三磷酸腺苷生物荧光液闪测定法检测活细胞计数

为建立一种检测活细胞数的方法,作者采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光液闪测定法检测小鼠纤维瘤细胞株L929.ATP标准曲线工作范围为10 -9～10-5mol/ml,相关系数r=0.9963(P＜0.001);当活细胞数在3×1 02～106个/ml时与发光计数值有良好的线性关系,r=0.9922(P＜0.001),变异系数 CV = 1%～3%.用ATP生物荧光液闪测定法检测活细胞数灵敏、简便、准确、重复性好,用液闪计数仪即可完成测定,有较大的实用价值.     

非甾体类抗炎药Celecoxib对人卵巢癌细胞环氧合酶2表达的影响

目的探讨非甾体类抗炎药Celecoxib对人卵巢癌环氧合酶2(COX-2)表达的影响,以及其抗卵巢癌作用与COX-2表达之间的关系。方法采用流式细胞技术(FCM)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法,检测不同浓度Celecoxib(COX-2特异性抑制剂)加入人卵巢癌SKOV3细胞株中共同培养24h后,SKOV3细胞COX-2的蛋白表达和mRNA水平变化,同时与非选择性COX-2抑制剂Aspirin相比较。采用免疫组化法检测Celecoxib对人卵巢癌裸鼠移植瘤组织中COX-2表达的影响。结果RT-PCR显示,随药物浓度增加,COX-2mRNA表达逐渐下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);FCM显示,Celecoxib(5×10-5mol/L)和Aspirin(7×10-3mol/L)组COX-2的平均荧光强度明显低于对照组(P<0.05),尤以Celecoxib(5×10-5mol/L)组更显著;Westernblot检查结果相同;免疫组化发现,Celecoxib不同剂量(10、25、50mg/kg·d)用于人卵巢癌裸鼠移植瘤后,其COX-2的IOD值均明显低于对照组(P<0.05),且随药物剂量的增大,其IOD减小。结论Celecoxib对人卵巢癌的抗肿瘤效应与COX-2表达下降有关,可能存在COX-2依赖和非依赖途径,值得进一步研究。     

非甾体类抗炎药对卵巢癌细胞生长的抑制作用

目的 比较2种非甾体类抗炎药Celecoxib和Aspirin对人卵巢癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响,以及Celecoxib对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤成瘤性的影响.方法 不同浓度Celecoxib和Aspirin作用于卵巢癌细胞不同时间后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法检测卵巢癌细胞的增殖;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞技术(FCM)测定卵巢癌细胞凋亡;裸鼠皮下移植瘤实验检测卵巢癌细胞体内成瘤性.结果 Celecoxib和Aspirin均对卵巢癌细胞的增殖有抑制作用,呈剂量依赖关系,且24 h就已表现出较强的抑制SKOV3细胞增殖效应,以Celecoxib作用最显著,24 h肿瘤细胞半数抑制剂量(IC50)所需Celecoxib浓度为5×10-5 mol/L,而所需Aspirin浓度约为7×10-3 mol/L; Celecoxib和Aspirin作用后,部分细胞出现形态不规则、细胞浆空泡化,尤以Celecoxib更明显;5×10-5 mol/L Celecoxib和7×10-3 mol/L Aspirin组癌细胞凋亡率分别为47.1%、15.7%,均高于对照组(4.8%,P均＜0.05);3种不同剂量的Celecoxib对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率分别为25.20%、33.00%、38.60%,尤以Celecoxib 50 mg/(kg·d)组更为明显,且对裸鼠肝肾胃肠等重要脏器无明显影响.结论 Celecoxib和Aspirin均能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖和诱导其凋亡,且Celecoxib作用强于Aspirin.     

运动训练对新生期惊厥大鼠学习能力和海马ZnT1表达的远期影响

目的：探讨新生期大鼠单次长程或反复惊厥对学习能力和海马锌离子转运体1（ZnT1）表达的远期影响及运动训练的干预作用。方法：生后6d（用P6表示）的SD大鼠随机分成3组各12只。单次惊厥组（SS组）和反复惊厥组（RS组）在P6吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,持续30min,SS组诱导P1,RS组连续P6;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。3组大鼠分别于P27-31、P58～61、P80-82进行3次Morris水迷宫测试,检测学习和记忆功能;同时在PS1～56对SS组和RS组进行踏转轮训练,30min,每天1次,连续P6。P82时行脑组织切片观察ZnT1在海马的表达。结果：①逃避潜伏期：各组各次逃避潜伏期均有逐渐缩短趋势,其中第1次水迷宫测试RS组P1～4潜伏期明显高于对照组（P〈0．05）,第5次各组差异不明显;第2次水迷宫RS组P1～2潜伏期较对照组仍显著延长（P〈0．05）,P3差异无显著性意义;第3次测试各组间差异不明显。②ZnT1原位杂交：RS组ZnT1 mRNA在海马表达明显高于对照组和SS组（P〈0．01）。结论：新生期反复长程惊厥能够对学习功能产生远期损害;而单次长程惊厥对学习能力无明显影响。早期运动训练能够改善反复惊厥所致的学习能力损害,这可能与海马ZnT1表达上调有关。     

