温度对人类MⅡ期卵细胞组蛋白H3K9和H4K12乙酰化状态的影响

目的 探讨温度对人类MⅡ期卵细胞组蛋白H3K9和H4K12乙酰化状态的影响。方法 收集接受卵胞浆内单精子显微注射治疗后患者废弃的第一次减数分裂中期（MⅠ期）卵细胞体外成熟培养成的第二次减数分裂中期（MⅡ期）卵细胞,在室温下（25℃）孵育0 min、3 min、5 min和15 min后,转移至37℃复温1 h。采用间接免疫荧光染色法对MⅡ期卵细胞组蛋白H3K9和H4K12的乙酰化状态进行检测。结果 与室温孵育0 min相比,孵育3 min、5 min和15 min后,检测到组蛋白H4K12的乙酰化信号的MⅡ期卵细胞比率显著增加（P<0.05）。MⅡ期卵细胞组蛋白H3K9的乙酰化信号,在室温孵育0 min,3 min、5 min和15 min后,均检测不到（P>0.05）。结论 温度对MⅡ期卵细胞组蛋白H3K9的乙酰化状态无显著影响,但与组蛋白H4K12乙酰化状态密切相关。     

口服左旋肉碱与卵胞浆内单精子注射治疗男性严重少、弱精子症的临床探讨

目的 探讨口服左旋肉碱与卵胞浆内单精子注射治疗男性严重少、弱精子症的临床疗效.方法 整群选取2012年2月—2014年5月在医院收治的72例男性不育症的患者,将其作为临床研究对象,采用随机的方式分为实验组36例和对照组36例,实验组实行ICSI治疗前,前3个月男方服用口服左旋肉碱,对照组不服用左旋肉碱.对治疗后两组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率进行分析.结果 经统计分析,实验组的受精率29(80.55%)、优质胚胎率17(47.22%)、临床妊娠率12(33.33%)均比对照组21(58.33%)、9(25.00%)、9(25.00%)的高,差异有统计意义(P<0.05).结论 口服左旋肉碱与卵胞浆内单精子注射可明显提高男性精子的受精率与临床妊娠率,可以选择性作为临床辅助治疗男性不育症,值得临床推广应用.     

囊胚培养患者选择标准的建立及临床应用研究

目的:旨在建立一套能使更多患者从囊胚培养和移植中受益的选择标准。方法:回顾性分析2011年3月至2012年10月在云南省第一人民医院生殖医学中心实行的两套囊胚培养患者的选择标准。旧标准(844周期):D3选择2个评分最高的胚胎进行移植或冷冻后,若剩余胚胎≥7个,行囊胚培养;新标准(781周期):D3选择2个评分最高的胚胎进行移植或冷冻后,若剩余胚胎≥5个,行囊胚培养。对两组患者IVF的治疗结局进行比较。结果:新标准组患者的获卵数(18.01±7.01个)低于旧标准组(19.42±6.27个),差异有统计学意义(P=0.006);新标准组的患者无囊胚形成率(5.6%)高于旧标准组(2.3%),差异有统计学意义(P=0.001)。新、旧标准两组患者在囊胚形成率、优质囊胚形成率、囊胚复苏率、每周期冻融胚胎移植数、冻融囊胚移植临床妊娠率、囊胚种植率、多胎率和流产率上比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:降低囊胚培养患者的选择标准可以使更多患者从囊胚培养和移植中受益。     

精子动力学参数在常规IVF中的应用初探

目的 探讨各动力学参数对常规体外受精(IVF)受精率的影响.方法 分别对103例常规IVF周期病人的新鲜精液、优化后及孵育后3个阶段的精液进行计算机辅助的精子分析(CASA)的动力学参数检测,同时根据第五版WHO<人类精液检验及处理实验室手册>,对各组间正常和异常精液进行动力学参数的差异分析.结果 (1)异常精液组在新鲜精液的大部分参数水平显著低于正常精液组,但经过优化处理以及一定条件下的孵育后,这种差异消失;(2)检测的大部分参数在新鲜精液和优化后精液之间均有极显著性差异,在孵育后精液和优化后精液之间均有显著性差异.此外,各参数同受精率之间均无显著相关性(3)受精组和不受精组间的各动力学参数无显著性差异.结论 使用精液优化方法以及加精之前的孵育过程可以显著改善精子的活动力和直线运动能力:CASA分析各动力学参数的结果,可作为病人精液分析结果诊断的依据,但不能以此推断IVF结局.     

116例非优质胚胎冻融的临床分析

目的探讨非优质胚胎在体外受精-胚胎移植中的冷冻价值。方法回顾性分析116例非优质胚胎冷冻移植周期。根据结局分为妊娠组与非妊娠组,比较两组中不同发育速度,均匀度以及碎片比例的胚胎所占比例。结果妊娠组中,卵裂球大小严重不均和碎片比例〉20%的胚胎比例显著低于非妊娠组,碎片0-20%的胚胎比例则显著高于非妊娠组。卵裂球大小均匀或明显不均,以及不同发育速度的胚胎比例,二者并无显著差异。结论选择性冷冻非优质胚胎,有助于提高体外受精-胚胎移植的累积妊娠率,改善临床治疗结局。     

体外受精-胚胎移植中非优质胚胎的冷冻价值

目的 探讨体外受精-胚胎移植中非优质胚胎冷冻的临床价值. 方法 回顾性分析392例冷冻胚胎移植周期.根据冻存前胚胎质量将其分为优质组和非优质组,比较不同年龄段两组的妊娠率、种植率和流产率. 结果 ＜35岁组,优质胚胎组妊娠率、种植率显著高于非优质胚胎组(P＜0.05),两者流产率无显著差异(P＞0.05).≥35岁组,两组妊娠率、种植率、流产率无显著差异(P＞0.05). 结论 选择性非优质胚胎冷冻,有助于提高体外受精-胚胎移植的累积妊娠率,改善临床治疗结局,避免胚胎浪费.     

