不同Sap活性白假丝酵母菌对阴道上皮局部免疫的影响

目的 探讨不同Sap分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)活性菌株对阴道局部免疫的影响。方法 收集门诊外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)及复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者阴道分泌物进行菌株鉴定,取白假丝酵母菌行药敏性分析、25S rDNA基因分型、Sap及磷酯酶(Plb)活性检测;用不同Sap活性的白假丝酵母菌与阴道上皮细胞共培养,用ELISA方法检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-4、IL-8、IL-17的水平。结果 VVC白假丝酵母菌株的Sap活性强于RVVC菌株;白假丝酵母菌感染后,阴道上皮细胞分泌的IL-4、IL-8、IL-17更多,且IL-8和IL-17出现的时间早、持续时间长;Sap强的白假丝酵母菌能刺激阴道上皮分泌更多的细胞因子。结论 除外Sap活性,VVC与RVVC菌株之间侵袭力无明显差异;白假丝酵母菌能在短时间内激活阴道宿主免疫反应,且Sap活性强的菌株诱发的宿主免疫也强;RVVC致病白假丝酵母菌Sap活性弱的原因可能与阴道上皮分泌的保护性因子有关。     

妊娠期糖尿病和2型糖尿病患者HLA-Ⅱ类基因的比较研究

目的：从免疫遗传学角度比较妊娠期糖尿病和2型糖尿病的异同。方法：采用顺序特异引物聚合酶链反应技术检测48例妊娠期糖尿病和48例2型糖尿病患者的部分HLA-Ⅱ等位基因频率，并与48名正常孕妇比较。结果：两患者组的HLA-DRB1^＊0301等位基因频率为18，8％，35．4％，均明显高于对照组，差异有显著性（P=0．025，P=0．066）；两患者组的HLA-DQB1^＊0301等位基因频率分别为64．6％，75．0％，均明显高于对照组，差异有显著性（P=0．024，P=0．001）；两患者组之间所测各等位基因频率比较，差异无显著性。结论：妊娠期糖尿病及2型糖尿病均与HLA．DRB1^＊0301、DQB1^＊0301相关，从所测部分HLA-Ⅱ类等位基因角度分析，二者的发病机理可能有共同之处。     

中期妊娠胎盘前置状态出血引产行介入治疗的护理总结

目的 探讨中期妊娠胎盘前置状态出血引产行介入治疗的护理方法.方法 选取在昆明医科大学第一附属医院栓塞治疗的中期妊娠胎盘前置状态出血进行利凡诺羊膜腔注射引产治疗的患者32例作为研究对象, 按照入院先后, 将前16例作为实验组, 对患者术前、术中与术后进行全方面的护理, 后16例作为对照组, 仅给予常规护理.分析2组患者治疗效果.结果 32例中期妊娠胎盘前置状态出血引产行介入治疗的患者中, 有27例患者胎儿及附属组织娩出, 且不存在产后出血, 5患者因瘢痕子宫与宫颈性难产导致引产失败, 进行栓塞术后6d行剖宫取胎术.实验组治疗总有效率为87.50% (14/16) , 显效8例, 有效6例, 对照组总有效率为56.25% (9/16) , 实验组明显优于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) .结论 在中期妊娠胎盘前置患者中应用子宫动脉栓塞术临床疗效可靠, 加强对患者进行术前、术中与术后的护理, 能够有效的提高介入治疗的成功率, 降低并发症.     

TNF-α、IL-6、IL-17在胎膜早破母儿感染相关不良妊娠结局中的表达及临床价值

目的 探讨母血、脐血血清中TNF-α、IL-6、IL-17表达水平在胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)合并绒毛膜羊膜炎(chorioamnionitis,CS)及PROM新生儿围产期感染中的临床意义.方法 51例因胎膜早破至昆明医科大学第一附属医院产科住院的孕妇为PROM组,同期20例正常分娩孕妇为对照组.采用ELISA法检测母血、脐血血清TNF-α、IL-6、IL-17水平.再次将PROM组分为PROM无CS组和PROM合并CS组,PROM无新生儿围产期感染组(A1)和PROM新生儿围产期感染组(A2);比较母血、脐血中3项指标在不同分组中的表达水平,ROC曲线分析三项指标预测胎膜早破母儿感染相关不良妊娠结局的价值.结果(1)PROM合并CS组母血、脐血血清TNF-α、IL-6表达水平显著高于PROM无CS组和对照组(P<0.05);PROM无CS组母血TNF-α、脐血IL-6的表达水平显著高于对照组(P<0.05);(2)A2组母血、脐血血清TNF-α、IL-6和IL-17表达水平均显著高于A1组和对照组(P<0.05);A1组母血TNF-α、脐血IL-6的表达水平显著高于对照组(P<0.05);(3)母血、脐血血清TNF-α、IL-6、IL-17表达水平互呈显著正相关(P<0.001);(4)诊断PROM合并CS时,单项检测母血TNF-α的曲线下面积(Area under the curve,AUC)最大(0.763),母血TNF-α的AUC高于脐血TNF-α(0.614)(P<0.05);联合母血+脐血TNF-α+IL-64项指标诊断PROM合并CS的AUC(0.820)显著高于脐血TNF-α单项指标的AUC值(0.614)(P<0.05);(5)诊断PROM新生儿围产期感染时,单项检测时母血中IL-6的AUC最大(0.800),脐血中IL-17的AUC最大(0.829),脐血IL-17的AUC高于母血IL-17(0.735)(P<0.05);联合脐血IL-6+IL-172项指标或联合脐血TNF-α+IL-6+IL-173项指标诊断PROM发生新生儿围产期感染的诊断效果较好(AUC:0.863、0.866).结论 母血、脐血TNF-α、IL-6、IL-17是预测PROM母儿感染相关不良妊娠结局的重要指标,联合检测效果较好.临床工作中若考虑脐血检测的局限性,仅检测母血以上细因子也有较好的临床运用价值.     

