高分辨率熔解曲线在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中的应用

目的 建立一种基于PCR和在线高分辨率熔解曲线（high-resolution melting curve, HRM）分析工具的检测方法,实现对DNA序列微小差异的快速检测。方法 在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中,采用两步PCR,分别对目的片段进行扩增和富集,并通过免费在线软件对HRM进行分析。结果 HRM分析结果显示,本实验所设计的CRISPR慢病毒系统未能对COS7细胞中的RPE65基因进行有效的基因编辑;而在瘦素突变大鼠的子代基因型中,HRM可以明显区分杂合子和纯合子。结论 HRM能够快速鉴定CRISPR编辑和区分基因型。     

不同来源的间充质干细胞线粒体结构及活性鉴定

目的 培养脂肪、骨髓、牙髓及脐带4种不同来源的间充质干细胞,并鉴定其线粒体结构和活性。方法通过流式细胞术、透射电子显微镜及细胞代谢分析仪等技术分别检测各种间充质干细胞的纯度、内部线粒体的超微结构及呼吸耗氧量。结果脂肪、骨髓、牙髓及脐带4种间充质细胞均成纤维状贴壁生长,同时表达CD73、CD90及CD105,不表达CD34、CD11b、CD19、CD45及HLA-DR;ASC与BMSC较DPSC与UCDSC线粒体结构成熟,代谢水平高。结论脂肪、骨髓、牙髓及脐带来源的细胞均具有间充质干细胞的特点,但其线粒体结构和活性等方面存在差异。     

哺乳动物胚胎着床分子机制综述的研究现状

胚胎着床涉及到胚胎和子宫间复杂的关系,是胚胎能否继续发育的重要环节。胚胎发育到囊胚阶段以及子宫内膜同步分化到容受状态是成功着床的关键。着床过程涉及到许多信号通路分子的相互作用,但是其中同步胚胎和子宫状态的调控网络仍有很多谜题未解开。本文总结了目前对于着床的分子调控以及在这个领域中的研究进展,对着床机制的了解有助于阐明女性不明原因的不孕症并且帮助提高胚胎着床率和妊娠率。     

卵母细胞线粒体移植疗法的基础研究及临床应用进展

线粒体是卵子的质量标志,其数量和功能异常导致卵细胞及胚胎质量低下。卵母细胞线粒体移植技术有望成为改善卵母细胞及胚胎质量和提高辅助生殖成功率新的治疗手段。本文就线粒体在卵母细胞成熟及着床前胚胎发育中的作用及线粒体移植疗法的最新研究进展进行了综述。