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1.
【目的】观察重组人白细胞介素6(rIL-6)在体外对人近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖及生物学表型的影响。探讨rIL-6对HK-2细胞作用的时间-效应及剂量-效应关系。【方法】用MTT比色法检测rIL-6对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测rIL-6对细胞周期及α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)阳性细胞百分率的影响;倒置显微镜观察rIL-6对HK-2细胞形态改变的影响。【结果】MTT比色法示,rIL-6在10~50ng/mL作用浓度范围内促进HK-2细胞增殖,呈剂量、时间依赖效应;rIL-6作用浓度为100~200ng/mL时抑制细胞增殖,随作用浓度增加抑制作用加强(F=201.582,P〈0.001),(F=43.943,P〈0.001)。rIL-6影响HK-2细胞的DNA合成。HK-2细胞有基础量的α—SMA表达,25ng/mL rIL-6与HK-2孵育1~48h后,α—SMA阳性细胞百分率高峰出现在48h(F=442.22,P〈0.001)。rIL-6干预下,HK-2细胞形态由卵园型渐转变为长棱型、长条型。【结论】rIL-6可促进HK-2细胞增殖及生物学表型的转化,但大剂量的rIL-6可抑制HK-2细胞增殖。 相似文献
2.
[目的]研究血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后连接蛋白43(Cx43)表达的变化及与细胞周期分布的关系。[方法]分离培养大鼠心肌细胞,用血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大,72h后用RT-PCR和免疫荧光方法观察心肌细胞Cx43基因和蛋白表达,用流式细胞仪测定法观察心肌细胞周期分布变化以及Cx43表达量的关系。[结果]血管紧张素Ⅱ处理后的心肌细胞表现细胞肥大且细胞活力增强,S期、G2-M期细胞百分比增加,细胞内G2-M(二倍体)DNA含量降低,Cx43蛋白表达低于对照组,Cx43mRNA表达水平也较对照组明显下调,Cx43蛋白表达下调与细胞周期分布的改变相关。[结论]血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后Cx43基因表达明显下调,导致Cx43蛋白表达亦出现下调,这一改变可能与心肌肥大过程中的细胞周期变化有关,提示血管紧张素Ⅱ可能通过调控Cx43基因的表达而参与缝隙连接重构过程,而Cx43表达的变化可能与心肌肥大的机制有关。 相似文献
3.
目的评价免疫调节T细胞和细胞因子在再生障碍性贫血(再障)细胞免疫功能紊乱中的作用。
方法2004 02—2005 06中山大学第二附属医院采用流式细胞术检测27例特发性再障患儿骨髓及外周血淋巴细胞亚群和CD+4CD+25T细胞水平,ELISA检测骨髓转化生长因子(TGF β1)和Flt 3L水平,并与正常儿童对照。
结果与对照组比较,初诊再障患儿外周血和骨髓CD+8T细胞均显著增高(P<0.05),重型再障(SAA)组伴外周血CD-3CD+56NK细胞及骨髓B细胞显著下降(P<0.05)。初诊SAA组骨髓CD+4CD+25T细胞\[(7.5±3.4)%\]显著高于对照组\[(4.3±0.9)%,P<0.05\],初诊SAA组及轻型再障(MAA)组骨髓CD+4CD+25/CD+4比值分别为(28.9±11.1)%和(28.2±9.4)%,均显著高于对照组\[(17.4±0.9)%,P均<0.05\],骨髓TGF β1分别为(2.2±1.7)μg/L和(2.0±0.6)μg/L,均较对照组[(4.4±0.9)μg/L]显著降低(分别为P<0.01、P<0.05),而Flt 3L水平分别为(1031.1±321.8)ng/L和(694.7±424.7)ng/L,均较对照组[(63.0±37.5)ng/L]显著增高(P均<0.01)。缓解期SAA儿童除外周血CD+8T细胞仍较对照组显著增高外,其余上述指标均接近正常水平。相关分析显示,骨髓CD+4CD+25T细胞与CD+3CD+4T细胞呈显著正相关(r分别为0.495、0.540,P<0.01);Flt 3L与骨髓CD+3、CD+4、CD+8T细胞及CD+4CD+25T细胞均呈显著正相关(r分别为0.732、0.542、0.688、0.405,P分别<0.01、0.01、0.01、0.05),而TGF β1与骨髓CD+8T细胞和Flt 3L水平呈显著负相关(r分别为-0.431、-0.482,P分别<0.05、<0.01)。
结论儿童再障发病与CD+4CD+25T细胞数量缺乏无关,骨髓TGF β1水平显著降低和Flt 3L水平显著增高可能在再障儿童T淋巴细胞数量增多和功能紊乱中起重要作用。 相似文献
4.
