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1.
应用两轮荧光原位杂交进行人类植入前胚胎染色体嵌合型的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的应用2轮荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)对人类植入前胚胎染色体嵌合型的发生机制和影响因素进行初步研究。方法选择体外受精与胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transplantation,IVF-ET)治疗周期中不适于胚胎移植和冷冻的正常受精胚胎为研究对象,固定后进行2轮FISH,分析13、16、18、21、22、X、Y等7条染色体组成。结果51个胚胎中正常胚胎14个(27.5%),嵌合型16个(31.4%),无规律分裂12个(23.5%),异常非嵌合型9个(17.6%)。5~8细胞期胚胎中嵌合型胚胎的比例显著高于≤4细胞期胚胎(40.0%比12.5%)。非整倍体胚胎的比率在≥35岁组为57.1%,显著高于<35岁组(23.3%)。结论胚胎染色体嵌合型是植入前胚胎的常见现象,可能是影响IVF成功率的重要因素,而应用2轮FISH技术可有效地进行常见染色体异常的筛查。 相似文献
2.
用全染色体涂抹探针进行卵母细胞第一极体荧光原位杂交 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】建立用全染色体涂抹探针(WCP)对卵子第一极体进行荧光原位杂交(FISH)检测染色体的方法。【方法】收集单精子卵胞浆内注射(ICSI)中不成熟卵母细胞经体外培养成熟和常规试管婴儿(IVF)中未能成功受精的成熟卵母细胞,活检第一极体,固定后行13、14号染色体的全染色体涂抹探针荧光原位杂交。活检后,一部分卵母细胞固定行FISH以分析卵子自身的13、14号染色体,其余行ICSI受精,观察受精和卵裂情况。【结果】共获得成熟母细胞93个,成功活检85个,成功固定78个,共29个第一极体处于分裂中期,均有FISH结果。卵母细胞体外培养成熟后立即取极体进行固定,90.5%(19/21)的极体处于分裂中期,而取卵后30-48h和72h后活检的第一极体处于分裂中期的比例分别为27.3%(6/22)和11.4%(4/35),3组相比有统计学差异(P〈0.01)。11个卵母细胞同时获得了极体和相对应卵细胞的FISH结果,其中10个极体和相对应的卵细胞分别有1条13,14号染色体,剩余1个卵母细胞的极体有2条14号染色体和1条13号染色体,相对应的卵细胞仅有1条13号染色体,二者互补。活检后行ICSI受精的卵母细胞受精率为78.6%(11/14),优质胚胎率45.5%(5/11)。【结论】全染色体涂抹探针对卵子第一极体进行遗传分析可以有效、准确地推测相对应卵母细胞的染色体构成,从而应用于女性染色体易位患者的植入前遗传诊断。 相似文献
3.
【目的】研究不同的冷冻保存时长对人类卵裂期胚胎的组蛋白表观遗传修饰的影响。【方法】采用经患者知情同意捐献用于科研的慢速冷冻的卵裂期胚胎,根据冷冻时长分为6、9和12年组,以新鲜胚胎为对照组,每组6枚捐献胚胎。采用细胞免疫荧光技术观察去乙酰化酶HDAC1、组蛋白(H3K9ac、H3K4me3、H3K9me3)的表达量在各组胚胎中的差异,并以单细胞RT-qPCR技术检测去乙酰化酶HDAC1、甲基化酶(SUV39H1、SET?DB1)、去甲基化酶KDM5A对应mRNA的表达量。【结果】4组胚胎的去乙酰化酶HDAC1、组蛋白(H3K9ac、H3K4me3和H3K9me3)的蛋白表达量无统计学意义的差异(P>0.05)。同时去乙酰化酶HDAC1、甲基化酶SUV39H1对应mRNA的表达量也无统计学意义的差异(P>0.05)。随着胚胎冷冻时长的增加,甲基化酶SETDB1对应mRNA的表达量有递增趋势,然而差异无统计学意义(P>0.05)。去甲基化酶KDM5A对应的mRNA的表达量也随冷冻时长的增加而增强,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】慢速冷冻保存时长对卵裂期胚胎的组蛋白(H3K9ac、H3K4me3和H3K9me3)的蛋白表达量无显著影响,甲基化酶(SUV39H1、SETDB1)对应的mRNA表达量没有明显影响;但随着冷冻保存时长增加,胚胎去甲基化酶KDM5A对应的mRNA表达量增加,有可能导致胚胎转录抑制程度增强。 相似文献
4.