宫颈癌及癌前病变HPV-16存在状态检测的研究

目的：为建立理想的HPV存在状态检测方法，了解宫颈癌及癌前病变HPV一16DNA的整合状况．初步探讨HPV-16DNA整合在宫颈癌发生发展中的作用及HPV-16整合状态检测可能具有的临床应用价值方法：采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因，根据E2／E6比值来判定HPV-16DNA的存在状态：并对HPV-16阳性的51例宫颈鳞癌和49例宫颈上皮内瘤样病变石蜡标本进行检测．结果：1）HPV—16E2、E6标准曲线相关系数均为1．00，扩增效率均在95％以上：2）确定0，81作为多重实时PCR区分游离型和混合型HPV-16的界值、3）CINⅠ中HPV—16大多以游离方式存在，但仍有整合的发生（42，9％）；CINⅡ和CINⅢ中HPV—16以混合型为主：浸润癌中以整合型HPV—16为主。4）HPV-16整合发生率与不同程度的宫颈病变有关，并且随着宫颈病变级别的升高HPV-16整合发生率呈上升趋势-5）Ⅱ＋Ⅲ期宫颈癌中整合型HPV—16所占比例显著高于Ⅰ期宫颈癌结论：1）多重实时定量PCR是一种敏感性高、简便快速的HPV—16病毒存在状态的检测方法2）HPV-16整合是宫颈癌变的早期事件，与宫颈癌前病变的进展有关。3）宫颈癌中整合型HPV—16的发生可能具有预后价值、     

双胎妊娠合并自发性肝破裂1例

1 临床资料 患者,34岁,职业:医生,G2P0,LMP:2005年9月13日,EDC:2006年6月20日.因停经36 2周,不规律子宫收缩1h于2006年5月25日晚23:30急诊入院.平素月经规律,此次停经38d查血β-hCG升高,停经3个月,B超提示双胎妊娠.孕18周时感胎动至今.     

原发性宫颈恶性颗粒细胞瘤1例报道

<正>患者,37岁,以"不规则阴道流血2余年"于2009年4月15日收住我院。入院查体示:一般情况可,心肺未见异常,腹软,无压痛。妇科检查示:外阴已婚已产式,阴道穹窿存在,未扪及结节,宫颈肥大,重度乳头样增生,宫颈管增粗,质硬,触血,子宫后位,稍大,活动度差,右侧宫旁组织及右骶韧带增厚,扪及结节。阴道镜下宫颈活检提示:宫颈恶性颗粒细胞瘤。入院诊断:宫颈恶性颗粒细胞瘤Ⅱb期。患者接受IEP化疗1次,方案为:异环磷酰胺1.5g,VP16 100mg,顺铂30mg,共化疗3天。停化疗10日后妇科检查示:宫颈下唇局部增生,右侧宫旁组织及右骶韧带增厚较化疗前好转,未扪及明显结节。于2009年4月     

剖宫产切口憩室的诊治现状

剖宫产切口憩室是剖宫产术后远期子宫出血的主要原因,目前临床尚无统一的诊治标准。其临床表现主要为剖宫产后阴道不规则流血及不孕,再次妊娠可发生子宫破裂、切口妊娠大出血等。诊断需排除内分泌原因,分析病因,选择合理的辅助检查。治疗以中药、女性激素等保守治疗为主,但保守治疗效果较差时,应以手术治疗来促进憩室局部液体的流通,并切除病灶。选择手术方式时,要以憩室的类型为主要参考依据,主要采用子宫腔镜、腹腔镜、阴式手术等治疗手段。     

交界性卵巢上皮性肿瘤234例临床病理及预后分析

目的 探讨交界性卵巢上皮性肿瘤的临床病理特征及预后,并探讨复发相关因素.方法 回顾性分析四川大学华西第二医院2001年1月至2007年6月收治的交界性卵巢上皮性肿瘤患者的临床病理资料,通过单因素及多因素logistic回归模型对复发相关因素进行分析.结果 234例交界性卵巢上皮性肿瘤患者的发病年龄为40.1岁(14～80岁).其中,浆液性肿瘤101例(43.2%),黏液性肿瘤94例(40.2%),混合性肿瘤19例(8.1%),子宫内膜样肿瘤12例(5.1%)及透明细胞肿瘤8例(3.4%);Ⅰ期161例(68.8%),Ⅱ期19例(8.1%),Ⅲ期54例(23.1%),无Ⅳ期病例.182例(77.8%)患者行开腹手术,45例(19.2%)行腹腔镜手术,7例腹腔镜改行开腹手术.119例(50.9%)患者行保守性手术(保留子宫及至少1侧附件),115例(49.1%)行非保守性手术(子宫切除+双侧附件切除术).平均随访时间为40个月(8～78个月),26例(11.1%)患者术后复发,无肿瘤相关的死亡病例.单因素分析显示,肿瘤复发与手术方式、肿瘤径线大小、是否为双侧病变、囊肿破裂与否、分期、是否为微乳头浆液性交界性卵巢肿瘤、是否为微浸润及腹膜种植与否有关(P均<0.05).经多因素分析显示,手术方式(OR=2.304,P=0.024)、囊肿破裂(OR=2.213,P=0.038)、分期(OR=4.114,P<0.01)、微浸润(OR=2.291,P=0.046)及腹膜种植(OR=2.101,P=0.016)是肿瘤复发的独立危险因素.结论 交界性卵巢上皮性肿瘤虽预后好,但部分患者仍存在复发风险,应重视具有复发高危因素的病例.     

儿童及青少年分化型甲状腺癌分子生物学的研究

儿童及青少年甲状腺癌少见，生物学行为表现为较强的侵袭性，但总体预后良好。乳头状癌是人群中最常见的甲状腺癌病理类型。随着甲状腺癌研究在基因水平上的不断深入，已发现多种基因与其发生、发展、预后相关，为甲状腺癌的诊断、预后判断和治疗都提供了全新的方向。RET/PTC基因重排、PAX8/PPARγ重排等基因重排在儿童甲状腺癌的发生中有着非常重要的作用，而RAS基因、BRAFV600E基因的突变作用相对成人，在儿童及青少年甲状腺癌的发生发展上作用较小。