32497例正常听力孕龄女性耳聋基因携带率与突变谱调查

目的 在正常听力孕龄人群中开展耳聋基因携带率与突变谱调查,为耳聋基因筛查、遗传咨询、疾病管理提供数据. 方法 32 497例听力正常且无耳聋家族史的孕龄女性在我院医学遗传中心门诊接受遗传咨询后,接受耳聋基因芯片筛查.对于检测结果提示为常染色体隐性遗传耳聋基因突变携带者,建议其配偶进行进一步耳聋基因检测.对于夫妇均为耳聋基因突变携带的家庭,给予遗传咨询与风险评估,必要时提供产前耳聋基因诊断. 结果 32 497位听力正常且无耳聋家族史的孕龄女性中,1 181例携带遗传性耳聋基因突变,携带率为3.63％.其中,1 117例携带常染色体隐性遗传的耳聋基因杂合突变,包括4种常见的GJB2基因突变665例,2种常见的SLC26A4基因突变407例,GJB3基因突变45例.此外,64例携带与氨基糖甙类药物诱导性耳聋密切相关的线粒体DNA 12S rRNA基因突变. 结论 在正常听力的孕龄人群中开展耳聋基因携带率与突变谱的研究,对优生优育与遗传咨询具有重要意义.     

用体表面积估计儿童少年血压正常值的探讨

血压是反映儿童少年心血管机能发育的基本指标。近年来,儿童少年血压的研究报道颇多。为了探索血压正常值标准的新途径,1983年我们对3497名7～17岁健康儿童少年进行了血压调查。本文着重讨论体表面积与血压规律,利用体表面积来估计血压正常值。     

唐氏综合症的产前诊断及INHBA基因的多克隆抗体的制备与鉴定

目的：INHBA的表达、纯化及多克隆抗体的制备;对纯化的抗原的初步鉴定。 方法：利用基因重组技术获得INHBA基因,将其构建到原核表达系统,并分离纯化得到分子量为64KD的带有组氨酸标签的重组INHBA融合蛋白,用分离纯化后的INHBA融合蛋白作为抗原免疫,获得抗INHBA的多克隆抗体。结果：成功地获得INHBA基因,并且以包涵体的形式表达于大肠杆菌中,用间接酶联免疫吸附(ELISA)方法, Western blot检测结果显示,该抗体能特异性地与胎盘组织产生明显免疫亲和反应。 结论：建立原核高效稳定INHBA表达系统,并对其做了初步的鉴定 ,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。     

妊娠早期孕妇血清中ADAM12-S水平与异位妊娠的相关性研究

目的:探讨妊娠早期孕妇血清中ADAM12-S水平变化与异位妊娠的关系。方法:选取2010年7月至2011年5月就诊于我院的60例异位妊娠孕妇(研究组),120例正常单胎妊娠孕妇(对照组),于5～9孕周应用时间分辨荧光免疫分析法检测其血清中ADAM12-S水平,并分析ADAM12-S水平与异位妊娠的关系。结果:①120例正常对照组孕妇5、6、7、8、9孕周血清中AD-AM12-S水平分别为6.80±0.56、17.45±1.22、40.24±2.72、88.64±5.31、162.42±15.78μg/L,总体趋势是随孕周的增加而增加,且明显的线性关系,相关系数(r)为0.898(P<0.05)。②60例研究组孕妇血清ADAM12-S水平一直处于低值状态,且随着孕周的增加变化不明显,甚至有所降低,未呈现线性关系,r为0.064(P>0.05)。③研究组各孕周的中位数倍数明显低于正常对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:异位妊娠孕妇血清ADAM12-S水平明显低于正常单胎妊娠者,可以作为异位妊娠早期诊断的指标之一,检测血清ADAM12-S水平可提高异位妊娠的早期诊断率。     

INHBA基因多克隆抗体的制备与鉴定

目的INHBA的表达、纯化及多克隆抗体的制备;对纯化的抗原的初步鉴定。方法利用基因重组技术获得INHBA基因,将其构建到原核表达系统,并分离纯化得到分子量为64 kD的带有组氨酸标签的重组INHBA融合蛋白,用分离纯化后的INHBA融合蛋白作为抗原免疫,获得抗INHBA的多克隆抗体。结果成功地获得INHBA基因,并且以包涵体的形式表达于大肠杆菌中,用间接酶联免疫吸附(ELISA)方法,Western blot检测结果显示,该抗体能特异性地与胎盘组织产生明显免疫亲和反应。结论建立原核高效稳定INHBA表达系统,并对其做了初步的鉴定,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。     