不同Sap酶活性的白假丝酵母菌对阴道上皮细胞表达NLRP3炎性小体的影响

目的 研究不同分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)酶活性的白假丝酵母菌对人和小鼠阴道上皮细胞表达核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响.方法 收集外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者阴道分泌物后纯化、鉴定菌株、检测Sap酶活性;酶分步消化法培养人和小鼠阴道上皮细胞并与不同Sap酶活性的白假丝酵母菌共培养;用免疫荧光法检测阴道上皮细胞中NLRP3炎性小体的表达;用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-18的水平;用HE染色观察细胞形态.人和小鼠阴道上皮细胞培养方式基本一致.结果 Sap酶活性强组NLRP3炎性小体、IL-1β和IL-18水平均高于Sap酶活性弱组,并且在感染早期即达高峰.随着感染时间增加可看到细胞破裂、死亡,NLRP3炎性小体也随之下降,这在小鼠和人的阴道上皮细胞中呈现出相同趋势.结论 白假丝酵母菌可以刺激阴道上皮细胞表达更多的NLRP3炎性小体、IL-1β和IL-18,Sap酶活性强的白假丝酵母菌作用更强;小鼠和人阴道上皮细胞感染后的炎症反应一致,因此小鼠可代替人作为VVC体内研究的模式动物.     

白假丝酵母菌最优化RNA提取策略的探索

目的 探索白假丝酵母菌总RNA简单、快捷、高效的提取方法。方法 选取昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊2011年7月-2013年3月有临床症状且阴道分泌物镜检阳性的外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）患者的白假丝酵母菌40株,选用不同时间与温度组合下的4种溶壁酶（Lyticase）破壁方案（A方案：37 ℃、12 h,B方案：25 ℃、12 h,C方案：37 ℃、24 h,D方案：25 ℃、24 h）进行RNA提取,将所得RNA进行荧光定量PCR（qPCR）反应验证RNA的浓度及纯度,并进行管家基因18S rRNA的检测。结果 D方案提取获得的RNA浓度高于A、B、C方案（P＜0.05）|B方案提取获得的RNA浓度高于A、C方案（P＜0.05）|而A、C两方案提取获得的RNA浓度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。B、D方案获得的RNA纯度高于A、C方案（P＜0.05）|但A、C方案获得的RNA纯度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）|B方案提取获得的RNA纯度高于D方案（P＜0.05）。A、B、C、D方案提取的RNA扩增产物Ct转化值比较,差异有统计学意义（P＜0.05）|其中B、D方案qPCR扩增产物Ct转化值高于A、C方案（P＜0.05）|但B、D方案及A、C方案之间的qPCR扩增产物Ct转化值比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。管家基因18S rRNA的引物扩增出的产物片段大小为150 bp。结论 以Lyticase破壁提取白假丝酵母菌具有简单易行及RNA产量高、纯度好的优点,值得临床推广应用。     

外阴阴道白假丝酵母菌病耐药机制研究进展

外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)是妇女常见的外阴阴道炎症之一,随着抗生素和抗真菌药物的广泛应用,假丝酵母菌的菌种构成发生了一定变化.白假丝酵母菌的耐药株也逐渐增多.综述了白假酵母菌耐药机制,对寻找新的治疗策略和开发新的抗真菌药具有重要的指导意义.     

HLA与妊娠期糖尿病的相关研究

现已明确人类主要组织相容性抗原(HLA)复合体与1型糖尿病(IDDM)的易感性相关,与2型糖尿病(NIDDM)的关系尚未明确.妊娠期糖尿病(GDM)与NIDDM在生物化学方面有许多相似之处,可在某种程度上认为是早期初发的NIDDM.多项研究显示GDM的发生与HLA相关,位点涉及HLAⅠ、Ⅱ类基因,但也有学者持相反意见.综述HLA与GDM的相关研究.     

内脂素、网膜素与妊娠期高血压疾病关系的研究进展

妊娠期高血压疾病(HDCP)是妊娠期特有的疾病,可造成孕产妇子痫发作,产时、产后出血,胎儿窘迫,甚至死亡,对母婴危害极大.脂肪组织是脂质储存的场所,可分泌脂肪细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)、瘦素等,参与调节糖脂代谢及炎症反应.内脂素(visfatin)和网膜素(omentin)是近几年新发现的脂肪细胞因子,文献报道其可能对HDCP的发生、发展产生影响,但结论并未统一.