RNAi沉默Sp3基因对肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的:采用基因沉默和慢病毒转染技术,沉默人肝癌细胞HepG2中特异蛋白3(specificity protein 3,Sp3)的表达,观察沉默Sp3基因后的肝细胞的增殖能力变化.方法:采用Sp3-siRNA慢病毒转染人肝癌细胞HepG2,通过免疫印迹法和PCR技术检测Sp3的表达以验证转染效果,通过MTT检测细胞生长曲线和流式细胞技术测定细胞周期.结果:Western blot实验表明,实验组的Sp3表达量明显少于空白组和阴性对照组(0.37±0.08 vs 0.83±0.17,0.66±0.13,F=8.442,均P<0.05).RT-PCR也得到相同的结果(0.47±0.05 vs 0.74±0.08,0.70±0.16,F=7.322,均P<0.05).MTT实验结果显示,与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞在48、72和96h时的增殖明显受到抑制(0.28±0.18 vs 0.34±0.19,0.35±0.07,F=3.888;0.57±0.11 vs 0.84±0.05,0.74±0.08,F=12.721;0.72±18.1 vs 0.98±0.05,0.93±0.9,F=6.342,均P<0.05).流式细胞术结果显示实验组细胞主要分布在G1期.结论:RNAi沉默Sp3基因导致人肝癌HepG2细胞体外增殖能力下降.     

新医改背景下广西基层医院分子病理学发展策略探索

疾病分子病理学分型是精准诊疗的前提。广西多“老少边穷”地区,全区医疗卫生资源有限,医疗卫生服务水平存在较大提升空间,基层医院病理科发展尤为滞后,严重阻碍了广西精准诊疗发展,也为患者带来沉重的经济负担。本文通过统计分析广西壮族自治区分子病理学开展现状,总结我院现行促基层医院分子病理学发展模式的成果,指出新医改背景下,基于互联网+和医联体模式,线上线下并行、城乡双向互动,推进基层分子病理学发展,助力基层精准医疗服务能力提升。     

早期反应基因3在恶性肿瘤中的研究新进展

恶性肿瘤是危害人体健康的“杀手”之一,给来自世界各地的大量患者造成了沉重的负担[1]。最新数据显示,2018年全球肿瘤新增1810万例,其中死亡人数高达960万人[2]。而我国的肿瘤发患者数居全球第一,每天大约有一万多人被确诊肿瘤;同时,我国的肿瘤病死率远远高于全球平均水平,肿瘤已经发展成为全国居民死亡的主要原因之一[3]。随着时代的发展,恶性肿瘤发病率仍然呈现逐渐上升趋势,通过分析发现恶性肿瘤有以下特点:发病年轻化、发病区域分布近于相同、主要见于老年男性、城乡发病率差距逐渐缩小、治愈率低、病死率高等[4]。预计未来恶性肿瘤仍将持续上升发展,癌症患者的临床管理形势依然十分严峻。因此,加大恶性肿瘤的研究力度、聚焦其发生和进展的复杂机制研究尤其重要。     

转录因子S p3在肝细胞癌中的表达意义

目的：研究转录因子Sp3（Sp3）在肝细胞癌（HCC）发生、发展及预后中的作用。方法采用Western blot法和RT‐PCR法检测该院49例HCC组织及其癌旁肝组织中Sp3和β‐Catenin的表达情况,分析二者在 HCC和癌旁肝组织中的表达差异、二者的表达与 HCC临床病理特征的关系,以及Sp3与预后的关系。结果 Western blot和RT‐PCR法的结果均显示：（1）Sp3在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（2）β‐Catenin在HCC中的表达高于癌旁肝组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;（3）Sp3和β‐Catenin在HCC中的表达与肿瘤直径和分级相关;（4）Sp3和β‐Catenin在 HCC中的表达呈正相关（Western blot ：r＝0．681、P＝0．000;RT‐PCR：r＝0．641,P＝0．000）,均与肿瘤大小和分化程度有关;（5）Sp3高表达的病例预后较低表达的病例差（P＜0．05）。结论 Sp3在 HCC发生中起促进作用且与肿瘤恶性程度相关;Wnt通路可能是其参与 HCC发生、发展的途径。     

