不孕不育人群中染色体多态性与辅助生殖结局的关系

目的探讨不孕不育人群中染色体多态性与辅助生殖助孕结局的关系。方法收集福建省妇幼保健院生殖中心共1 300对夫妇病例,染色体多态性阳性者96对(7.4%);以取卵的79个周期纳入研究对象,随机选取染色体正常的140个周期为对照。比较染色体多态性携带女方(A组)、男方(B组)和染色体正常者(C组)的生殖助孕结局。结果染色体多态性阳性者96对中,染色体多态性女方携带47人、男方49人。多态性染色体检出率:D/G组染色体2.1%;Y染色体0.3%;1、9、16号染色体1.5%。3组间年龄、基础卵泡生成激素、黄体生成激素、催乳素、雌二醇、睾酮及促性腺激素的用量和使用天数差异均无统计学意义;获卵数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、囊胚形成数、优质囊胚率、妊娠率类似;IVF与ICSI受精率差异无统计学意义;但流产率A组最高。结论胚胎早期流产可能与女性染色体多态性有关,但对辅助生殖助孕结局均无影响。     

HCG日雌激素自然降低与促排卵结局的关系

目的:探讨HCG日雌激素(E_2)降低对促排卵结局的影响。方法:回顾分析2010年1月至2016年4月在福建省妇幼保健院生殖中心因注射HCG日E_2上升者791例(上升组)和E_2自然下降者485例(下降组)。将E_2下降组(B组)分为三个亚组:0△E_2≤10%,10%△E_2≤20%,△E_220%。比较各组的卵子回收率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率及流产率。结果:下降组的卵子回收率、卵裂率、优质胚胎率均低于上升组(P0.05),两组的临床妊娠率和流产率比较,差异无统计学意义。HCG日雌激素下降大于20%与低卵子回收率、低卵裂率、低优质胚胎率相关(P0.05),但不影响临床妊娠率和流产率。结论:HCG日E_2自发下降大于20%影响控制性超排卵的结局。     

密度梯度离心法对不同质量精液的影响

目的探讨梯度离心法对不同质量精液的影响,分析其最佳离心力与离心时间。方法收集不同质量精液分组处理,在不同的离心力和离心时间作用下对各组标本进行梯度离心处理。离心处理后分析各组在不同离心力和离心时间的作用下收集到的精子质量,比较各组的精子密度与活力。结果对于高质量的精液标本最佳离心力与离心时间是200g离心10~15min;普通质量的精液是300g下离心15~20min;对于低质量精液即使加大离心力,增加离心时间也无法达到预期的离心效果。结论在人类辅助生殖技术(ART)中,相同离心力与离心时间对不同质量的精液处理效果不同,不同离心力离心时间下对相同质量精液的处理效果也有差别。     

人类白细胞抗原基因型的胚胎植入前遗传学诊断

目的建立人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因配型,为开展HLA配型的胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)联合或不联合单基因病的临床工作提供技术支持。方法采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)的方法扩增3~5个滋养层细胞的全基因组,并用多重聚合酶链式反应(PCR)方法扩增多个短串联重复多态性(polymorphic short tandem repeat,STR)位点,通过毛细管电泳技术验证STR位点的特异性。结果微量细胞全基因组的扩增成功率为93.75%,筛选了HLA基因的5个杂合度高、特异性强的STR位点,等位基因脱扣(allele drop-out,ADO)率为10.34%。结论微量细胞MDA结合多重PCR的方法可以同时检测HLA-A、HLA-B、DRA、DQB位点,扩增成功率高,ADO率低,可以有效地筛选出相匹配的胚胎,为同胞患儿提供造血干细胞来源具有可行性。     

化学和热传导双重损伤构建大鼠宫腔黏连模型的方法及其评价

目的 采用化学和热传导双重损伤法构建大鼠宫腔黏连（IUA）模型，阐明该方法作为化学损伤的改良方法构建接近 IUA 病理学变化动物模型的特点和优势。 方法 6 只 6~8 周龄雌性 SD 大鼠随机分为化学损伤组和化学及热传导双重损伤组（双重损伤组），每组3只。以大鼠左侧宫角为实验组，右侧宫角为自身对照组。化学损伤组大鼠左侧宫角作为化学损伤实验组采用95% 乙醇作用3 min，右侧宫角作为化学损伤自身对照组不进行任何处理；双重损伤组大鼠左侧宫角作为双重损伤实验组采用95% 乙醇作用 3 min 后100 ℃ 热水再处理1 min，右侧宫角作为双重损伤自身对照组不进行任何处理。造模术后第14天，采用 HE染色、Masson 染色和 Ki67 免疫组织化学染色法检测各组大鼠子宫内膜厚度、腺体数量、纤维化面积比及腺体上皮细胞和基质细胞的增殖指数（PI）。 结果 HE 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜厚度和腺体数量明显减少（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫宫腔封闭，子宫内膜厚度和腺体数量均明显减少（P<0.05）。Masson 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜层呈纤维化增生，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫内膜层可见纤维化黏连带和完整肌层，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）。Ki67 免疫组织化学染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜组织中腺体上皮细胞核形状和排列发生改变，基质细胞 PI 明显升高（P<0.05）。 结论 化学和热传导双重损伤法操作简便且可重复性好，可为 IUA 治疗的安全性评价、机制研究和临床转化提供具有纤维化黏连带和完整肌层的IUA模型，具有良好的应用前景。