中国江苏地区汉族人群肿瘤坏死因子β遗传多态性研究

目的　探讨中国江苏地区汉族人群肿瘤坏死因子 β遗传多态性分布。方法　收集江苏地区 16 8名无血缘关系健康个体的静脉血提取DNA ,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP) ,对TNFβ基因多态性进行分析。结果　TNFβ检测到三个等位基因 ,其基因型频率分别为TNFβ 1/ 1=2 1 4 % ,TNFβ 1/ 2 =4 7% ,TNFβ 2 / 2 =31 5 % ,基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。统计分析显示 :江苏地区汉族人群TNFβ等位基因频率分布与欧美白种人均有显著性差异(P <0 0 5 )。结论　TNFβ等位基因频率分布具有种族差异     

PCR-RFLP检测Apo CⅢ基因T-455C多态性的反应条件优化

目的：探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）反应体系中各种成分的优化,建立检测载脂蛋白CⅢ（ApoCⅢ）T-455C多态性的方法。方法：采用PCR—RFLP检测ApoCⅢ基因T-455C多态性,同时通过对参与反应体系的成分,在一定范围内设置不同的浓度或参数组,进行正交试验和单因素逐项试验,观测各成分在不同条件下对结果的影响。结果：ApoCⅢ基因检测到3种基因型。PCR反应体系中不同模板含量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg^2＋浓度、退火温度和酶切体系中PCR产物量、内切酶量、酶切时间等对反应结果均有不同程度的影响。结论：该研究建立的PCR—RFLP体系检测Apo CⅢ基因T-455C多态性技术,是一种高效快速、简单敏感、准确可靠的分析方法,适合常规实验室开展。     

两种方法测定血清白蛋白的临床应用评价

目的分析电泳法和溴甲酚绿法检测白蛋白及白蛋白/球蛋白比值的相关性。方法本院健康体检人员及相关疾病人员102例,采用Helena全自动电泳仪和日立7600-020全自动生化分析仪分别进行测定,得出总蛋白、白蛋白及A/G比值,对上述结果进行相关性分析。结果溴甲酚绿法与电泳法进行比较:健康组ALB及A/G相关系数r分别为0.98、0.97,(P>0.05);肝病组ALB及A/G相关系数r分别为0.90、0.91(P>0.05);肾病组ALB及A/G相关系数r分别为0.74、0.73(P<0.05);多发性骨髓瘤组ALB及A/G相关系数r分别为0.52、0.55(P<0.05)。结论对健康人和肝病患者两种方法检测白蛋白有相关性,电泳法依据物理性质分离蛋白质,结果更具客观性,在肾病和多发性骨髓瘤病人的测定结果更加稳定可靠。     

血清中HBsAg浓度差异在乙型肝炎标志物模式分析中价值

目的分析不同浓度HBsAg血清中乙型肝炎标志物表现模式,以揭示其在人群中的分布特征。方法采用ELISA法与微粒子酶免疫分析技术(microparticle enzyme immunoassay,MEIA)测定5987例非肝炎流行区住院及门诊患者血清中HBsAg及其表面抗体(抗HBs)、乙肝e抗原及e抗体(HBeAg、抗HBe)和乙肝病毒核心抗体(抗HBc);根据定值参比血清和样本HBsAg荧光速率值/阴性对照荧光速率值之比(S/N值),再结合中和确证试验结果来确定HBsAg浓度,同时分析乙肝病毒血清学标志物模式;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)再用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果:共检出HBsAg阳性784例,HBsAg浓度在5μg/L以上有636例,占HBsAg阳性81.1%;HBsAg浓度在2~5μg/L的有47例(5.99%);1~2μg/L的有69例(8.80%);1μg/L以下的有32例(4.08%)。尤其高浓度(HBsAg>5μg/L)和低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率分别为10.62%和0.53%;而中等浓度(1μg/L相似文献   

检验报告单在临床生物化学及临床生物化学检验实习教学中的应用

《临床生物化学及临床生物化学检验》是医学检验专业的专业课之一,是一门发展迅速的独立学科,并与基础医学和临床医学联系紧密。临床检验专业学生经过了《临床生物化学及临床生物化学检验》系统理论学习,掌握了一定的专业理论基础知识,进入临床实习阶段,是将纯粹的理论知识向临床过渡;使学生尽快将所学理论知识综合应用,学会分析解决问题以及提高独立思考、自行寻找问题答案的能力,是带教老师应着重解决的问题。近来,在实习教学中引入检验报告单分析,使学生理论联系实际,取得了一些效果。介绍如下。1对象与方法1.1教学对象来南通大学附属医…     

