单细胞转录组测序技术在人精原干细胞研究中的应用

精原干细胞的自我更新、增殖与分化对于维持精子发生至关重要。然而,调控这一过程的分子机制尚未完全阐明。精原干细胞具有不同细胞亚型,其在精子发生过程中扮演不同角色。单细胞转录组测序技术提供有效的手段,揭示各精原细胞亚型及其转录组水平和生物学功能变化,为精原干细胞的分子机制研究提供新思路。     

诱导多能干细胞体外向生精细胞自发分化潜能的研究

目的:探讨诱导多能干细胞(iPS)体外培养自发分化过程中生精细胞相关基因的表达,评估iPS体外向生精细胞自发分化的潜能。方法:经类胚体(EB)形成,体外诱导iPS向生精细胞分化,实时定量PCR和PCR检测生精细胞相关基因的表达。结果:实时定量PCR和PCR结果显示iPS经EB形成诱导分化后生精细胞不同时期的相关基因均有不同程度表达。iPS体外培养自发分化后生精细胞相关基因出现4种时间表达特征:Oct4基因表达量呈波浪状上升;Dppa3和Stra8基因表达量随诱导时间延长而下降;Dazl基因表达量呈波浪状下降;减数分裂前期基因Tex14、Msy2,减数分裂期基因Scp1、Scp3以及单倍体基因Akap3随着诱导时间延长先表达增加,而后表达下降。结论:iPS在经EB自发分化过程中表达生精细胞不同时期的相关基因,并且表达雄性配子单倍体基因,具有向雄性配子的分化潜能。     

40例输精管道梗阻性无精子症诊疗策略分析

目的:探讨输精管道梗阻性无精子症(OA)的诊疗策略。方法:40例输精管道OA患者为研究对象。首先行输精管道探查,根据术中探查情况行输精管-输精管显微吻合术(VV)、输精管-附睾显微吻合术(VE)、交叉输精管-输精管吻合术、交叉输精管-附睾管显微吻合术或睾丸取精冻存术。结果:精道探查后,共行吻合手术26例,取精+冻精手术14例。40例患者中,共有3例患者失访(2例吻合患者,1例冻精患者)。随访到的24例吻合术患者术后复通率为58.3%(14/24),自然受孕率为29.1%(7/24)。随访到的13例取精+冻精患者中已有11例行ICSI/冻精助孕。结论:输精管道OA,可根据术前严格评估和术中探查行显微复通手术或取精术;复通术后可获得自然妊娠的机会,交叉显微吻合为输精管道复通的有效途径之一。     

梗阻性无精子症再次精道显微重建术策略分析——附21例报道

目的:探讨梗阻性无精子症患者初次输精管道显微吻合术失败后再次显微重建手术的有效性和安全性。方法:本研究为回顾性病例系列研究,分析了因初次显微镜下输精管道重建手术失败,2015年3月至2020年6月期间于上海交通大学医学院附属第一人民医院泌尿外科临床医学中心男科行再次手术治疗的21例梗阻性无精子症患者的病例资料,术后随访...     

《亚洲男性学杂志》“21 世纪精液分析特刊”后序

精液分析成为不育研究的重要部分经历了一个极其漫长的历史变迁过程,并声名狼藉,曾经被排除在常规的病理学检查之外,直到近些年才引起学术界的重视.精液分析起源于19世纪,那时对精子的认识仅仅局限于检测性交后宫颈黏液中是否存在精子,曾认为是"有失体面的,不自重的[1].     