�����ϰ���ƶѪ����CD+4CD+25Tϸ����TGF����1Flt��3Lˮƽ�仯������ 总被引:3,自引:1,他引:3
目的评价免疫调节T细胞和细胞因子在再生障碍性贫血(再障)细胞免疫功能紊乱中的作用。方法2004-02—2005-06中山大学第二附属医院采用流式细胞术检测27例特发性再障患儿骨髓及外周血淋巴细胞亚群和CD 4CD2 5T细胞水平,ELISA检测骨髓转化生长因子(TGFβ-1)和F lt-3L水平,并与正常儿童对照。结果与对照组比较,初诊再障患儿外周血和骨髓CD 8T细胞均显著增高(P<0.05),重型再障(SAA)组伴外周血CD3-CD 56NK细胞及骨髓B细胞显著下降(P<0.05)。初诊SAA组骨髓CD 4CD 25T细胞[(7.5±3.4)%]显著高于对照组[(4.3±0.9)%,P<0.05],初诊SAA组及轻型再障(MAA)组骨髓CD 4CD2 5/CD 4比值分别为(28.9±11.1)%和(28.2±9.4)%,均显著高于对照组[(17.4±0.9)%,P均<0.05],骨髓TGFβ-1分别为(2.2±1.7)μg/L和(2.0±0.6)μg/L,均较对照组[(4.4±0.9)μg/L]显著降低(分别为P<0.01、P<0.05),而F lt-3L水平分别为(1031.1±321.8)ng/L和(694.7±424.7)ng/L,均较对照组[(63.0±37.5)ng/L]显著增高(P均<0.01)。缓解期SAA儿童除外周血CD8 T细胞仍较对照组显著增高外,其余上述指标均接近正常水平。相关分析显示,骨髓CD4 CD 25T细胞与CD 3CD 4T细胞呈显著正相关(r分别为0.495、0.540,P<0.01);F lt-3L与骨髓CD 3、CD 4、CD 8T细胞及CD 4CD 25T细胞均呈显著正相关(r分别为0.732、0.542、0.688、0.405,P分别<0.01、0.01、0.01、0.05),而TGFβ-1与骨髓CD 8T细胞和F lt-3L水平呈显著负相关(r分别为-0.431、-0.482,P分别<0.05、<0.01)。结论儿童再障发病与CD 4CD 25T细胞数量缺乏无关,骨髓TGFβ-1水平显著降低和F lt-3L水平显著增高可能在再障儿童T淋巴细胞数量增多和功能紊乱中起重要作用。 相似文献
5.
患儿 男,第1胎,足月顺产。1岁1个月时不能自行扶立,双足跟不能着地,只能发单音,可认出父母,反应差。头喜向右歪。双眼睑轻度下垂,眼距正常。鼻无畸形,鼻孔朝天,耳位正常,左耳屏有一小皮赘。心、肺正常。外生殖器正常。四肢及脊柱无异常。掌纹正常。1岁9个月时,双眼睑下垂好转,已能自行扶立,双足跟勉强着地,仍只能发单音。2岁7个月时,双足跟已能着地,能自行站立,单手扶持下可行走,仍不能叫爸妈,反应能力有进步。3次检查测量其身高、体重、头围均落后于同龄正常婴幼儿。患儿父母非近亲结婚,无放射线接触史,患儿… 相似文献
6.
高效液相色谱法测定人子宫、输卵管及血清中氧氟沙星浓度 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立人组织及血清中氧氟沙星含量的HPLC测定方法。方法采用Hypersil C18柱分离,流动相为乙腈-0.01 moL·L-1磷酸盐缓冲液-0.5 moL·L-1四丁基溴化铵(9∶91∶4, pH 2.5),流速1.0 mL·min-1,在UV 294 nm处测定;样品经匀浆或用液氮冷冻研磨至粉末状,用1%曲拉通-100溶解,乙酸乙酯-异丙醇(9∶1)提取,HPLC测定。结果 氧氟沙星浓度在0.2~8.0 μg·mL-1与峰高比呈线性关系,最小检测限40 ng·mL-1,用本法对20例妇产科病人进行药物浓度测定,取得了满意的结果。结论此方法适用于人体组织中氧氟沙星浓度的测定,口服后氧氟沙星在人体组织中有良好的分布。 相似文献
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【目的】观察重组人白细胞介素6(rIL-6)在体外对人近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖及生物学表型的影响。探讨rIL-6对HK-2细胞作用的时间-效应及剂量-效应关系。【方法】用MTT比色法检测rIL-6对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测rIL-6对细胞周期及α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)阳性细胞百分率的影响;倒置显微镜观察rIL-6对HK-2细胞形态改变的影响。【结果】MTT比色法示,rIL-6在10~50ng/mL作用浓度范围内促进HK-2细胞增殖,呈剂量、时间依赖效应;rIL-6作用浓度为100~200ng/mL时抑制细胞增殖,随作用浓度增加抑制作用加强(F=201.582,P〈0.001),(F=43.943,P〈0.001)。rIL-6影响HK-2细胞的DNA合成。HK-2细胞有基础量的α—SMA表达,25ng/mL rIL-6与HK-2孵育1~48h后,α—SMA阳性细胞百分率高峰出现在48h(F=442.22,P〈0.001)。rIL-6干预下,HK-2细胞形态由卵园型渐转变为长棱型、长条型。【结论】rIL-6可促进HK-2细胞增殖及生物学表型的转化,但大剂量的rIL-6可抑制HK-2细胞增殖。 相似文献
8.