5.
[目的]探讨体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)术后的PCOS患者和输卵管性不孕患者受孕后的妊娠结局.[方法]选取2009年1月至2012年12月在中山大学附属第一医院生殖中心第一次行IVF的PCOS患者共104例,对照组为第一次行IVF的输卵管性不孕患者共1 658例.两组患者按年龄均分为<35岁组和≥35岁组.对4组患者的基本资料、IVF-ET周期的卵子和胚胎情况以及妊娠结局进行回顾性比较.[结果]PCOS患者IVF周期中的临床妊娠率、流产率、早产率、多胎率、大于胎龄儿、小于胎龄儿以及畸形率与同年龄组的对照组比较,差异没有统计学意义(P>0.05),但是< 35岁PCOS患者妊娠期糖尿病以及妊娠期高血压疾病的发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而在≥35岁PCOS患者该两种疾病的发生率与对照组相比,差异不具有统计学意义(P>0.05).[结论]<35岁PCOS患者行IVF-ET治疗后的妊娠期糖尿病、妊娠期高血压疾病的发生率增加,≥35岁PCOS患者的各种并发症发生率未升高. 相似文献
6.
未破裂卵泡黄素化综合征(luteinized unruptured follicle syndrome,LUFS)是无排卵性月经的一种特殊表型,也是导致不孕的原因之一.LUFS的发生机制尚不明确,可能的高危因素包括调控卵巢周期的激素水平或卵巢局部因子表达异常、盆腔局部机械因素以及患者的精神心理因素等.目前临床一般不对L... 相似文献
7.
8.
目的探讨卵母细胞受精后17d(D3胚胎移植后14d或D5胚胎移植后12d)血β-HCG值与早期妊娠结局的相关性。方法分析我院2012年1月至2015年1月通过IVF/ICSI/FET助孕方式成功受孕并按时返院复查的患者共523例,按照血β-HCG值分组,分析各组早孕期不同妊娠结局的发生率;用ROC曲线分析血β-HCG值预测早孕期各种妊娠结局的意义以及界值。结果随着卵母细胞受精后17d血β-HCG值增加,患者的生化妊娠率由60.0%降至0,多胎率由0增加至13.3%,胚胎停育率由55.6%下降至0,宫外孕率由22.2%下降至0;血β-HCG值预测生化/临床妊娠的界值为213.15U/L,ROC曲线下面积(AUC)为0.917,敏感度0.848,特异度0.906;预测单胎/胎妊娠的界值为986.65U/L,AUC为0.906,敏感度0.828,特异度0.713;预测双胎/三胎的界值为2 206.5U/L,AUC为0.611,敏感度0.333,特异度0.069;预测单胎停育/持续妊娠的界值为270.57U/L,AUC为0.631,敏感度0.889,特异度0.406。结论卵母细胞受精后17d血β-HCG值可以较好预测生化/临床妊娠以及单胎/多胎妊娠;而对于双胎/三胎、单胎停育/持续妊娠的预测价值不大。 相似文献
9.
10.
目的研究植入前遗传学诊断(PGD)中心接收外送标本进行诊断模式的可行性。方法回顾性对比分析外接标本与本中心同期地中海贫血PGD周期的诊断结果。结果外接标本与本中心的α地中海贫血和β地中海贫血患者的胚胎实验室指标无统计学差异(P0.05)。外接标本α地中海贫血患者的正常胚胎率、杂合子胚胎率、异常胚胎率、诊断失败率分别为27.92%、35.10%、36.98%、16.93%,本中心α地中海贫血患者的正常胚胎率、杂合子胚胎率、异常胚胎率、诊断失败率分别为27.10%、38.01%、34.89%、14.63%,两组间比较无显著性差异(P0.05);外接标本β地中海贫血患者的正常胚胎率、杂合子胚胎率、异常胚胎率、诊断失败率分别为30.48%、44.28%、25.24%、9.87%,本中心β地中海贫血患者的正常胚胎率、杂合子胚胎率、异常胚胎率、诊断失败率分别为25.71%、46.43%、27.86%、7.28%,两组间比较亦无显著性差异(P0.05)。结论外接标本经过当地生殖中心的处理,运输至我中心检测不会显著影响诊断结果,PGD诊断中心接收外送标本进行合作的模式是可行的。 相似文献