p62基因对黑素瘤A375细胞生物学特性的影响

目的研究p62基因在黑素瘤A375细胞生长增殖及细胞周期调控等方面的作用。方法取对数生长期的A375细胞,用干扰p62基因表达的siRNA慢病毒载体转染细胞;MTT法检测转染及正常A375细胞的平均OD值;流式细胞术检测两组的细胞周期分布。结果转染组的平均OD值较正常组小(P0.05);转染组的G0/G1期比例(0.73±0.01)较正常组(0.64±0.02)高(P=0.002);转染组的凋亡率(0.10±0.02)较正常组(0.03±0.01)高(P=0.004)。结论干扰p62表达后,细胞周期阻滞于G0/G1期,p62在维持细胞周期和肿瘤细胞凋亡中起着重要的作用。     

采用慢病毒载体干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞稳转株的构建及意义

目的：采用干扰乙醛脱氢酶1（ALDH-1）表达的慢病毒载体转染宫颈癌Hela细胞,构建干扰ALDH-1表达的稳转株,以利进一步探讨干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞株的生物学特性.方法：体外培养宫颈癌Hela细胞,加入梯度浓度的嘌呤霉素溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度;取24孔板中对数生长的宫颈癌Hela细胞,吸弃旧培养液,加入400 μL新培养基,分别加入4种干扰慢病毒液（ALDH-1、ALDH1-1719、ALDH1-740、ALDH1-921,其中有一种具最佳干扰效果）及1种阴性对照慢病毒液（LV3-NC）,同时均加入Polybrene液.其中5种慢病毒液的加入量均为50 μL（滴度均为1×108 TU/mL）,Polybrene的加入量为0.5 μL（浓度为5 mg/L）;24 h后换新鲜培养液,72 h后荧光显微镜下观察荧光表达情况.然后采用最佳筛选浓度的嘌呤霉素溶液进行筛选,以获得稳定转染的干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞株.结果：确定嘌呤霉素的最佳筛选浓度为0.9 mg/L;5种慢病毒载体均成功转染入宫颈癌Hela细胞中,经嘌呤霉素筛选2周后成功获得稳定转染细胞株.结论：干扰ALDH-1表达的宫颈癌Hela细胞稳转株成功构建.     

干扰ALDH1A1表达的shRNA载体成功转染宫颈癌HeLa细胞及意义

目的：采用shRNA转染构建干扰乙醛脱氢酶-1（ALDH1A1）表达的宫颈癌HeLa细胞,以进一步探讨ALDH1A1与宫颈癌细胞的生物学特性之间的关系。方法：体外培养宫颈癌HeLa细胞,加入梯度浓度G418溶液进行筛选,确定最佳筛选浓度;取对数生长期细胞,采用Lipofectamine 2000脂质体将4种干扰重组质粒（ALDH1A1-1719、ALDH1A1-574、ALDH1A1-740、ALDH1A1-921,其中有一种具最佳干扰效果）及1种阴性对照质粒（shNC）转染宫颈癌HeLa细胞。5种重组质粒与Lipofectamine 2000脂质体的比例均为0.2 μg：1 μL,空白对照组中仅加入Lipofectamine 2000脂质体。6 h后换液,24 h后荧光显微镜下观察荧光表达情况。结果：确定G418的最佳筛选浓度为400 mg/L;5种重组质粒均成功转染入HeLa细胞中。其中ALDH1A1-1719的转染效率为4.67%;ALDH1A1-574的转染效率为1.16%;ALDH1A1-740的转染效率为12.45%;ALDH1A1-921的转染效率为3.42%;shNC组的转染效率为1.02%。结论：干扰ALDH1A1表达的shRNA载体转染宫颈腺癌HeLa细胞成功可行且效果好。     

子宫颈癌腹主动脉旁淋巴结阳性及其临床意义

子宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,而淋巴道转移是宫颈癌的主要转移途径.传统的手术方式是广泛性子宫切除加上盆腔淋巴结清扫.但子宫颈癌不但有盆腔淋巴结播散的倾向,而且有腹主动脉旁淋巴结播散的倾向[1～3],有必要同时切除腹主动脉旁淋巴结.     

