束缚应激对小鼠卵巢氧化损伤的实验研究

目的 探讨氧化应激标志物超氧化物歧酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)等在束缚应激小鼠卵巢中的活性。方法 以束缚为应激原建立心理应激动物模型,将40只6～8周龄小鼠按随机数字表法分成空白组、束缚1周组、束缚2周组、束缚3周组,测定各组卵巢脏器指数;用ELISA检测试剂盒检测卵巢中SOD活力、GSH-Px活力、MDA含量变化;用实时荧光定量聚合酶链式反应和免疫蛋白印迹法检测SOD蛋白在各组小鼠体内的表达。结果 各束缚组脏器指数低于空白组(P<0.05)。各束缚组的MDA水平高于空白组(P<0.01),且不同束缚组间比较差异有统计学意义(P<0.01);束缚应激2、3周组与空白组相比T-SOD活力降低(P<0.01),且相关分析表明T-SOD活力与MDA水平变化呈负相关(r=-0.883,P<0.01),随着束缚应激实验周数增加,T-SOD活力呈一定降低态势,MDA含量呈上升态势;各束缚组GSH-Px活力低于空白组(P<0.01),且不同束缚组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。束缚应激2、3周组卵巢中SOD1与SOD2蛋白含量被显著抑制(P<0.05)。结论 慢性束缚小鼠卵巢中MDA的含量升高,T-SOD和GSH-Px的活力下降。束缚应激可能是通过抑制SOD的表达导致卵巢出现氧化应激损伤。     

原始卵泡生长启动调控机制的研究进展

原始卵泡生长启动的调控机制至今尚未阐明,目前研究显示,原始卵泡的生长启动主要受卵泡内外产生的各种因子的调节,而可能不受卵泡刺激素(FSH)的直接调节;原始卵泡的细胞连接以及细胞间信号通讯对这一过程起着重要的调控作用。     

新生大鼠卵巢体外培养体系的研究

目的:探讨最适宜于大鼠原始卵泡体外生长发育的培养体系。方法:取出生2d的SD大鼠卵巢,分别在Waymouth和DMEM中培养8d,石蜡制片,HE染色,统计分析各级正常卵泡数;于培养d4、d8观察各级卵泡形态;并用免疫组化方法检测在这两种培养体系的卵巢中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达定位情况。结果:①在Waymouth中,由原始卵泡启动生长成为初级卵泡和次级卵泡的百分率分别是25.51%和6.93%,高于DMEM中的17.06%和3.56%(P<0.01)。②在Waymouth中培养的卵泡形态都较正常,而在DMEM中培养的异常卵泡较多。③PCNA作为原始卵泡生长的指标,也说明卵巢在Waymouth中能良好生长。结论:Waymouth培养体系是研究原始卵泡生长的一个理想的培养体系。     

卵泡发育中相关基因的调控

卵泡发育是一个受内分泌、旁分泌及基因调节的复杂的生理过程。基因通过表达产物反馈调节卵泡发育,但它们各自对卵泡发育的调节作用有所不同。FOXL2基因能促进卵泡的生长、发育及抗凋亡,AMH基因、GDF-9基因、INH基因与卵泡早期的生长和发育有关。原癌基因c-myc促进卵泡发育和黄体形成,c-mos基因在卵母细胞减数分裂中呈现特异作用,而bcl-2和bax分别参与了卵巢颗粒细胞的增殖和凋亡的调节。由于各基因调控的相互协调,才使卵泡得以正常生长、发育和成熟。     

心理应激与卵巢储备功能下降的相关性研究

探讨心理应激与卵巢储备功能下降的相关性。方法以束缚为应激原建立心理应激动物模型,将40只小鼠按随机数字表法分成对照组、应激1周组、应激2周组、应激4周组,在末次束缚应激24h后,眼眶取血分离血浆,以皮质醇放射免疫分析测定盒检测各组血清中的皮质醇含量;用ELISA法测定各组血清中的抗苗勒管激素(AMH)水平。结果 1)心理应激1周时小鼠皮质醇水平明显高于对照组(P<0.05);心理应激2周时皮质醇水平回落至对照组水平;至心理应激4周时,皮质醇水平回升,高于对照组(P<0.05),虽升高幅度无心理应激1周时大,但差异有统计学意义(P<0.05)。2)心理应激1周时小鼠AMH水平明显低于对照组(P<0.05);心理应激2周时AMH水平回升至对照组水平;至心理应激4周时,AMH水平有所下降,仍然低于对照组(P<0.05),虽下降幅度无心理应激1周时大,但差异有统计学意义(P<0.05)。3)相关分析表明:血清皮质醇的变化水平与血清AMH的变化水平呈明显的负相关关系(r=-0.990,P<0.01)。结论心理应激可以导致卵巢储备功能下降。     

大豆异黄酮对心理应激所致小鼠卵巢氧化损伤的保护作用

目的从抗氧化的角度探讨大豆异黄酮（SI）对心理应激导致的小鼠卵巢氧化损伤的保护作用。方法以束缚法建立动物的心理应激模型。将50只刚刚性成熟的健康雌性昆明小鼠,按随机数字表法分为5组：对照组、应激模型组、SI低剂量组（83 mg.kg-1）、SI中剂量组（167 mg.kg-1）和SI高剂量组（333 mg.kg-1）,每组10只小鼠。SI组应激的同时给与SI处理。SI组和应激模型组束缚持续30 d,束缚结束后,检测各组小鼠血清皮质醇含量,卵巢组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活...     

孕酮和表皮生长因子在体外培养新生大鼠卵巢原始卵泡生长启动中的作用

目的:探讨孕酮(P_4)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在原始卵泡生长启动中的作用。方法:取出生2d的SD大鼠卵巢,分别在含不同浓度P_4、EGF和P_4+EGF的Waymouth培养体系中培养,以单纯Waymouth培养体系培养的大鼠卵巢为对照,于培养8 d后石蜡包埋切片, HE染色,观察各级卵泡形态,并统计分析各级正常卵泡数。结果:P_4各浓度组的原始卵泡数明显多于对照组(P<0.01),50 ng/ml EGF组的初级卵泡和次级卵泡数明显多于对照组(P<0.01),但1 000 ng/ml EGF组的初级卵泡数和次级卵泡数均明显少于对照组(P<0.01);50 ng/ml EGF+10~(-5) mol/L P_4与相同剂量单独作用的P_4和EGF比较各级卵泡数有统计学差异(P<0.05),与对照组比较无明显差异(P<0.05)。结论:在Waymouth培养体系中孕酮对原始卵泡生长有抑制作用,一定浓度的EGF能促进原始卵泡生长,而同时加入P_4和EGF,两者的作用有部分抵消。