扑热息痛所致狗急性肝功能衰竭时血浆5-羟色胺变化及肝脏血流动力学改变的实验研究

目的;通过扑热息痛所致急性肝功能衰竭的动物模型,以期探讨门静脉,肝静脉,腹主动脉,下腔静脉血浆５－羟色胺浓度变化和肝脏血流动力学改变。方法：成年杂种狗１２只,在戊巴比妥钠静脉麻醉下,作上腹正中切口,从门静脉,肝静脉,腹主动脉,下腔静脉各采血２ｍｌ,作血浆５－羟色胺含量检测,作楔形肝组织活检,关腹。     

2003~2004年住院患儿贫血原因分析

目的:了解住院患儿贫血原因构成比,为儿科疾病防治提供依据。方法:全部病例为儿科住院病例,按病因、贫血程度等进行分析。结果:两年共计贫血患儿316例,轻度贫血占16.8%,中度贫血占38.9%,重度贫血占27.8%,极重度贫血占16.5%,以中度贫血最常见。贫血病因分析中,以急性白血病最常见(38.3%),溶血性贫血次之(11.1%),缺铁性贫血居第3位(9.2%)。结论:营养及感染等原因引起的贫血已不是目前住院患儿贫血的主要原因,而一些恶性疾病如急性白血病发生率有递增趋势。急性白血病发病相关因素的分析和防治可能成为未来儿童保健工作者的工作重心。     

多种细胞因子检测在儿童噬血细胞综合征诊断中的意义

目的检测噬血细胞综合征患儿多种细胞因子水平,观察和比较它们在HLH诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测18例HLH患儿、20例对照组儿童及7例一般感染患儿血清中8种细胞因子[干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-12、可溶性IL-2受体β(IL-2R-β)、可溶性IL-2受体α(sCD25)和sCD163],分析它们在HLH中的表达水平,以及与诊断的相关性。结果与对照组、非HLH感染组相比,HLH组中各细胞因子水平明显升高,3组之间差异有统计学意义(P0.05)。IL-12、sCD25和sCD163 3种细胞因子受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)均在0.9以上,诊断HLH的准确性高,尤其是sCD163和sCD25,AUC高达0.95。采用Pearson相关分析sCD163与sCD25的相关程度,二者呈高度正相关(r=0.970,P0.05)。IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β4种细胞因子AUC在0.7~0.9,IL-10的AUC小于0.7。结论 HLH患儿多种细胞因子水平高表达是导致一系列临床表现的重要因素。sCD163与sCD25有同等意义,是诊断HLH特异又敏感的标记。细胞因子IL-12的诊断价值亦高。此外,IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-2R-β有诊断参考意义;而IL-10的准确性较差,不宜作为独立的诊断指标。     

长春新碱通过下调SODD蛋白表达诱导白血病细胞凋亡新机制研究

 目的研究死亡结构域沉默子(silencer of death domains,SODD)、caspase3、caspase8及caspase9在长春新碱诱导Jurkat白血病细胞凋亡过程中的变化,探讨长春新碱诱导肿瘤细胞凋亡的新机制。方法采用Annexin V/PI双标记流式细胞术检测长春新碱(VCR)作用后Jurkat细胞凋亡发生率;采用免疫印迹法分析SODD、caspase3、caspase8及caspase9蛋白表达的变化;ELISA酶联免疫吸附技术检测VCR作用Jurkat细胞后TNF-α分泌的变化;采用RT-PCR检测VCR对细胞,TNFR1mRNA表达的调节。结果Jurkat白血病细胞SODD蛋白高表达且高表达的SODD蛋白抑制肿瘤细胞凋亡,VCR能特异下调SODD蛋白的表达,有效诱导Jurkat细胞凋亡,但并不影响细胞TNF-α的分泌及TNFR1的表达;VCR诱导细胞凋亡过程中caspase3、caspase8酶原呈时间依赖性逐渐被水解剪切,而caspase9在该凋亡过程中无明显变化趋势。结论VCR下调SODD蛋白表达并启动外源性凋亡途径caspases级联(caspase8、caspase3),最终诱导Jurkat细胞凋亡,且VCR下调SODD蛋白的表达无需激活TNF/TNFR1信号途径即可导致凋亡的发生。     

