NR4A1通过IκBα/NF-κB通路调控过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的机制

目的 探讨过氧化氢(H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)氧化应激中孤核受体NR4A1表达变化,以及其对细胞凋亡的影响及机制。方法 使用不同浓度及时间梯度H₂O₂处理HUVECs,采用CCK-8法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blotting法检测Bcl-2、Bax与NR4A1蛋白表达;采用siRNA转染建立敲低NR4A1与对照的HUVECs,分为si-NC组及si-NR4A1组,H₂O₂处理后检测各组细胞抑凋亡蛋白Bcl-2、凋亡蛋白Bax表达,TUNEL法检测细胞凋亡;采用慢病毒感染建立稳定过表达NR4A1与对照的HUVECs,并进行H₂O₂处理,分为空载对照组(NC组)、过表达组(OV组)、NC+H₂O₂组及OV+H₂O     

基于孕妇外周血游离DNA的胎儿RhD血型产前筛查策略可行性研究

目的对RhD阴性血型孕妇进行基因分型, 探索适合本地区RhD阴性血型孕妇的胎儿RhD血型产前筛查方法。方法本研究为前瞻性研究。纳入2021年3月至11月在南京大学医学院附属鼓楼医院就诊的孕周≥12周的单胎妊娠RhD阴性血型孕妇33例。在行RHD基因分型的基础上, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测RHD基因外显子5和10, 对RHD完全缺失型及RHD-CE(2-9)-D型孕妇外周血游离DNA进行胎儿RhD血型产前筛查;利用高通量测序技术检测1号染色体上25648453位点, 对RHD 1227A突变型孕妇外周血游离DNA行胎儿RhD血型产前筛查。同时经新生儿脐带血验证产前筛查结果, 采用描述性统计分析。结果 33例RhD阴性血型孕妇中, 20例(60.6%)为RHD完全缺失纯合型, 5例(15.2%)为RHD-CE(2-9)-D/RHD完全缺失杂合型, 7例(21.2%)为RHD 1227A/RHD完全缺失杂合型, 1例RHD711delC/RHD完全缺失杂合型。25例RHD完全缺失纯合型或RHD-CE(2-9)-D/RHD...     

NR4A1对毒胡萝卜素诱导C2C12肌管细胞糖代谢功能障碍的影响

目的 探讨NR4A1对毒胡萝卜素(TG)诱导小鼠C2C12肌管细胞糖代谢功能障碍的影响及机制。方法 体外诱导C2C12细胞分化为成熟肌管细胞,将加入20 nmol/L胰岛素刺激10 min的细胞标记为胰岛素组,未做特殊处理的细胞标记为对照组,采用Western blotting法检测磷酯酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、NR4A1蛋白水平。采用CCK8法检测TG浓度梯度处理的C2C12肌管细胞活力,建立糖代谢损伤细胞模型。将C2C12肌管细胞分为对照组、无水乙醇(EtOH)组、TG组,分别处理后加入胰岛素刺激,采用葡萄糖试剂盒检测葡萄糖消耗水平,采用Western blotting法检测NR4A1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达。采用慢病毒感染并筛选,获得对照与稳定过表达NR4A1的C2C12肌管细胞,并进行TG处理,分为Ad-NC组、Ad-NC+EtOH组、Ad-NC+TG组和Ad-NR4A1+TG组。分化成熟后加入胰岛素刺激,检测葡萄糖消耗水平,检测NR4A1、p-PI3K、p-AKT的表达。结果 与对照组相比,胰岛素组C2C12肌管细胞PI3K/AKT通...     

自然流产患者1 065例的遗传学病因及其相关因素的分析

目的探讨1 065例自然流产患者的遗传学病因及其相关因素。方法选择2018年1月至2021年12月于南京鼓楼医院产前诊断中心就诊的1 065例自然流产患者为研究对象。采集患者的绒毛组织或胎儿皮肤组织, 用染色体微阵列分析(CMA)对其基因组DNA进行检测。选取10对CMA检测未见异常的非体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠、既往无活产分娩史且无子宫结构畸形的早期复发性流产夫妇, 采集其外周静脉血样, 进行家系全外显子组测序(trio-WES), 并通过Sanger测序对结果进行验证, 并对候选变异进行生物信息学分析。采用多因素非条件Logistic回归分析法, 对可能影响流产组织中染色体异常的因素进行分析, 包括夫妇双方的年龄、既往自然流产的次数、是否进行IVF-ET以及有无活产分娩史等。不同流产次数的低龄和高龄患者早期流产组织染色体非整倍体发生率的比较采用线性趋势χ2检验。结果在1 065份自然流产组织中, CMA共检出染色体异常570例(53.5%), 其中染色体非整倍体489例(45.9%), 致病/可疑致病拷贝数变异(CNVs)36例(3.4%)。在10对夫妇中, trio-...