凋亡蛋白抑制因子livin基因siRNA表达载体的构建与转染

目的:构建3个针对凋亡蛋白抑制因子livin基因mRNA的小干扰RNA(siRNA)表达载体,然后转染HCT-8/V细胞。为研究livin基因沉默对HCT-8/V细胞耐长春新碱特性的影响奠定基础。方法:合成3对靶基因livin的siRNA寡核苷酸序列通过退火生成转录模板,与线性pGCsi-H1/Neo/GFP质粒连接,转化DH5α钙化菌抽提重组质粒,测序鉴定。用脂质体2000将重组质粒转染HCT-8/V细胞并用G418筛选。结果:转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计、合成的livin的siRNA转录模板序列一致;在荧光显微镜下观察到HCT-8/V细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)证实重组质粒已转染入细胞并用G418剔除了未转染质粒的细胞。结论:成功构建livin基因的siRNA表达载体,转染并筛选出转染了livin siRNA表达载体的HCT-8/V细胞。     

系统性红斑狼疮患者血清B淋巴细胞刺激因子的水平研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)蛋白水平,并探讨其与尿蛋白的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测尿蛋白阳性组(17例)和尿蛋白阴性SLE患者组(20例)血清Blys水平,以健康志愿者(30例)作为对照.结果 SLE患者血清Blys水平明显高于健康对照组(P＜0.05),但尿蛋白阳性组血清Blys水平与尿蛋白阴性组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SLE患者Blys水平升高,提示BLyS可能与SLE的发病有关.     

鸟苷酸环化酶C基因沉默对人胃癌裸鼠皮下种植瘤的影响

目的:探讨鸟苷酸环化酶C(GC-C)基因沉默对人胃癌裸鼠皮下种植瘤的影响及其机制.方法:将SGC-7901细胞(SGC-7901组)、空质粒转染的细胞(PRNA组)、GC-C基因稳定沉默的细胞(GC-C-shRNA组)悬液先在裸鼠皮下接种成瘤,再取瘤组织块分别接种到裸鼠皮下,建立3种胃癌裸鼠皮下种植瘤模型.观察裸鼠一般情况、肿瘤的成瘤率、生长速度,描绘肿瘤的生长曲线,计算肿瘤的抑瘤率;采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR),Western blot和免疫组织化学法检测GC-C和趋化因子受体4(CXCR4)在各组移植瘤组织中的表达.结果:与SGC-7901组和PRNA组比较,GC-C-shRNA组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢、体积明显变小(抑制率分别为33.7%、33.2%),肿瘤异型性、坏死程度明显降低,差异具有统计学意义(均P<0.05),且移植瘤组织中GC-C和CXCR4 mRNA和蛋白均明显下调(GC-CmRNA:7.47±1.70 vs 11.18±0.60,11.28±0.85;GC-C蛋白:0.52±0.15 vs 1.04±0.19,1.03±0.24;CXCR4蛋白:0.67±0.13 vs 1.02±0.21,1.03±0.23,均P<0.05).结论:GC-C基因稳定沉默在体内能保持稳定,且能抑制裸鼠移植瘤生长,该过程可能与CXCR4下调有关.     

抑癌基因PTEN与人类肿瘤的研究进展

PTEN基因是1997年第一个克隆得到的具有磷酸酶活性的抑癌基因，为肿瘤抑制基因家庭的新成员。它具有蛋白质酪氨酸磷酸酶催化区域，并与细胞骨架中的张力蛋白、辅助蛋白具有较高的同源性。其定位于人染色体杂合性缺失高发区10q23.3，在成人胶质细胞瘤、前列腺瘤等多种肿瘤，尤其是晚期恶性肿瘤中存在突变。就PTEN基因的结构、功能、突变与人类肿瘤的关系作一综述。     

免疫比浊法检测血清游离轻链的方法学评价

目的对Beckman Immage 800全自动特种蛋白分析仪检测血清游离κ、λ轻链(sFLC)进行方法学评价。方法通过Beckman Immage 800定量测定sFLC,探讨其精密度、正确度、分析测量范围、干扰和携带污染率,同时对其参考区间进行验证。结果κFLC低、高值批内精密度的变异系数(CV)分别为7.84%、2.95%,批间精密度的CV分别为7.38%、5.57%;λFLC低、高值批内精密度(CV)分别为4.59%、3.94%,批间精密度CV分别为3.97%、2.01%;测定κFLC、λFLC定值质控血清与靶值的偏倚小于5%;κFLC、λFLC分析测量范围分别为10.8~128.0 mg/L、10.1~121.0 mg/L时,a值在0.95~1.05,r2≥0.98;κFLC、λFLC携带污染率分别为0.411%、0.216%;干扰试验结果显示游离胆红素≤342.0μmol/L、结合胆红素≤342.0μmol/L、血红蛋白≤5g/L和乳糜≤2 400浊度时,对sFLC结果无明显影响;40例健康体检者中有1例κFLC测定结果超出厂家推荐的参考区间,40例λFLC检测值均在厂家推荐的参考区间内。结论 Beckman Immage 800全自动特种蛋白分析仪检测sFLC的主要分析性能符合质量目标的要求,能够为临床提供科学、准确的诊疗依据。