pearson相关分析sCD163与sCD25的相关程度,二者呈高度正相关(r=0.970,P0.05)。IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β4种细胞因子AUC在0.7~0.9,IL-10的AUC小于0.7。结论 HLH患儿多种细胞因子水平高表达是导致一系列临床表现的重要因素。sCD163与sCD25有同等意义,是诊断HLH特异又敏感的标记。细胞因子IL-12的诊断价值亦高。此外,IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β有诊断参考意义;而IL-10的准确性较差,不宜作为独立的诊断指标。     

长春新碱通过下调SODD蛋白表达诱导白血病细胞凋亡新机制研究

 目的研究死亡结构域沉默子(silencer of death domains,SODD)、caspase3、caspase8及caspase9在长春新碱诱导Jurkat白血病细胞凋亡过程中的变化,探讨长春新碱诱导肿瘤细胞凋亡的新机制。方法采用Annexin V/PI双标记流式细胞术检测长春新碱(VCR)作用后Jurkat细胞凋亡发生率;采用免疫印迹法分析SODD、caspase3、caspase8及caspase9蛋白表达的变化;ELISA酶联免疫吸附技术检测VCR作用Jurkat细胞后TNF-α分泌的变化;采用RT-PCR检测VCR对细胞,TNFR1mRNA表达的调节。结果Jurkat白血病细胞SODD蛋白高表达且高表达的SODD蛋白抑制肿瘤细胞凋亡,VCR能特异下调SODD蛋白的表达,有效诱导Jurkat细胞凋亡,但并不影响细胞TNF-α的分泌及TNFR1的表达;VCR诱导细胞凋亡过程中caspase3、caspase8酶原呈时间依赖性逐渐被水解剪切,而caspase9在该凋亡过程中无明显变化趋势。结论VCR下调SODD蛋白表达并启动外源性凋亡途径caspases级联(caspase8、caspase3),最终诱导Jurkat细胞凋亡,且VCR下调SODD蛋白的表达无需激活TNF/TNFR1信号途径即可导致凋亡的发生。     

儿童白血病细胞DNA含量及细胞周期的临床分析

目的:探讨小儿急性白血病(AL)患者骨髓细胞周期分布与分型和治疗的关系。方法:应用图像分析系统测定96例小儿AL骨髓单个核细胞DNA含量和细胞周期。结果:不同类型的AL异倍体发生率不同,急性淋巴细胞白血病(ALL)异倍体率55.7%(44/79),明显高于急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的29.41%(5/17),T-ALL异倍体率(77.42%)明显高于B-ALL(41.67%),统计学差异均有显著意义。AL初诊病例和复发病例的G0/G1期细胞比例高于完全缓解组和对照组,G2M+S期比例低于完全缓解组和对照组(P<0.05),完全缓解组和对照组无显著差异。结论:图像分析系统对AL尤其是ALL异倍体的分析,有利于判断高危ALL,对细胞周期的测定给化疗个体化提供了具体的参考指标。     

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目的探讨儿童急性白血病SODD和P65蛋白的表达及其临床意义。方法2004年3～11月采用免疫组化SABC法,检测华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科住院急性白血病(AL)患儿骨髓涂片中SODD、P65蛋白表达。结果33例AL中,SODD和P65表达阳性率分别为54.5%(18/33)和45.5%(15/33),与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05);25例急性淋巴细胞白血病(ALL)中,SODD和P65表达的阳性率分别为56.0%(14/25)和48.0%(12/25),与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05)。ALL高危病例组中SODD阳性表达率为75.0%(12/16),较标危病例组阳性率高,差异有显著性(P<0.05)。33例AL患儿中SODD和P65均为阳性12例,均阴性16例,表达一致符合率为84.8%(28/33),两者的表达呈正相关(P<0.01,r=0.69)。结论SODD和P65均参与了AL的发生发展;SODD过表达与儿童ALL的发生、临床分型以及预后均有密切关系。     

