重组人睾丸精子结合蛋白对人精子获能及膜功能的影响

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(testis sperm binding protein,TSBP)对人精子获能及膜功能的影响。方法:采集22例健康生育男性新鲜精液样本,精子经Percoll密度梯度离心法优化处理后与不同浓度的重组人睾丸精子结合蛋白分别孵育培养1h或3h,取培养后精子进行孕酮诱导顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。结果:0.1mg/mlTSBP处理组孕酮诱导精子顶体反应率及精子膜尾部低渗肿胀率均明显高于对照组(P<0.05);0.01mg/mlTSBP处理组各指标与对照组无显著差异。结论:重组人睾丸精子结合蛋白在体外可以促进人精子获能,对精子的膜功能具有保护作用。     

宽频噪音对AD模型大鼠NOS1表达及ABR阈值的影响

目的 观察衰老与阿尔采默病AD模型大鼠颞叶和颞叶在96dB宽频噪音暴露下NOS1表达及ABR阈值的影响。方法 采用Western Blot图像分析技术，结合ABR测定方法。结果 双侧海马CA1区微量注射谷氨酸前，电击后24h有记忆为69．6％，损伤后仅为14．7％，两差别有非常显性（P＜0．01）。3组大鼠加量口音自身前后ABR阈值都有显性差异（P＜0．01）。谷氨酸组在加噪音前ABR阈值与对照组有差异（P＜0．05）。谷氨酸组大鼠颞叶、颞叶NOS1表达多于加噪音后的同组鼠，有较明显的下降趋势。结论 宽频噪音抑制AD模型大鼠颞叶、颞叶NOS1表达。     

14-3-3蛋白在小鼠受精卵及2-细胞期胚胎中的表达与定位

目的:研究小鼠受精卵及2-细胞期胚胎中14-3-3蛋白的表达及亚细胞定位。方法:采用Western blot方法鉴定小鼠受精卵和2-细胞期胚胎14-3-3蛋白的表达,利用间接免疫荧光技术观察其在细胞中的定位。结果:在小鼠受精卵和2-细胞期胚胎中,全部表达14-3-3蛋白,并且为同一亚型;14-3-3蛋白主要定位于受精卵的细胞质及2-细胞期胚胎中的细胞质和细胞核。结论:14-3-3蛋白正常表达于小鼠受精卵及2-细胞期胚胎中,其定位可能影响胚胎的早期发育。     

庆大霉素中毒后豚鼠耳蜗毛细胞的再生

目的：通过庆大霉素中毒后不同时间豚鼠耳蜗毛细胞变化的观察，研究哺乳动物耳蜗毛细胞受损后能否再生。方法：将60只豚鼠随机分成庆大霉素组和生理盐水对照组。应用扫描电镜（SEM）技术并结合听脑干反应（ABR）测试，观察耳蜗毛细胞情况和ABR阀值变化。结果：庆大霉素组耳蜗毛细胞在30 d时ABR阈值有明显恢复，但未达到正常水平，同时耳蜗第三转有新生的静纤毛出现。结论：庆大霉素损伤后的毛细胞可以再生。     

小鼠cdc25B蛋白特定序列的克隆及原核表达

目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白。方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导后进行融合蛋白表达。Western blot鉴定表达产物。结果:构建出带有GST标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中表达出相对分子质量(Mr)为40000的重组蛋白质,经Westernblot鉴定,可与GST单克隆抗体结合,发生特异性反应。结论:利用原核表达系统成功表达出小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白质,为进一步探讨与其他蛋白相互作用提供了基础。     

丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮生成的影响

目的　研究丹参注射液对庆大霉素 (GM)耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮 (NO)生成的影响 ,探讨丹参注射液对GM耳蜗毒性的防护作用及其作用机制。方法　豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM +丹参组和丹参组 ,应用改良镀铜镉还原法测定豚鼠耳蜗组织中NO含量 ,同时结合听性脑干反应 (ABR)测试 ,观察用药前后听阈变化。结果　GM +丹参组豚鼠耳蜗NO含量和ABR阈值均明显低于GM组 (P <0 .0 1) ;且各组NO含量变化与ABR阈值高度相关 (r正常对照 =0 .96 5 ;rGM=0 .990 ;rGM +丹参 =0 .880 ;r丹参 =0 .980 ;P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　丹参注射液可通过抑制GM引起的NO过量生成 ,以减轻GM的耳毒性损伤 ,从而改善听功能。这可能也是丹参注射液拮抗GM耳蜗毒性的作用机制之一。     

川芎嗪对庆大霉素耳中毒耳蜗外毛细胞和血管纹的保护作用

目的：探讨在庆大霉素（gentamycin，GM）耳中毒情况下，川芎嗪（tetramethylpyrazine，TMP）对豚鼠耳蜗外毛细胞和血管纹边缘细胞的保护作用。方法：12只豚鼠随机分为GM组、联合用药组、TMP组及对照组，用药十天后处死，采用透射电镜观察耳蜗外毛细胞及血管纹边缘细胞超微结构，扫描电镜观察血管纹边缘细胞表面形态。结果：透射和扫描电镜显示，联合用药组外毛细胞及血管纹边缘细胞超微及表面结构破坏不均明显轻于庆大霉素组，特别是其中的线粒体结构破坏与数目减少更显著轻于庆大霉素组。结论：川芎嗪具有保护庆大霉素耳中毒耳蜗外毛细胞和血管纹结构的作用，从而拮抗庆大霉素耳毒性。     

14-3-3蛋白调节1-细胞期小鼠受精卵有丝分裂

 [摘要]目的：研究14-3-3蛋白在1-细胞期小鼠受精卵有丝分裂中的作用。方法：RT-PCR技术鉴定小鼠受精卵14-3-3蛋白亚型。采用显微注射方法将14-3-3siRNA注射入小鼠受精卵G1期,观察受精卵的卵裂率、形态学变化及MPF活性。结果：小鼠受精卵中的14-3-3蛋白亚型是14-3-3ε。小鼠受精卵注射pSUPER-14-3-3εsiRNA后,与对照组相比,卵裂率下降,有丝分裂延迟,有更多的受精卵发生形态异常,MPF活性最高值显著下降。结论：14-3-3蛋白在调节小鼠受精卵有丝分裂中发挥重要作用。     

川芎嗪拮抗庆大霉素耳毒性扫描电镜观察

目的研究川芎嗪注射液(四甲基吡嗪TMP)对庆大霉素(GM)耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞的影响,探讨TMP对GM耳毒性损伤的保护作用。方法选用健康白色红目豚鼠40只,体重200～250g,随机分为4组:GM组、TMP+GM组、TMP组、生理盐水组。应用听脑干反应(ABR)测试及扫描电镜技术。结果TMP+GM组耳蜗ABR阈值明显低于GM组(P<0.01),而且毛细胞倒伏、缺失或残缺不全等现象明显少于GM组。结论TMP可拮抗GM的耳毒性,从而改善听功能。