钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶对环化腺苷酸浓度的调节

牛脑含有两种主要的CaM依赖性PDE(环核苷酸磷酸二酯酶)同工酶,它们分别由亚基分子量为60KDa和63KDa的同种二聚体组成。60KDa亚基同工酶能被依赖cAMP的蛋白激酶磷酸化,使之对CaM的亲和力降低。Ca~(2+)和CaM能阻抑这种磷酸化,而CaM激活的磷酸酶(神经钙蛋白)则能使这一作用逆转。63KDa亚基同工酶也能被磷酸化,催化磷酸化反应的酶是依赖CaM的蛋白激酶。同样,这个磷酸化作用也降低63KDa同工酶对CaM的亲和力,并为依赖CaM的磷酸酶所逆转。分析这两种PDE同工酶的复杂调节现象,可以看出在细胞活化期间,cAMP和Ca~(2+)的瞬间变化是紧密偶联的,而依赖CaM的PDE在此种信息偶联中起着至关重要的作用。     

人抗HBsAg噬菌体抗体Fab段基因的序列分析及表达

对已建的噬菌体抗体库分离出来的人抗－ＨＢｓ克隆进行了序列分析和表达研究，发现４个克隆中３个克隆的重链和轻链完全相同，ＤＮＡ序列分析表明ＶＨ分别属于ＶＨ１亚群和Ⅱ亚群，其轻链ＶＬ分别属于ＶλⅡ亚群和ＶλⅠ亚群。构建了可溶性Ｆａｂ段表达载体，显示出在细菌中表达的Ｆａｂ段抗体与ＨＢｓＡｇ特异性结合，这说明所筛选出来的噬菌体抗体具有ＨＢdisplay status     

筛选肿瘤抑制基因的方法

目前，分离和鉴定的抑癌基因还很少，其主要百由于抑癌基因属于野生型基因，很难通过选择法得到。因此，我们对分离克隆抑癌基因的几咱方法加以介绍和分析。最近发明的一种称为差异表达ｍＲＮＡ呈现技术具有很多优越性，特别适合分离鉴定抑癌基因。     

人源抗人免疫缺陷病毒1型噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）特异性噬菌体抗体库，制备人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体。方法以半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）从ＨＩＶ－１感染者外周血单个核淋巴细胞中扩增抗体重链Ｆｄ和轻链（ｋ）基因，与噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３连接，构建噬菌体抗体Ｆａｂ组合文库。对抗体库进行３轮吸附－洗脱－扩增的亲和选择后，以ＥＬＩＳＡ法筛选抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体，并进行ＤＮＡ序列分析和Ｆａｂ的可溶性表达。结果半巢式ＰＣＲ有效地扩增出Ｆｄ和ｋ基因，以此构建成容量为１９５×１０７的噬菌体抗体库。３轮亲和选择使特异性抗体得到高度富集，抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体阳性克隆占３２％。对一阳性克隆抗体基因ＣＨ１和ＣＬ部分ＤＮＡ序列进行了测定，并在大肠杆菌表达出可溶性Ｆａｂ。结论抗ＨＩＶ－１特异性噬菌体抗体库的构建和人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体的制备为今后筛选抗ＨＩＶ中和抗体奠定了基础，具有重要的应用价值。     