经阴道彩色多普勒超声在不孕症中的应用价值

目的应用经阴道彩色多普勒超声动态监测周期性卵泡发育,子宫内膜增殖期变化,排卵期子宫螺旋动脉血流阻力指数,探讨其三者之间与受孕的关系。方法通过对30例不孕症患者进行经阴道彩色多普勒超产检查,监测其卵泡发育情况,记录子宫内膜厚度,排卵期子宫螺旋动脉血流阻力指数。与临床配合观察其受孕情况,然后将其按受孕、未受孕妇女分组统计各参数值,并对比。结果受孕组妇女可见卵泡正常发育并可见排卵现象,子宫内膜呈周期性增殖变化,排卵期子宫螺旋动脉血流丰富呈高振幅连续波型,阻力指数偏低,其三者之间有协同性。结论应用经阴道彩超对具有周期性月经史的妇女实施动态监测,可指导临床分析不孕原因,在指导临床及时采取有效的治疗措施和动态观测治疗效果,提高受孕率方面有重要价值。     

死亡结构域沉默子和p65在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及与化疗的关系

目的 探讨凋亡调控基因死亡结构域沉默子(SODD)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达、临床意义及与磷酸化-NF-κB-p65表达的相关性,研究ALL 2种常用化疗药物对SODD表达的影响,试图寻找化疗新靶点.方法 免疫组织化学SABC法检测25例儿童ALL骨髓细胞SODD、p65蛋白表达水平;长春新碱(VCR)处理Jurkat细胞后,Annexin-V-Fluorescence/PI双标记的流式细胞术检测细胞凋亡发生率,免疫印迹法检测SODD及p65在化疗药物作用下的表达变化.结果 25例ALL中,SODD和065表达的阳性率较健康对照组高,其中高危病例组SODD阳性表达率较标危病例组阳性表达率高,有显著性差异(Pa＜0.05),且骨髓细胞中SODD与p65表达呈正相关(r=0.69 P＜0.01);VCR能有效诱导Jurkat细胞凋亡,在该凋亡过程中,SODD及p65表达下调,并呈时间依赖性,但柔红霉素(DNR)不能有效下调SODD的表达.结论 SODD和p65均参与了ALL的发生发展,且存在一定的协同关系,SODD与ALL临床分型及预后有密切关系;VCR特异下调白血病细胞中SODD的表达及抑制NF-κB的活化,恢复白血病细胞的凋亡敏感性.     

超声诊断小儿颅脑疾病

目的探讨超声诊断小儿颅脑疾病的应用方法及价值。方法采用经前囱检查，通过探头的偏转，由前向后，由中间向两旁依次扫查，分别显示冠状面、矢状面脑结构，结合新生儿颅内常见病变情况，重点扫查几个标志性层面。主要有冠状切面扫查、矢状切面扫查。结果超声对部分新生儿颅内出血具有特异性的诊断价值，越是靠近脑中线的出血B超优势越明显。对缺氧缺血性脑损伤B超也能作出明确诊断，尤其是脑白质软化，B超明显优于CT。结论超声检查是新生儿期缺血缺氧性脑损伤引起脑室周围白质软化病的最适用、最有效的诊断手段。在小儿颅内出血的诊断及出血后随访观察方面以及脑室周围白质软化病的诊断方面，B超有一定优越性。     