双侧斜疝术后输精管道损伤相关梗阻性无精子症的手术策略分析

目的探讨双侧斜疝术后输精管道损伤相关梗阻性无精子症的手术策略。方法回顾性分析59例有双侧斜疝手术史的梗阻性无精子症患者的临床资料。结果根据术中探查情况行显微输精管吻合术、腹腔镜辅助的显微输精管吻合术、显微输精管附睾吻合术、交叉输精管吻合术。术中探查证实输精管损伤,伴或不伴附睾梗阻,14例无法行吻合手术,行取精手术;45例行显微重建手术,其中输精管吻合术30例,腹腔镜辅助的输精管吻合术12例,交叉输精管吻合术2例,右侧输精管附睾吻合术加左侧输精管吻合术1例。80.0%(36/45)的患者术后精液检查测到精子,31.1%(14/45)的患者术后自然妊娠。结论双侧斜疝术后输精管损伤相关梗阻性无精子症,损伤情况多样化,手术是有效的治疗方法,可根据个体情况选择合适的治疗的方式。     

不同病因的非梗阻性无精子症显微镜下睾丸取精术结局研究（附1355例报道）

目的：分析不同病因的非梗阻性无精子症（non-obstructive azoospermia,NOA）患者经显微镜下睾丸取精术（microdissection testicular sperm extraction,micro-TESE）的治疗结局。方法：回顾性分析上海市第一人民医院2015年3月—2022年1月1 355例接受micro-TESE的患者,病因/危险因素包括克氏综合征（Klinefelter syndrome,KS）、Y染色体AZFc缺失、隐睾、腮腺炎性睾丸炎、放化疗、精索静脉曲张以及特发性NOA,研究分析各组患者精子获取率（sperm retrieval rate,SRR）,并比较各组取精成功的妊娠结局。结果：NOA患者的总体SRR为26.2%(355/1 355),其中腮腺炎性睾丸炎SRR最高（75.9%,22/29）,其次分别为隐睾（70.5%,43/61）、Y染色体AZFc缺失（55.6%,30/54）、KS(47.6%,71/149)、特发性NOA(18.6%,167/897)、放化疗（15.4%,2/13）,精索静脉曲张SRR最低（13.2%,20/152）...     

睾丸组织重建再生研究进展

据世界卫生组织统计,10％～15％的夫妇婚后1年不育,其中50％是由于男方因素所导致[1].研究睾丸发生发育和睾丸重建能使我们更深刻地理解精子发生及睾丸功能障碍的机制,从而帮助我们解决男性不育问题.睾丸发生发育和精子发生涉及细胞迁移、增殖、分化和细胞-细胞间的相互作用,其过程机制相当复杂,这对我们研究其发生机制及组织再生的带来了很多困难.近年来,睾丸组织移位移植重建的研究为我们提供了研究睾丸和精子发生的方法,也为我们提供了睾丸组织再生的可能.组织工程近几年发展迅速,这也引发人们思考能不能通过组织工程的方法重建有功能的睾丸组织,以保存男性生殖能力或为无生殖能力的患者解除病痛.利用组织工程技术进行细胞移植的设想,已经在医学领域的很多方面取得成功,虽然睾丸组织再生重建的工作仍然停留在实验阶段,但我们相信通过组织工程的方法重建有功能的睾丸将为男性不育的治疗带来新的希望[2,3].本文综述近年睾丸组织重建再生的研究进展.     

人精原干细胞分离、培养与鉴定

目的 :分离、鉴定和培养人精原干细胞(SSC),以获得纯化、富集的人SSC并为其研究与应用奠定基础。方法:通过免疫荧光方法检测睾丸组织中CD90表达情况;应用两步酶消化和差速贴壁法分离人睾丸生精细胞,以CD90为人SSC标志,用免疫磁珠分选技术(MACS)对人睾丸生精细胞进行分选,并利用RT-PCR和免疫细胞化学对分选所得CD90+细胞进行鉴定;同时用SG培养液将CD90+细胞与支持细胞进行体外共培养。结果:MACS分选所得CD90+细胞大小、形态特征较为均一,RT-PCR检测其表达人SSC标记性基因,免疫荧光检测其高表达人SSC特异标记GFRA-1、GPR125和UCHL-1,阳性率达90.5%,其在SG培养液中与支持细胞共培养14 d后仍可保持良好活性。结论:CD90可作为人SSC特异性标志之一,结合差速贴壁和MACS可高效分选人SSC,分选所得SSC可在SG培养液中进行体外培养。