阴沟肠杆菌对碳青霉烯类药物的耐药机制

 目的 研究耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌分子流行病学特征和碳青霉烯耐药机制,为临床经验性用药及医院感染防控提供依据。方法 对某院2019年4—9月分离的耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌进行菌种鉴定及药敏分析,mCIM联合eCIM试验筛选碳青霉烯酶,聚合酶链反应（PCR）方法检测碳青霉烯酶耐药基因,多位点序列分型（MLST）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子流行病学特征分析。结果 8株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌中5株来自于重症监护病房（ICU）,对临床常用头孢类及加酶抑制剂药物均表现出高水平耐药的特性。所有菌株均携带金属β-内酰胺酶,7株为bla_NDM-1,1株为bla_IPM-4。MLST分子分型及PFGE同源性分析有6个ST序列类型,6个克隆群。ST596（3株）均为A群、ST121（1株）为C群、ST993（1株）为F群、ST91（1株）为E群、ST794（1株）为B群、ST88（1株）为D群。结论 该院耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌主要来源于ICU,产金属酶bla_NDM-1β-内酰胺酶是其主要耐药机制。ST596 A群阴沟肠杆菌短时间内在ICU存在局部流行,应加强医院感染防控措施,遏制暴发流行。     

宫腔镜诊治妊娠组织残留8例报道

妊娠早期人工流产或中孕引产后妊娠组织残留是临床较难处理的问题。宫内妊娠组织残留 ,轻者导致不规则性或持续性阴道流血 ,重者引起盆、腹腔感染、宫腔粘连、继发不孕等。我们对 8例临床及超声检查怀疑妊娠组织残留而刮宫不能解决的患者 ,行宫腔镜诊治 ,效果良好 ,报道如下。1　资料与方法1.1　临床资料　 2 0 0 2年 4月～ 10月期间行早期人工流产和中孕引产后 ,临床及超声检查怀疑宫内有妊娠组织残留者 8例 ,2 8～ 35岁。早孕流产后 6例 ,中孕 ( 14～ 16周 )引产后 2例。 7例临床表现为不规则或持续性阴道流血 ,最短 3个月 ,最长 9个月 ;1…     

肠套叠合并先心病手术麻醉一例

【病例】　女,10岁。体重2 5kg。因腹痛、脱肛、便血2天急诊入院。查体:体温3 8 2℃,脉搏95 /min ,呼吸3 5 /min ,血压85 /60mmHg。面色青紫,呼吸急促,口唇重度发绀,两肺叩诊清音,听诊呼吸音尚清晰,可闻及少量哮鸣音。心脏叩诊位于胸廓右侧,听诊心率95 /min ,律齐,胸骨右缘第二     

我国生物制药产业技术探讨

本文从生物制药产业的现状,和国际的差距,以及从我国生物制药企业发展策略方面进行对我国生物制药产业进行探讨研究。     

支气管肺泡灌洗液中CCL2水平对特发性肺纤维化患者预后的判断价值

目的：探究在临床实践中支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中趋化因子CCL2[chemokine(C-C motif)ligand 2]和性别-年龄-生理学指标(gender-age-physiological index,GAP)评分对特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)预后的判断价值以及两者之间的相关性。方法：回顾性分析了2017年1月—2019年12月在南京鼓楼医院住院确诊为IPF的患者35例,同期收集了因慢性咳嗽(chronic cough,CC)就诊、但无其他肺部疾病或其他器官疾病的门诊患者10例。 比较两组患者的性别、年龄、用力肺活量占预计值百分比(percentage of predicted forced vital capacity,FVC%)、一氧化碳弥散量占预计值百分比(percentage of predicted diffusing capacity for carbon monoxide,DLCO%)(CC组除外)、血气分析等指标的差异, 同时检测血清和BALF中CCL2的水平,分析不同GAP组间CCL2水平、生存时间的差异以及CCL2与GAP评分之间的相关性。 结果：与CC组相比,IPF组血清和BALF中CCL2均升高。IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)与CC组4组间比较显示,氧合指数、FVC%、血清和BALF中CCL2水平差异均有统计学意义,IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)3组间比较显示DLCO%有差异。相关性方面,BALF中CCL2 与FVC%、DLCO%均呈负相关,与GAP评分呈正相关。IPF组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)3组间生存时间有差异。结论：本研究结果不仅验证了BALF中CCL2和GAP评分对预测IPF预后的价值,同时首次揭示了不同GAP分期患者BALF中CCL2水平具有差异性,且 BALF中CCL2与GAP评分具有相关性。