中枢神经系统白血病患儿脑脊液基质金属蛋白酶的表达及其与髓外浸润的关系

目的 通过检测基质金属蛋白酶(MMPs)在急性白血病(AL)和中枢神经系统白血病(CNSL)患儿脑脊液中的表达情况及患儿确诊CNSL前后脑脊液MMPs的动态表达情况,探讨MMPs与儿童AL发生发展和髓外浸润的关系.方法 采用明胶酶谱活性分析方法 和图像分析系统检测22例未发生CNSL的AL患儿、18例CNSL患儿和3例非肿瘤非感染性疾病患儿脑脊液MMP-2、MMP-9的活性表达,并且动态检测CNSL患儿确诊CNSL前后脑脊液MMP-2、MMP-9的活性变化.结果 MMP-2和MMP-9在对照组中的表达率为0,酶解活性水平分别为67.15±16.6和23.55±10.08;MMP-2和MMP-9在未发生CNSL的AL组中的表达率为 31.8%,酶解活性水平分别为115.13±43.67和60.86±37.80,显著高于对照组(Pa<0.05);而MMP-2和MMP-9在发生CNSL的AL组中的表达率为100%,酶解活性水平分别为867.55±308.67和562.88±139.22,显著高于未发生CNSL组和对照组(Pa<0.05).MMPs过量表达,特别是MMP-2在CNSL患儿脑脊液中高表达与白血病细胞浸润高度相关.结论 MMP-2和MMP-9在AL患儿脑脊液中异常表达,可能参与了儿童AL的发生发展;通过检测MMP-2和MMP-9可间接反映白血病中枢神经系统浸润的发生和发展情况,并可对高危人群早期加强治疗,从而预防髓外浸润的发生,对指导临床诊断和治疗具有重要意义.     

超声观察临床治疗外科患者下肢深静脉血栓形成的研究

目的探讨应用二维及彩色多普勒超声诊断下肢静脉血栓并观察抗凝、溶栓治疗后的临床转归。方法应用二维及彩色多普勒超声检测76例拟诊为下肢深静脉血栓形成患者,测量其下肢深静脉管径、血栓大小范围,观察血流变化,检测静脉瓣功能并进行随访。结果治疗后本组病例症状均缓解,彩色多普勒超声观察血栓状况均有改善。结论本病一经确诊,应及时进行抗凝、溶栓治疗,早期诊断早期治疗能获得更好的疗效,彩色多普勒超声可作为诊断本病的首选。     

Survivin在儿童急性白血病中的表达和P53的相关性及其临床意义

目的探讨Survivin在儿童急性白血病(AL)中的表达及其与抑癌基因P53的相关性，同时观察Survivin与急性淋巴细胞白血病(ALL)临床分型的关系。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)方法，检测华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2004年1~7月收治的37例儿童AL骨髓细胞Survivin和P53的表达，对照组为10例非恶性血液病且骨髓正常患儿。结果在37例AL患儿中，Survivin蛋白表达阳性率为35.14%，P53表达阳性率为32.43%，显著高于正常骨髓组织(P均<0.05)，Survivin和P53表达呈强相关性(P<0.05)，Survivin在高危(HR)ALL患儿的表达为46.15%，在标危(SR)ALL患儿的表达为0，差异有显著性意义(P<0.05)。结论(1)Survivin在儿童AL中异常表达，且与ALL的临床分型有关，提示其在判定儿童ALL预后中有意义；(2)抑癌基因Ｐ53的失活与Survivin的表达可能在AL发生中起协同作用。 Abstract Objective To investigate the expression of Survivin in pediatric acute leukemia and its relationship with expression of P53 and clinical significance.Methods The expression of Survivin and P53 proteins were detected by immunohistochemical assay in 37 acute leukemia children.The control included 10 children with normal bone marrow.Results Survivin protein expression rate was 35.14% and P53 protein expression rate was 32.43% in 37 AL children.Both of them were significantly higher than that in control group (P<0.05).The expression of Survivin and P53 being strongly related (P<0.05).The expression rate of Survivin was 46.15% in HR ALL and 0% in SR ALL,the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion (1)Survivin protein expression rate is abnormal and is associated with the clinical typing of ALL.It may play an important role in the prognosis of ALL.(2)Expression of Survivin and de activation of anti oncogene P53 might play synergetic roles in the process of genesis of AL. Key words Survivin;P53;Children;Acute leukemia