硫化氢对体外大鼠肝星状细胞内Ca2+浓度变化及细胞增殖的影响

目的 研究硫化氢(H₂ S)对大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6) Ca²⁺浓度、细胞增殖的影响及其机制。 方法 活化HSC-T6用含10%小牛血清DMEM培养液制备为1×10⁵个肝星状细胞(HSC)悬液。钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后，在不同刺激条件下，利用激光扫描共焦显微镜动态扫描HSC-T6细胞内Ca²⁺荧光强度（FI）变化，FI表示细胞内Ca²⁺浓度。四唑盐比色法，观察不同浓度H₂S供体——NaSH对HSC-T6细胞增殖的影响。 结果 低浓度H₂S（100μmol/L）明显降低HSC-T6细胞内Ca²⁺浓度（P<0.05)，而细胞增殖增加（增殖率为116%）；K_ATP通道阻断剂——格列本脲可阻断H2S的作用。高浓度H₂S（1mmol/L）刺激HSC-T6细胞内Ca₂₊浓度增加，但细胞增殖无明显变化(P＞0.05)。 结论 低浓度H₂S通过激活HSC-T6细胞K_ATP通道降低细胞内Ca²⁺浓度，可能通过调节细胞氧化应激促进细胞增殖；高浓度H2S刺激HSC-T6细胞内Ca₂₊浓度增加。提示H₂S在肝硬化门脉高压症的发生机制中具有双重作用。     

HPLC测定阿司达莫缓释片的含量

目的 建立测定阿司达莫缓释片含量的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(52:48),检测波长275 nm,柱温35℃,流速1.0 ml·min-1,以内标法计算阿司达莫缓释片的含量.结果 阿司匹林的线性范围为6～16μg·ml-1(r=0.9999),低、中、高3种浓度的平均回收率分别为101.4%±1.1%、97.1%±1.3%、94.2%±1.5%(n=3);双嘧达莫的线性范围为20～120 μg·ml-1(r=0.9998),低、中、高3种浓度的平均回收率分别为98.6%±2.3%、99.0%±1.6%、101.4%±2.3%(n=3).结论 所建方法简便、准确、专属性强,可用于阿司达莫缓释片的质量控制.     

克拉霉素缓释胶囊人体相对生物利用度研究

 目的建立人血浆中克拉霉素浓度测定的LC-MS/MS方法,研究克拉霉素缓释胶囊与市售克拉霉素缓释片的药动学及人体相对生物利用度。方法以罗红霉素为内标,用乙醚-二氯甲烷(3∶2)提取处理,以甲醇-水-甲酸(80∶20∶0.05)为流动相,用C18柱分离,采用ESI源,正离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM)。结果克拉霉素线性范围为10.0～4000μg·L^-1,日内、日间RSD均小于15%。应用此方法研究18名健康受试者口服0.5g受试制剂和参比制剂的药动学参数。单剂量口服受试制剂和参比制剂的t_max,ρ_max,t_1/2,AUC_0-t,AUC_0-∞,CL和Vd分别为:(5.36±1.14)和(5.25±0.88)h,(1218±433)和(1333±370)μg·L^-1,(4.59±1.67)和(4.24±2.10)h,(8239±1553)和(8467±1364)μg·h·L^-1,(8662±1829)和(8795±1331)μg·h·L^-1,(60.9±15.1)和(58.9±11.3)L·h^-1和(382±103)和(366±224)L。多剂量口服受试制剂和参比制剂的t_max,ρ_ssmax,ρ_ssmin,ρ_av,AUC_ss和DF分别为:(5.31±1.11)和(5.28±0.96)h,(1387±396)和(1488±401)μg·L^-1,(64.6±26.8)和(70.1±30.0)μg·L^-1,(399±99.2)和(410±107)μg·L^-1,(9585±2382)和(9830±2578)μg·h·L^-1,(3.32±0.62)和(3.49±0.66)。单剂量和多剂量相对生物利用度分别为(98.2±16.3)%和(99.5±19.0)%。结论本法快速、准确、专属、灵敏。统计结果表明,两制剂人体内相对生物利用度无显著性差异(P>0.05)。     

BALB/c裸小鼠人宫颈癌模型的建立

目的采用在裸鼠腹部皮下移植人原代宫颈癌组织的方法,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并初步探讨此动物模型腹部肿瘤的生物学特性。方法将人宫颈癌组织接种于裸鼠腹部皮下建立人宫颈癌裸鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长情况。80d后处死裸鼠,取肿瘤块做病理切片;用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测肿瘤组织、外周血和肝、脾等脏器HPV DNA表达情况。结果接种后第42天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均表面积为(50.0±5.1)mm2,肿瘤移植平均成功率为90.5%。移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查结果示所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16型阳性。而外周血与肝、脾等脏器HPV DNA呈阴性。结论本研究所建立裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,操作简便,可保持人宫颈癌生物学特性,为进一步研究宫颈癌的发病机制提供了重要的科研工具。     