两种不同激光辅助孵化方法在卵裂期冻融胚胎移植中的比较研究

目的:通过比较激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法对卵裂期冻融胚胎移植的临床妊娠率和种植率的影响,探讨激光薄化法取代传统的激光打孔法的可能性.方法:选择在云南省第一人民医院生殖医学中心行胚胎冷冻-解冻的554个周期,对269个冻融周期行激光打孔辅助孵化(激光打孔组),对285个周期行激光薄化辅助孵化(激光薄化组).对两组冻融胚胎不同辅助孵化方法的移植及妊娠情况、及不同年龄(≥35岁和＜ 35岁)和不同胚胎评分(＜5分、5～7分、＞7分)的临床妊娠率进行比较.结果:两组解冻后胚胎的复苏率、完整胚胎率、移植胚胎形态学评分、移植胚胎数、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);不同年龄和不同胚胎评分的临床妊娠率比较,差异也无统计学意义(P＞0.05).结论:激光薄化法与激光打孔法两种激光辅助孵化方法在卵裂期冻融胚胎移植中的临床效果相近,激光薄化法在减少激光热效应对胚胎的损伤上更具有优势.     

印记基因H19在不同质量精子和胚胎中的甲基化状态

目的 对印记基因H19在三种不同质量的精子中的甲基化状态以及精卵结合后形成胚胎的甲基化状态进行比较, 初步探索精子甲基化状态与受精后胚胎甲基化状态的关系.方法 收集在云南省第一人民医院生殖医学科行IVF-ET治疗中废弃的精子91份和D3期低质量胚胎171份, 依据WHO第5版根据精子参数将精子样本分为3组, 分别分析3组的精子及受精后胚胎H19的甲基化状态.结果 B组在精子中和胚胎中H19甲基化状态异常比例显著高于另外2组 (P<0.05) .结论 印记基因H19甲基化状态异常主要集中在异常参数精子组中, 提示其异常状态与精子质量降低有关;通过IVF、ICSI受精后的胚胎都出现同等比例的异常状态, 没有显著差异;异常精子的胚胎未出现异常, 这可能与胚胎自身的自我修复功能有关;而个别正常精子受精后的胚胎出现甲基化印记异常的原因可能与体外培养条件有关, 也有可能与卵子质量本身有关.     

EOR在预测辅助生殖结局中的作用

目的在辅助生殖中评估hCG日雌二醇与获卵数的比值(estradiol oocyte ratio,EOR)在预测治疗结局中的可靠性。方法收集2010年1月至2014年12月在云南省第一人民医院生殖中心就诊的不孕症患者12564例,根据年龄分为3组:<35, 35~39,和≥40岁。在hCG日测量血清中雌二醇浓度,并在取卵日行超声引导取卵术,计算EOR,将样本分为12组。分析获卵数、卵母细胞MⅡ率、正常受精率、卵裂率、持续发育率、优胚率以及最终妊娠结局。统计EOR和其中各项参数之间的关系。结果 (1) hCG日E2水平随着年龄的增加呈下降趋势,而EOR呈上升趋势,随着EOR的上升妊娠率显著下降,差异有统计学意义(P <0.05);<35, 35~39,和≥40岁3组之间临床妊娠率(clinical pregnancy rate, CPR)差异无统计学意义(P>0.05),但年龄较大者,其妊娠率更低;(2)生化妊娠率与临床妊娠率最高的分组为500~550(pg/mL),分别为72.25%,64.32%;(3)获卵数、获卵率随着EOR的增加显著降低,P <0.05... 更多     

囊胚培养与囊胚移植的临床应用

目的:探讨囊胚培养与囊胚移植在临床上的应用价值。方法:将卵裂期胚胎延长体外培养至囊胚期,观察囊胚形成率及质量,分析卵裂期胚胎质量与囊胚形成的关系及囊胚形成与临床妊娠的关系。结果:387例患者3 513个胚胎进行囊胚培养,共获得1 489个囊胚,囊胚形成率为42.35%。Ⅰ￣Ⅱ级胚胎囊胚形成率显著高于Ⅲ￣Ⅳ级胚胎(P<0.01);移植第5、6、7日囊胚临床妊娠率比较差异有显著统计学意义(P<0.01),囊胚冷冻移植异位妊娠发生率显著低于卵裂期冷冻胚胎移植(P<0.01)。结论:①对一些形态学上认为无冷冻价值的非优质胚胎也可延长体外培养时间培养至囊胚,筛选出具有发育潜能的胚胎,从而可以最大限度地利用胚胎,减少患者的损失;②移植第5日形成的囊胚可获得更高的妊娠率;③囊胚移植可有效防止异位妊娠的发生。