PAX1甲基化检测在非典型鳞状细胞分流中的临床应用研究

目的 探讨配对盒基因1(PAX1)甲基化检测在子宫颈细胞学检查结果为不能明确意义的非典型鳞状细胞（ASCUS）患者中的分流意义及临床应用价值。方法 选择2019年8月至2021年7月在山东大学第二医院施行子宫颈薄层液基细胞学（TCT）检查和高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）筛查,其中TCT结果为ASCUS的患者。同时行PAX1甲基化检测并行阴道镜检查,根据阴道镜评估情况,决定是否取子宫颈活检,未取活检视为病变≤子宫颈上皮内瘤变1级（CIN1）。根据病理结果分为正常、CIN1、CIN2、CIN3+组。结果 ASCUS患者中,正常、CIN1、CIN2、CIN3+各组甲基化水平分别为19.91、20.90、19.24、9.47,CIN3+组与正常、CIN1组甲基化水平比较差异具有统计学意义（P<0.05）;当取甲基化水平值为13.625时,PAX1检测ASCUS患者CIN2+的敏感度和特异度分别为0.53、0.94;阴道镜检查评估ASCUS患者CIN2+的敏感度和特异度分别为0.65、0.90;甲基化联合阴道镜检查评估ASCUS患者CIN2+的敏感度和特异度分别为0.82、0.85。结...     

PAX1基因甲基化与宫颈高级别上皮内病变及高危型HPV分型的关联性

目的 分析397例患者中PAX1基因甲基化与宫颈高级别上皮内病变及高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型的关联性。 方法 2019年8月至2020年10月于山东大学第二医院行宫颈薄层液基细胞学检查(TCT)和HR-HPV DNA检查的女性中,选取TCT结果异常:≥意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)和/或HR-HPV阳性的患者397例;根据2020年阴道镜应用的中国专家共识,转诊阴道镜,阴道镜检查结果异常者行定点活检病理检查;RT-qPCR检测患者的PAX1甲基化程度。 结果 病理分级为宫颈上皮内瘤变3级和宫颈癌(CIN3+)(55例)与正常/宫颈炎(72例)、CIN1(36例)、CIN2(72例)患者比较,PAX1甲基化水平分别为18.64(4.01, 20.83)和20.22(19.24, 20.84)、20.33(19.65, 21.00)、20.43(15.31, 21.08),CIN3+患者PAX1甲基化程度高于正常/CIN1/CIN2的患者,差异有统计学意义(Z值分别为3.03、2.65、3.06;P值分别为0.002、0.008、0.002);HPV16阳性患者(89例)与12型高危型HPV(12HR-HPV)阳性的患者(174例)比较,PAX1甲基化水平分别为19.72(10.00, 20.91)和21.00(18.97, 21.02),前者PAX1甲基化程度高于后者,差异有统计学意义(Z=2.736,P=0.006);TCT诊断为ASCUS的患者, 病理分级CIN2+(23例)与正常/CIN1(19例)比较,PAX1甲基化水平分别为20.47(19.33, 21.18)和18.03(11.2, 20.82),前者PAX1甲基化程度高于后者,差异有统计学意义(Z=2.45, P=0.014)。 结论 PAX1甲基化程度与宫颈高级别上皮内病变及感染的HPV型别有关联,PAX1甲基化检测有助于早期识别CIN3+及ASCUS中的宫颈高级别病变,帮助ASCUS的分流、减少阴道镜的转诊率。     

β-雌二醇对宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的 探讨不同浓度β-雌二醇(E₂)对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及机制。方法 体外培养Hela细胞,根据E₂的浓度将其分为对照组、低浓度组、高浓度组。利用CCK8法和细胞克隆形成试验检测E₂对Hela细胞增殖的影响;流式细胞仪检测E₂对细胞凋亡和周期的影响;Transwell法检测E₂对细胞迁移能力的影响;在对照组和高浓度组中,利用实时定量PCR(qRT-PCR)检测HPV18 E6、E7、p21、p53、CDK2、Rb基因的表达,Western blotting检测p21、p53、CDK2、Rb、Rb磷酸化(pRb)蛋白的表达。结果 相比于对照组及低浓度组,高浓度组中细胞增长率降低(P<0.001),细胞克隆形成数量被抑制(P=0.013),细胞周期G0/G1期延长(P<0.001)。高浓度E₂可降低HPV18 E6/E7 mRNA表达水平(P=0.049,P=0.043),并下调CDK2、Rb mRNA和蛋白表达水平(P_CDK2...     

β-D-葡聚糖通过下调HPV16 E6和重新激活p53调节HPV16阳性宫颈癌细胞的生物学行为

目的:研究β-D-葡聚糖在宫颈癌细胞中的作用及可能机制。方法:CCK-8法检测β-D-葡聚糖对宫颈癌细胞CaSki、HeLa和SiHa细胞增殖的影响，伤口愈合试验检测细胞迁移情况，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中HPV16 E6/E7、HPV18 E6/E7、p53和p21 mRNA表达水平，Western blot检测N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、p53、波形蛋白、p21蛋白表达水平。以宫颈癌CaSki细胞为研究对象，在雌性BALB/c小鼠皮下注射成瘤，验证β-D-葡聚糖在体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:β-D-葡聚糖对不同宫颈癌细胞增殖的影响不同，对CaSki细胞增殖有显著的时间依赖性抑制作用，对HeLa细胞增殖无显著影响，对SiHa细胞作用72h后表现为促进增殖作用(P<0.05)。β-D-葡聚糖对CaSki、HeLa和SiHa细胞的迁移都有抑制作用(P<0.05)。β-D-葡聚糖对CaSki、SiHa的细胞周期有调节作用并能促进其凋亡(P<0.05),但对HeLa细胞无显著影响。与对照组相比，β-D...