全肺灌洗技术治疗遗传性肺泡蛋白沉积症1例

1例主诉为咳嗽、活动耐力下降2个月余的3岁3月龄患儿（女）2020年12月就诊于广西医科大学第一附属医院儿科。经过肺部CT平扫、支气管镜下肺泡灌洗液检查、全外显子基因检测、血清粒细胞和巨噬细胞集落刺激因子水平及其信号传导的检测,诊断为遗传性肺泡蛋白沉积症。该疾病罕见且病情严重,在给予支气管镜联合支气管封堵器行全肺灌洗术...     

不同冻存液冻存慢病毒转染后稳转肝癌细胞株 HepG2的效果比较

目的筛选冻存慢病毒转染后稳转肝癌细胞株HepG2的最佳冻存液。方法采用甘油和二甲基亚砜(DMSO)2种不同冻存保护剂,以4种不同比例的冻存液分别冻存慢病毒转染后肝癌细胞HepG2及未转染的HepG2细胞,并对上述细胞复苏后的存活率及增殖能力进行比较分析。结果采用甘油为冻存保护剂时,冻存液[DMEM∶胎牛血清(FBS)∶甘油]比例为0∶9∶1的转染后细胞存活率最高(P=0.001);未转染细胞存活率与冻存液比例无关(P=0.293)。采用DMSO为冻存保护剂时,转染后细胞存活率为0%;未转染细胞存活率在60%及以上,且与冻存液比例无关(P=0.487)。冻存液中血清含量越高,复苏后细胞的增殖能力越强(P<0.05)。结论冻存慢病毒转染后的稳转肝癌细胞株HepG2的最佳冻存液为90%FBS+10%甘油。     

病理专业本科生免疫组化教学探索与体会

免疫组织化学技术广泛应用于临床病理诊断工作中,病理专业本科教学应常规开设免疫组化课程。本文结合我院实际情况,对病理专业本科生免疫组化课程教学方法进行探索。     

GPC3与肝癌细胞增殖的相关性

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织内及体外细胞培养中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)与细胞增殖的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测54例HCC组织中GPC3的表达,并对比其与Ki-67标记指数及各种临床病理参数的关系.使用shRNA抑制SMMC7721肝癌细胞系中GPC3的表达,MTT检测肝癌细胞的增殖变化.结果:在HCC组织中,GPC3与Ki-67指数有关(r=0.521,P=0.000),也与分化程度、血管浸润情况具有相关性(r=0.287,0.289;P=0.035,0.034).体外实验结果显示,抑制GPC3表达后,实验组细胞增殖活性明显低于阴性对照组和空白对照组(F=45.38,P=0.000).结论:GPC3在HCC的发生、发展和浸润过程中起重要作用,主要与影响肝癌细胞增殖有关.     

鼻咽非角化鳞状细胞癌组织内T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的观察T淋巴细胞亚群在鼻咽非角化鳞状细胞癌中的表达情况,探讨免疫细胞的变化在鼻咽癌发生发展中的意义。方法通过免疫组化SP法和免疫组化双染法检测CD3、CD4、CD8、CD4FoxP3和CD8FoxP3在101例鼻咽癌和21例鼻咽黏膜慢性炎中的表达。结果 CD3、CD4、CD8、CD4FoxP3、CD8FoxP3在鼻咽癌组与黏膜慢性炎组之间的表达差异均有统计学意义,P〈0.05。CD3^＋、CD4^＋FoxP3^＋、CD8^＋FoxP3^＋T细胞在分化型非角化鳞状细胞癌和未分化型鳞状细胞癌中的表达差异有统计学意义,P〈0.05。结论鼻咽非角化鳞状细胞癌中,T淋巴细胞亚群数量变化提示了机体免疫功能低下,为鼻咽癌的发生发展提供了良好的条件。不同分化程度的鼻咽癌肿瘤微环境内的免疫状态不同。