剖宫产术后瘢痕妊娠10例临床诊治分析

目的探讨剖宫产瘢痕妊娠（CSP）的临床表现,诊断和治疗方法。方法回顾性分析我院2011年4月-2013年8月收治10例CSP病例的临床资料。结果6例经阴道彩超确诊,4例误诊。9例行介入治疗＋MTX＋米非司酮治疗成功（其中l例介入后行清官,术中发生大出血,经开腹病灶楔形切除术）;1例MTX＋米非司酮药物治疗后行清宫保守治疗成功。结论CSP行介入治疗,同时联合MTX＋米非司酮可有效杀胚,减少大出血,成功保留子宫,是有效治疗CSP的方法。     

依曲替酸(R_O10-1670)对培养的正常人角质形成细胞Fas/Fasl系统表达及凋亡的研究

目的　通过研究依曲替酸作用于培养的正常人KC前后Fas/Fasl的表达及其与凋亡的关系 ,进一步探讨其治疗银屑病的作用机理。方法　依曲替酸作用培养的正常人KC后 ,进行免疫细胞化学研究 ,观察其对KC表达Fas/Fasl蛋白的影响。用流式细胞仪 (FACS)对依曲替酸处理后的KC进行凋亡检测。结果　①正常人KC几乎不表达Fas和Fasl ;②依曲替酸作用 16h时KC的Fasl表达最强 ,40h时表达Fas最强 ;相同条件下 ,KC表达Fasl比Fas弱 ;③依曲替酸刺激后引起KC凋亡。结论　培养的正常人KC中Fas/Fasl系统不参与其凋亡 ;依曲替酸作用于培养的正常人KC后 ,上调Fas/Fasl系统表达 ,并促进KC凋亡 ,拮抗KC良性增生 ,Fas/Fasl介导的凋亡可能是维甲酸治疗银屑病的重要原因。     

NB-UVB和阿维A对角质形成细胞肝素结合表皮生长因子样生长因子mRNA的影响

目的 探讨阿维A和窄谱中波紫外线(NB-UVB)对培养的正常人角质形成细胞增殖和肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)mRNA表达的影响.方法 用1μmol/L阿维A和/或100mJ/cm²NB-UVB处理正常人角质形成细胞12h后,用MTT法、RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR法分别检测细胞增殖和HB-EGFmRNA表达的改变.结果 1μmol/L阿维A和100mJ/cm²NB-UVB单独作用时,均可抑制角质形成细胞的增殖和上调HB-EGFmRNA的表达,两者联合作用时,对角质形成细胞增殖的抑制和HB-EGFmRNA的诱导作用更强,分别为19.7%和8.6倍,之后依次为1μmol/L阿维A(14.4%,7.1倍)和100mJ/cm²NB-UVB(8.7%,2.5倍).结论 阿维A和/或NB-UVB处理后,可协同上调HB-EGF的表达,可能参与调节二者对角质形成细胞增殖的抑制作用.     

正常人角质形成细胞维A酸受体γmRNA在依曲替酸处理前后的改变

目的研究正常人角质形成细胞维甲酸受体(RAR)γmRNA在依曲替酸处理前后的改变。方法用0.1μmol/L和1.0μmol/L依曲替酸处理正常人角质形成细胞后12h,用RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR法检测维甲酸受体γmRNA表达的改变。结果正常人角质形成细胞可表达少量的维甲酸受体γmRNA;0.1μmol/L依曲替酸处理后,RARγmRNA的表达无明显增高,为正常对照组的1.8倍(P>0.05);1.0μmol/L依曲替酸处理后,RARγmRNA的表达明显增高,为正常对照组4.0倍(P<0.01)。结论低浓度依曲替酸(低于0.1μmol/L)对正常人角质形成细胞RARγmRNA的表达无明显影响,但较高浓度的伊曲替酸可明显诱导RARγmRNA的表达。     

缓激肽对人角质形成细胞增殖凋亡及分化影响的实验研究

目的观察缓激肽(BK)对体外培养的人角质形成细胞(HKC)增殖、凋亡和分化的影响并探讨其机制。方法以1×10-4~1×10-9mol/LBK作用于体外培养的HKC,采用噻唑蓝法、台盼蓝染色法观察到1×10-4mol/LBK抑制作用最强,以此浓度BK进行余下实验。当HKC达对数生长期后,一部分加入1×10-4mol/LBK作为实验组,另一部分不加BK作为对照组,分别培养24、48h后采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况及细胞周期,用链霉亲和素-生物素复合物(SABC)免疫细胞化学法检测HKC分化标志物角蛋白10(K10)及内披蛋白的表达情况。用含1×10-4mol/LBK的无血清培养基KC-SFM培养HKC作为实验组,对照组细胞仅加KC-SFM,分别用激光扫描共聚焦显微镜结合钙荧光探针Fluo-3/AM技术检测细胞内游离Ca2 浓度即[Ca2 ]i的变化。结果与对照组比较,实验组G0/G1期细胞比例相对上升34.57%,S期相对下降58.91%,其细胞早期凋亡率为15.34%,明显高于对照组(5.60%,P<0.05)。实验组HKCK10阳性细胞百分比为2.20%,明显低于对照组(6.89%,P<0.05)。BK作用3min后实验组HKC[Ca2 ]i较对照组上升163.0%,之后开始下降,5min后接近对照组。结论高浓度BK可抑制HKC周期进程、明显促进其凋亡及诱导[Ca2 ]i升高,这可能是其使HKC体外生长受抑的部分机制。BK还可抑制表皮再生和HKC分化。     