辅助生育与自然妊娠孕妇早期唐氏筛查结果的对照研究

目的比较采用辅助生育技术受孕与自然受孕者孕早期唐氏筛查各项指标及筛查假阳性率的差异。方法选取2012年1月—2014年3月在该院进行早期（10~13＋6w）唐氏筛查的IVF孕妇1 600例,筛选同期孕周、年龄、体重等因素相匹配的自然受孕孕妇16 000例为对照组,入选孕妇均为单胎。抽血前B超明确孕周并测量NT,测血清学标志物PAPP-A、fβ-h CG的水平,比较两组各指标中位数的差异及筛查假阳性率。结果各孕周段两组孕妇PAPP-A Mo M值均〈1.0,IVF组孕妇PAPP-A Mo M值低于相应孕周的对照组。两组各孕周段fβ-h CG Mo M值均在1.0左右,相应孕周间比较差异无统计学意义。两组孕妇NT水平差异无统计学意义。IVF组21三体筛查阳性率为13.40%,显著高于对照组10.19%。两组失访率均在8%左右。其中,IVF组206例21三体高风险孕妇中84.5%进行了染色体核型分析,确诊2例;对照组935例中71.5%接受穿刺,确诊15例。两组确诊率相当。IVF组筛查假阳性率为14.69%,明显高于对照组,差异有统计学意义（χ2=7.50,P=0.006）。结论IVF技术的使用会降低早期唐氏筛查血清标志物PAPP-A的浓度,因此增加胎儿21三体检出的假阳性率,建议引入适当的校准系数进行风险评估。     

阶梯式耳聋基因诊断策略及其临床实践

目的建立阶梯式耳聋基因诊断策略,应用于临床诊疗实践,以提高诊断效率、降低检测成本改善病人管理。方法选取2017年1月至2020年12月广东省妇幼保健院医学遗传中心226例耳聋患者进行基因诊断。阶梯式诊断策略第一阶梯采用微阵列芯片法对受检者进行GJB2、GJB3、SLC26A4及线粒体DNA 12S NrRA基因上中国人群耳聋基因变异热点检测。第二阶梯基因诊断采用Sanger测序法对受检者进行GJB2、SLC26A4等中国人群中较常见的耳聋基因测序。第三阶梯基因诊断采用全外显子测序法,主要用于第一、二阶梯未检出或检出结果不能解释表型的耳聋病患,但对于有急切产前诊断需求等检测时间窗较短的耳聋患者可直接接受高通量测序检测。结果第一阶梯基因检测为14例病患明确分子诊断(诊断率8.5%),第二阶梯基因检测为24例病患明确分子诊断(诊断率15.9%),第三阶梯基因检测额外提高了32.4%的诊断率。而在选择直接接受全外显子组测序检测的人群中诊断率为44.3%。结论本研究建立了一种阶梯式耳聋基因诊断策略,并将其应用于临床诊疗,实践效果显示分层递进式检测更为经济。但对于部分检测时间窗较短的耳聋患者,直接行高通量测序检测,效率更高。明确耳聋患者分子诊断有助于提高病人管理、改善患者预后、规范遗传咨询及再发风险评估。     

建立耳聋防控的区域服务模型以推进健康中国战略

目的 拟建立适合区域特性的耳聋防控服务模型,在耳聋防控的重要时间节点设置系列临床方案进行预防与干预.方法 42637个家庭被纳入耳聋防控管理.根据国际耳聋防控策略与我国我省的实际情况,在耳聋防控的5个重要时间节点设置一系列临床方案,以期建立一种高效可行的区域服务模型.结果 402个聋病高风险家庭及42235个一般风险家...     

快速检测β地中海贫血基因型的方法学研究

目的利用PCR-HRM技术对常见β地中海贫血5种突变类型进行检测,对野生型、纯合以及杂合突变进行分析,建立一种有效地突变筛查方法。方法针对5种突变类型进行短片段扩增引物设计,用已知基因型的β地中海贫血患者基因组DNA标本进行PCR-HRM分析,并对于纯合子进行PCR产物测序验证。结果常见5种基因型纯合子以及杂合子均可以利用PCR-HRM进行区分,并得到测序验证。结论利用PCR-HRM技术可以对常见β地中海贫血进行基因突变筛查,并可以发现未知突变。