Piver Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型子宫切除术后经阴道引流的可行性研究

目的比较PiverⅠ、Ⅱ、Ⅲ型子宫切除术(有的加一侧或双侧附件切除术)后经阴道引流与经腹壁引流的效果与并发症,探讨子宫切除术后经阴道引流的可行性。方法对2002年至2013年收治的共420例行广泛或筋膜外子宫切除术(有的加一侧或双侧附件切除术)患者随机采用经阴道引流(研究组)或经腹壁引流(对照组),比较研究组与对照组的手术时间、术后发热率、引流口愈合、淋巴囊肿发生情况及白细胞数和中性粒细胞比例等指标。结果Ⅱ/Ⅲ型子宫切除术研究组较对照组平均手术时间短,总引流量多,差异均有统计学意义(P均<0.05);研究组术后发热率较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅱ/Ⅲ型子宫切除术后淋巴囊肿发生率较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组术后2 d白细胞数及中性粒细胞比例偏高均较对照组低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论经阴道硅胶T型引流管较经腹壁引流可以缩短手术时间,可以充分引流出盆腔渗出液,减少术后感染、发热及淋巴囊肿的发生率,降低术后白细胞数及中性粒细胞比例。因而子宫切除术后经阴道引流是有效的、可行的,值得推广。     

改良Piver Ⅲ型子宫切除术的临床报告

目的 探索官颈癌Piver Ⅲ型子宫切除术的手术范围,改进其手术技巧,以降低术后泌尿道并发症,缩短手术时间,减少手术出血量、输血量.方法 2000年6月至2005年5月,196例Ⅰ b期及Ⅱ a期宫颈癌患者,按改良的Piver Ⅲ型子宫切除术进行手术,为研究组;1994年6月至1999年5月,176例Ⅰ b期及Ⅱ a期宫颈癌患者,按常规的Piver Ⅲ型子宫切除术进行手术,为对照组.手术范围及手术技巧的改良主要包括用电刀协助分离阴道膀胱间隙;用电刀切断宫骶韧带的1/2;分离、贯穿输尿管隧道,断扎宫颈膀胱韧带前叶,同时断扎子宫动脉,保留子宫动脉输尿管支;用S状拉钩将输尿管拉向外侧,扩张膀胱侧窝,暴露主韧带,切除主韧带的3/4,保留该韧带后部部分组织;断扎阴道旁组织2 cm;切断阴道2～3 cm.结果 研究组患者术后膀胱功能障碍发生率为23.0%(45/196),对照组为51.1%(90/176),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);研究组泌尿道感染率为8.2%(16/196),显著低于对照组[16.5%(29/176)],两组比较,差异有统计学意义(P=0.014).研究组的手术时间、术中出血量和人均输血量分别为(132±20)min、(322±100)ml、(154±79)ml,均较对照组减少,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).研究组与对照组患者的5年生存率分别为87.8%(172/196)及88.6%(156/176),两组比较,差异无统计学意义(P=0.793).结论 改良的Piver Ⅲ型子宫切除术手术范围及手术技巧的改进是有效的、可行的.     

Ⅰ型子宫切除术用于ⅠA期子宫颈癌的可行性研究

目的 比较子宫颈癌ⅠA期采用Ⅰ型和Ⅱ型子宫切除术的疗效及并发症,探索Ⅰ型子宫切除术用于ⅠA期子宫颈癌的可行性.方法 对92例子宫颈癌患者（48例ⅠA1期,44例ⅠA2期）行Ⅰ型子宫切除术加选择性盆腔淋巴结切除（研究组）,对93例子宫颈癌患者（49例ⅠA1期,44例ⅠA2期）行Ⅱ型子宫切除术加选择性盆腔淋巴结切除（对照组）.结果 研究组5年和10年生存率分别为100 ％（92/92）、100％（74/74）,对照组分别为100 ％（93/93）、100％（66/66）.研究组泌尿道感染率为0（0/92）,低于对照组的13.99％（13/93）（P＜0.05）.研究组的手术时间、出血量和人均输血量分别为（96.14±17.20）min、（117.35±39.61）ml和0 ml,均较对照组[（116.82±16.30）min、（201.74±46.25） ml、（82.07±16.32） ml]减少,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 子宫颈癌ⅠA期患者采用Ⅰ型和Ⅱ型子宫切除术的5年和10年生存率相当,但前者术后泌尿道感染率低于后者,且手术时间缩短,出血量和输血量均减少,其用于ⅠA期子宫颈癌是有效的、可行的.