Cripto-1在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的 检测Cripto-1在正常子宫颈(normal cervical epithelium,NCE)、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、子宫颈浸润癌(invasive carcinoma of cervix,ICC)中的表达情况及其与疾病进展的关系.方法 采用Western Blot、RT-PCR和免疫组化SP法检测26例ICC、52例CIN和20例NCE中Cripto-1的表达差异,结合临床病理参数进行分析.用免疫组化法检测子宫颈癌Caski细胞诱导分化前后Cripto-1的表达差异.结果 Western Blot检测显示Cripto-1蛋白在ICC中平均表达水平(0.92±0.68)明显高于CIN(0.31±0.23)和NCE(0.09±0.06)(P<0.05),而其在CIN中表达也较NCE高(P<0.05).RT-PCR分析显示ICC中Cripto-1 mRNA平均表达水平(0.62±0.36)高于CIN(0.24±0.14)和NCE(0.10±0.09)(P<0.05),且CIN中Cripto-1 mRNA表达较NCE高(P<0.05).免疫组化结果显示ICC中Cripto-1蛋白阳性表达率为57.7%(15/26),较CIN(26.9%)和NCE(5%)明显增高(P<0.05),CIN中Cripto-1蛋白阳性表达率较NCE中升高(P<0.05);Cripto-1在子宫颈癌中的表达与患者年龄、组织学类型、病理分级、临床分期无关(P>0.05),与有无淋巴结转移有关(P<0.05).诱导分化治疗后Caski细胞中Cripto-1蛋白表达较对照组明显降低.结论 Cripto-1可能在子宫颈癌的发生、发展中起着重要的作用,充当癌基因的角色;检测Cripto-1的表达可作为子宫颈癌及其癌前病变诊断的一项辅助指标,可成为一个肿瘤治疗的靶向.     

CO2激光碳化尖锐湿疣残存HPVDNA活性的实验研究

对20例尖锐湿疣（CA）患者，局部皮损经CO2激光治疗后，碳末DNA进行PCR扩增，并与正常角质形成细胞（KC）培养，观察KC增殖情况，观察其是否具有活性。结果发现：碳末DNAPCR扩增，40％阳性，碳末DNA对KC有明显抑制作用。从而推断碳末DNA仍有活性，可能是引起该病复发的原因之一。     

HSV-tk/GCV系统对NIH3 T3细胞的体外杀伤作用研究

目的　研究HSV tk/GCV系统对NIH3T3细胞系的杀伤作用 ,为与成纤维细胞增殖有关的皮肤病基因治疗提供体外实验依据。方法　应用携带HSV tk基因的重组质粒pPNT tk通过磷酸钙转染传代培养的NIH3T3细胞 ,并经G418筛选 ,获得抗药性细胞集落 ,利用MTT法检测不同浓度GCV对NIH 3T3细胞的杀伤作用。结果　GCV对NIH3T3 /tk细胞有明显的细胞毒性作用 ,当GCV浓度为 10 .0 μmol/L时 ,NIN3T3 /tk细胞的生存抑制率已高达 95 %以上。而在同样药物浓度条件下 ,未转染的对照NIH 3T3细胞的生存抑制率为 11.9% ,与空白对照组相比较 ,差异无显著性。结论　HSV tk/GCV系统对NIH3T3细胞有很好的抑制作用 ,转染后细胞较之未转染细胞对前体药物更昔洛韦的敏感度显著增加 ,且呈剂量依赖性。     

辣椒素对培养的人角质形成细胞Fas/Fasl表达及凋亡的研究

目的：通过研究辣椒素（CAP）对培养的正常人角质形成细胞（KC）的作用前后Fas／Fasl的表达及其与凋亡的关系，进一步探讨其对银屑病的作用机制。方法：不同浓度的CAP作用于培养的正常人KC后，进行免疫细胞化学研究，观察其对KC增殖及KC Fas／Fasl蛋白表达的影响。结果：辣椒素对体外培养的KC的生长具有明显的抑制作用，并且促使KC凋亡；CAP作用KC后Fas／Fasl均有较强表达。结论：CAP抑制KC的过度生长，上调培养的正常人KC Fas／Fasl蛋白表达，并促进KC凋亡。