扬彼此互动之长,弃缺乏沟通之短——从显微互动教室开放使用看形态学实验教学

随着以计算机、网络技术为代表的信息技术的不断发展,显微镜与这些技术的有机结合,使得形态学实验教学迈上了一个新高度,全新的软硬件平台让形态学实验教学充满了现代感与时代气息,但教学中仍存在一些"传统"的问题应给予重视。     

康复新液治疗小儿手足口病临床应用疗效分析

观察使用康复新液治疗小儿手足口病的治疗效果.方法 观察小儿手足口病患儿120例,年龄8个月-11岁,其中男68例,女52例,随机分为两组,各60例,两组性别、年龄、病情、症状、病程均无显著性差异,(P>0.05)具有可比性,治疗组应用康复新液在皮疹及口腔粘膜破溃处外擦治疗与对照组60例疗效比较.结果 治疗组3天治愈率82.3%,5天治愈率93.3%,对照组3天治愈率71.1%,5天治愈率82.1%,结果显示有显著性差异(P<0.05).结论 应用康复新液治疗小儿手足口病缩短病程,加快溃疡愈合,有明显疗效.     

改良术式治疗良性甲状腺结节的临床应用

[目的]探讨改良术式在良性甲状腺结节手术切除中的临床应用.[方法]对我院2006年1月～2008年1月63例良性甲状腺结节患者实行改良术式切除切除结节,行甲状腺侧叶加峡部切除14例,侧叶次全加峡部切除6例,双侧次全切除42例.[结果]本组病例术中无输血,术后无积血、积液,脂肪液化等并发症发生,伤口全部甲级愈合,均于术后2～5 d出院.随访1年以上伤口不明显,不易被发现,随访期间未出现喉上、喉返神经损伤,甲状腺及甲状旁腺功能的减低等并发症,随访无复发.[结论]改良式甲状腺次全切除术方法简单、损伤小、并发症少,采用改良术式是甲状腺良性结节手术时较好的选择.     

痰热清注射液治疗支气管肺炎临床观察

目的观察痰热清注射液辅助治疗支气管肺炎的治疗效果及安全性。方法选择河南省许昌市人民医院收治的小儿肺炎180例,随机分成两组,对照组常规治疗,观察组在对照组基础上使用痰热清注射液辅助治疗,观察两组疗效。结果两组退热时间及咳、痰、喘、肺部啰音和阴影消失所需时间比较,均有显著性差异,治疗组明显短于对照组(P<0.01),治疗组治愈率98.1%,对照组治愈率72.5%,(P<0.05)。结果显示有显著性差异,观察组的临床疗效明显优于对照组,且未见明显不良反应。结论痰热清注射液治疗支气管肺炎能缩短疗程,可明显减轻病情,有明显疗效,值得临床推广。     

HBV变异患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞变化及其临床意义

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)变异患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg细胞)及肝组织CD8 T细胞的关系,并探讨其临床意义。方法慢性乙型肝炎患者64例。HBV变异者27例,无变异者37例;急性乙型肝炎患者16例。各组间年龄、性别无明显差异。25例患者进行肝脏穿刺活检,免疫组化方法检测肝组织CD8 T细胞分布;流式细胞技术测定外周血Treg细胞变化;荧光定量PCR测定血清HBVDNA水平,PCR-RFLP测定前C区G1896A、P区YMDD变异。结果急性乙型肝炎患者、HBV变异伴肝病进展患者外周血Treg细胞比例明显低于HBV变异肝病无明显变化者(3.00±1.33,2.57±0.83vs4.32±0.96,P<0.01),后者与HBV无变异者没有明显差异(4.32±0.96vs4.77±2.11,P>0.05)。外周血Treg细胞与HBVDNA水平呈正相关(r=0.411,P<0.01);免疫组化显示HBV变异伴肝病进展患者肝组织CD8 T明显增多,急性乙型肝炎患者肝组织汇管区较多CD8 T浸润。结论Treg比例降低与HBV变异肝病进展可能有关,可作为HBV变异后临床转归的预测指标。初步显示,肝组织CD8 T浸润与外周血Treg细胞呈负相关,提示HBV变异后肝脏病进展的免疫损伤机制。     

复方牛胎肝提取物减轻非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏脂肪变性及炎症程度

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(NASH)和肝硬化,NASH是NAFLD进展的关键过程;目前尚无满意治疗药物[1].复方牛胎肝提取物主要成分为胰岛素样生长因子([GF)-I、肝细胞生长因子(HGF)等.