目的:研究laminin和survivin蛋白在原发性胆囊癌组织中的表达情况,及其与癌组织类型、病理分级和转移状况的关系。 方法:应用免疫组织化学方法检测49例原发性胆囊癌、21例胆囊腺瘤和13例慢性胆囊炎组织中laminin和survivin蛋白的表达。 结果:胆囊黏膜内癌或原位癌细胞基底膜laminin线性染色完整;NevinⅡ期胆囊癌组织表现为基底膜不完整,变薄,断裂,或缺损;临床NevinⅢ、Ⅳ、Ⅴ期胆囊癌,则无基底膜形成,在肿瘤组织周围,laminin表达类型呈碎片状或断线状和连续线状,部分癌组织内laminin染色消失和癌细胞浆内有laminin弱染色。胆囊癌组织中survivin阳性表达率明显高于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组织,但survivin的阳性表达与胆囊癌细胞分化程度、病理分级和转移无关(P>0.05)。且胆囊癌组织中laminin的连续线断裂或缺失,与胆囊癌组织中survivin的表达情况无相关性。 结论:胆囊癌基质中laminin的表达类型与胆囊癌的侵袭和转移有关,而survivin在胆囊癌中表达增加,但两者之间似乎无关联。 相似文献
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人端粒酶逆转录酶基因siRNA表达框架的构建和体外表达研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨靶向小干扰RNA表达框架(SEC)对舌癌细胞内源性人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)的特异性抑制作用。方法利用两步法PCR技术构建多条SEC,采用第5代聚酰胺-胺型树枝状高聚物(G5 PAMAM-D)纳米微球介导SEC转染Tca8113细胞,应用实时荧光定量RT-PCR技术和Western-blot等检测内源性hTERT的表达水平,并进一步筛选出最有效的小干扰RNA靶序列。结果针对不同靶位点设计的SEC干扰效果有显著差异,SEC-A的干扰效果最强,并且能以高度序列特异性方式沉默hTERT基因的表达;此外,转染次数与载体理化特性亦可影响SEC的干扰效应(P〈0.05)。结论RNA干扰效应主要取决于靶序列;G5 PAMAM-D纳米载体能够介导SEC-A高效抑制内源性hTERT基因的表达;hTERT基因有望成为舌癌基因治疗的理想靶点。 相似文献
10.
成釉细胞瘤中MMP-2的表达及RNA干扰的抑制作用 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:研究MMP-2存成釉细胞瘤中的表达和RNA干扰对成釉细胞瘤细胞中MMP-2基因的沉默效应。方法:培养成釉细胞瘤细胞,应用免疫组织化学方法检测成釉细胞瘤中MMP-2的表达;体外构建MMP-2靶向siRNA质粒表达载体,将siRNA质粘表达载体转染原代培养的成釉细胞瘤细胞,激光共聚焦显微镜检测siRNA质粒表达载体的转染效率,RT-PCR检测成釉细胞瘤细胞中MMP-2 mRNA的改变,明胶酶谱法检测MMP-2的变化.应用SPSSI 1.0统计软件中的t检验对结果进行统计学分析。结果:成釉细胞瘤中MMP-2呈阳性表达.siRNA质粒表达载体对原代培养的成釉细胞瘤细胞的转染半为41.8%;转染后,成釉细胞瘤细胞的MMP-2 mRNA表达水平显著降低,酶原性MMP-2和活性MMP-2显著减少,P〈0.05结论:体外构建的MMP-2靶向siRNA质粒表达载体可以转染体外培养的成釉细胞瘤细胞,并导致MMP-2基因沉默。 相似文献