孕妇外周血中胎儿细胞及胎儿DNA的检测

目的　建立从孕妇外周血中分离有核红细胞 (NRBC)及DNA的可靠方法 ,并鉴定其来源。方法　对88例孕妇外周血分别通过密度梯度离心法 ,流式细胞术 (FCM )和荧光激活细胞分离技术 (FACS)分离NRBCs。应用套式PCR技术对 6 5例孕妇血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果　①NRBCs:2 7例样品经密度梯度离心 ,其中 14例分选到 1～ 10个NRBCs。FACS技术对 6 1例样品进行转铁蛋白受体阳性细胞 (CD71+ )分选 ,所有样品均有CD71+ 细胞 ,其浓度为 (0 35± 0 2 5 )× 10 -2 。②胎儿DNA :4 6例怀男胎孕妇血浆DNA中SRY基因检测出率为 6 5 2 2 % (30 / 4 6 ) ,怀女胎的 19例样品SRY基因未检出率为 94 74 % (18/ 19)。结论　从孕妇外周血中分选胎儿NRBCs和血浆中胎儿DNA的方法已取得较大进展。利用母血中胎儿细胞及DNA诊断遗传性疾病可望成为最佳非创伤性产前诊断技术     

孕妇外周血中胎儿细胞及DNA分离方法的比较

产前非创伤性诊断技术是国内外围生学关注的重要课题。近 10年来 ,由于相关分子生物学、流式细胞学技术的进展 ,人类对研究母亲外周血中胎儿细胞的工作迈进了一大步。但由于母血中胎儿细胞甚微 ,分离及纯化胎儿细胞的技术难点尚未解决 ,使该技术还无法在临床上广泛应用。本研究旨在探索可靠稳定的分离胎儿细胞和ＤＮＡ的方法 ,为产前诊断奠定基础。一、材料和方法1.材料来源 :(1)研究对象 :选择 1997年 10月至 1999年6月在武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科进行产前检查的健康孕妇 15 3例。年龄 2 1～ 35岁 ,孕 5～ 41周 ,血红…     

运用流式细胞术分析孕妇外周血中胎儿有核红细胞的比例与孕周的关系

目的 :探讨母亲外周血中胎儿有核红细胞 (NRBCs)的比例与孕周的关系。方法 :分离纯化孕 11～ 34周、2 1～ 35岁的 6 1例孕妇外周血中的胎儿细胞 ,采用荧光激活细胞分离技术 (FACS)分选表达转铁蛋白受体的阳性细胞 (CD71+ 细胞 )。将孕妇组、未孕组及新生儿脐血组进行对照。结果 :孕 11～ 34周孕妇外周血中CD71+ 细胞的比例为 (0 .35± 0 .2 5 )× 10 -2 ,与未孕组及新生儿脐血组差异均有高度显著性 (P <0 .0 1)。CD71+ 细胞在外周血中的比例在孕 17、18周达峰值 ,分别为 (0 .6 4± 0 .2 5 )× 10 -2 和 (0 .5 4± 0 .35 )×10 -2 。结论 :早、中、晚期孕妇外周血中存在胎儿有核红细胞。利用母血循环中的胎儿细胞进行产前诊断的最佳时间应在妊娠 17～ 18周     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞的富集方法的比较

目的 从孕妇外周务右分离胎儿有核红细胞（ＮＲＢＣＳ）,并对富集的方法进行比较,搪塞利用此法进行无创性前前诊断的可行性。方法 对５７例５－４０孕周的妇女外周血分别通过单密度梯度离心、免疫细胞化学检测、以及在此基础上流式细胞术分选第三种方法,富集ＮＲＢＣＳ。结果 密度梯度离心后的２７６例样本中,１４例以１－１０个ＮＲＢＣＳ,占５１．８５％。细胞化学检测到ＣＤ７１细胞。流式细胞仪分选出包含ＮＲＢＣＳ的Ｃ     

运用流式细胞技术分析孕妇外周血中胎儿有核红细胞的比例与孕周的关系

目的 :探讨母亲外周血中胎儿有核红细胞 (NRBCs)的比例与孕周的关系。方法 :对 6 1名孕龄为 11～ 34周、年龄为 2 1～ 35岁的妇女的外周血中的胎儿细胞进行分离纯化 ,采用荧光激活细胞分离技术 (FACS)分选表达转铁蛋白受体的阳性细胞 (CD71+细胞 )。将孕妇组、未孕组及新生儿脐血组进行对照。结果 :孕 11～ 34周的孕妇外周血中 CD71+细胞的比例为 (0 .35± 0 .2 5 )× 10 - 2 ,与未孕组及新生儿脐血组均有极显著性差异。CD71+细胞在外周血中的比例在孕 17～18周达峰值 ,分别为 (0 .6 4± 0 .2 5 )× 10 - 2和 (0 .5 4± 0 .35 )× 10 - 2。结论 :早、中、晚期孕妇外周血中存在胎儿有核红细胞。利用母血循环中的胎儿细胞进行产前诊断的最佳时间应在妊娠 17～ 18周     

康复新液配合波姆光治疗宫颈糜烂98例的临床疗效

目的　观察康复新液配合波姆光治疗宫颈糜烂的疗效。方法　常规波姆光治疗宫颈糜烂后 ,分别于术后即时和术后1、2、3、4周阴道填塞康复新棉球 ,观察宫颈创面愈合情况和不良反应。结果　康复新液配合波姆光治疗宫颈糜烂总有效率为92 % ,高于单纯波姆光治疗组的 83 33% ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,阴道排液及阴道出血明显减少。结论　康复新液配合波姆光治疗宫颈糜烂 ,简便易行 ,疗效可靠     

非侵入性产前诊断技术

非侵入性技术 ,主要包括分离母血中胎儿细胞 ,超声检查以及母血生化指标筛查等 ,对孕妇和胎儿无损伤 ,可重复取材 ,动态观察 ,近年来进展很快。现就这方面的研究作一简要介绍。1　孕妇外周血中的胎儿遗传物质1 1　孕妇外周血中的胎儿细胞1 1 1　胎儿细胞的类型　孕妇外周血中存在胎儿细胞 ,主要包括 :有核红细胞 ,淋巴细胞 ,滋养细胞 ,均能通过胎盘转移到母血循环中。胎儿淋巴细胞是首先在母血中检测到的胎儿细胞 ,但它的产生多在孕中期 ,不适于早期产前诊断 ;同时基于人类白细胞表面抗原 (ＨＬＡ)差异的分离要求了解配偶ＨＬＡ类型 ,并且配…