儿童白血病细胞DNA含量及细胞周期的临床分析

目的:探讨小儿急性白血病(AL)患者骨髓细胞周期分布与分型和治疗的关系。方法:应用图像分析系统测定96例小儿AL骨髓单个核细胞DNA含量和细胞周期。结果:不同类型的AL异倍体发生率不同,急性淋巴细胞白血病(ALL)异倍体率55.7%(44/79),明显高于急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的29.41%(5/17),T-ALL异倍体率(77.42%)明显高于B-ALL(41.67%),统计学差异均有显著意义。AL初诊病例和复发病例的G0/G1期细胞比例高于完全缓解组和对照组,G2M+S期比例低于完全缓解组和对照组(P<0.05),完全缓解组和对照组无显著差异。结论:图像分析系统对AL尤其是ALL异倍体的分析,有利于判断高危ALL,对细胞周期的测定给化疗个体化提供了具体的参考指标。     

Survivin及其变异体在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的探讨survivin及其变异体在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达及意义。方法用RT—PCR检测27例p虬患儿survivin、survivin-2B和survivin—△Ex3 mRNA的表达，用免疫组化法检测52例ALL患儿和40例同期住院非恶性血液病患儿survivin蛋白的表达。结果Survivin在ALL患儿的表达率为40．38％，比对照组高（P〈0．01）。27例ALL患儿中survivin、Stirvivin-2B、survivin—△Ex3 mRNA阳性率分别为51．85％、37．04％、25．93％，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。Survivin表达阳性者完全缓解（CR）率比survivin表达阴性者低（P〈0．05），且survivin—△Ex3阳性者CR率低，而survivin-2B阳性者CR率高。结论（1）Survivin及其变异体在ALL中的表达提示它们可能参与ALL的发生和发展。（2）Survivin和survivin—△Ex3可能抗凋亡，survivin-2B促凋亡。     

死亡结构域沉默子和p65在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及与化疗的关系

目的 探讨凋亡调控基因死亡结构域沉默子(SODD)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达、临床意义及与磷酸化-NF-κB-p65表达的相关性,研究ALL 2种常用化疗药物对SODD表达的影响,试图寻找化疗新靶点.方法 免疫组织化学SABC法检测25例儿童ALL骨髓细胞SODD、p65蛋白表达水平;长春新碱(VCR)处理Jurkat细胞后,Annexin-V-Fluorescence/PI双标记的流式细胞术检测细胞凋亡发生率,免疫印迹法检测SODD及p65在化疗药物作用下的表达变化.结果 25例ALL中,SODD和065表达的阳性率较健康对照组高,其中高危病例组SODD阳性表达率较标危病例组阳性表达率高,有显著性差异(Pa＜0.05),且骨髓细胞中SODD与p65表达呈正相关(r=0.69 P＜0.01);VCR能有效诱导Jurkat细胞凋亡,在该凋亡过程中,SODD及p65表达下调,并呈时间依赖性,但柔红霉素(DNR)不能有效下调SODD的表达.结论 SODD和p65均参与了ALL的发生发展,且存在一定的协同关系,SODD与ALL临床分型及预后有密切关系;VCR特异下调白血病细胞中SODD的表达及抑制NF-κB的活化,恢复白血病细胞的凋亡敏感性.     

Daxx和NF-κB在儿童急性白血病中的表达及其相关性

目的探讨Daxx在儿童急性白血病(AL)骨髓细胞中的表达及其与NF-κB的相关性，同时观察其与AL临床分型和预后的关系。 方法骨髓涂片取自华中科技大学同济医学院附属同济医院2005—2006年收治的AL患儿和骨髓正常的非恶性血液病患儿,应用免疫组织化学链霉素 亲和素-生物素-过氧化酶复合物(SABC)方法检测50例儿童AL骨髓细胞Daxx和NF-κB的表达，对照组为20例非恶性血液病且骨髓正常患儿。 结果在50例AL患儿中，Daxx和NF-κB蛋白阳性表达率分别为38.0%和56.0%，显著高于正常骨髓组织中的表达(P<0.05)；Daxx与NF-κB表达呈强 相关(P<0.05)；急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿高危组Daxx和NF-κB的表达率分别为55.6%和77.8%，标危组分别为0和16.7%，两组之间差异均有 显著性(P<0.05)。 结论Daxx、NF-κB在儿童AL中过度表达，在白血病细胞凋亡和增殖的调控过程中可能起协同作用，且与AL的某些临床特征、疗效和预后密切相 关。