类风湿性关节炎临床治疗方案的研究进展

类风湿性关节炎(RA)是一种临床上常见的全身性自身免疫性疾病,患者临床表现主要为对称性、涉及多个关节、慢性的关节疾病和滑膜关节炎,其发病相关因素主要涉及遗传、滑膜中T细胞、B细胞及细胞因子等免疫细胞等,但具体机制现仍不完全明确。目前,RA的临床治疗效果尚不理想,主要的治疗方法为常规药物、中医中药、外科手术及新技术疗法等。     

FRMD8抑制肺癌细胞的增殖与迁移

目的 探讨FERM domain-containing protein 8（FRMD8）在肺癌发生发展中的作用。 方法 用Western blotting检测肺癌组织及相应癌旁正常组织中FRMD8的表达情况;敲低FRMD8后平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,MTT法检测细胞增殖情况;过表达FRMD8后流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测过表达FRMD8后某些细凋亡相关蛋白表达变化;过表达及敲低FRMD8后Transwell细胞迁移实验检测对A549细胞迁移能力的影响。 结果 1. 与正常组织相比,肺癌组织中FRMD8表达下调（P＜0.05）; 2. FRMD8敲低,细胞克隆形成能力及增殖速度提高; 3. FRMD8可诱导细胞凋亡,并影响细胞凋亡相关基因的表达或活化： FRMD8过表达可下调Caspase-3、8和bax表达,而p53、激活型Caspase-3、8以及bcl-2 的表达上调; 4. FRMD8过表达抑制细胞迁移能力（P＜0.01）,而敲低FRMD8则促进细胞迁移（P＜0.001）。 结论 FRMD8可抑制肺癌的发生发展,并具有肿瘤抑制子的功能。     

脂肪肝与血脂、血糖、肝功能等因素的Logistic分析

[目的]探讨离退休教职工脂肪肝与血脂、血糖及肝功能指标等因素的关系,为脂肪肝的防治提供依据。[方法]对379例离退休教职工进行脂肪肝诊断及血脂、血糖、肝功能指标检测,资料用二值非条件Logistic回归分析方法分析。[结果]经二值非条件Logistic回归分析,血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)较高可能是脂肪肝患病的独立危险因素;高密度脂蛋白(HDL-C)较低可能是脂肪肝患病的独立保护因素。[结论]离退休教职工脂肪肝患病率高,其发生与高血脂、高血糖、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)等指标变化相关,须重视防治脂肪肝。     

医学院校生物技术专业分子生物学教学的思考和体会

医学院校中生物技术专业与其他医学专业的培养目标有所不同，作为生物技术专业的必修课程，分子生物学的教学应适应专业特色和要求。总结了近几年生物技术专业分子生物学教学的经验，以期进一步提高教学质量，培养符合时代要求的生物技术专业人才。     

应用RNA干扰抑制目的基因在小鼠体内表达

目的研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用。方法以PCR方法从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi)。将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况。结果RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达。结论RNAi技术能抑制目的基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具。     

曲格列酮诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的观察过氧化物酶体增殖激活受体γ（PPAR-γ）的配体曲格列酮（troglitazone,TGZ）对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,SGC-7901细胞分为对照组和曲格列酮不同浓度（5、10、15、20μmol／L）加药组,应用流武细胞仪检测曲格列酮不同浓度对胃癌SGC-7901细胞凋亡率的影响;RT—PCR及Western blot方法观察PPARγ、p53的mRNA及蛋白表达变化。结果曲格列酮可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,凋亡率与浓度呈正相关;曲格列酮干预后,p53的mRNA及蛋白在胃癌SGC-7901细胞中表达上调,而PPARγ的mRNA及蛋白表达水平无明显改变。结论曲格列酮依赖激活PPARγ能在体外诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能是通过上调抑癌基因p53表达而实现,提示PPA即可能是胃癌治疗的一个新分子靶点。     

CT120反义寡核苷酸抑制肺腺癌细胞A549的生长

目的 探讨CT120基因与肺腺癌细胞A549生长、分化的关系。方法 构建含有CT120基因的反义表达载体（命名为pcDNA3.1-CT120）,并将该载体转染肺腺癌细胞A549,应用G418筛选,获得了稳定表达CT120反义基因的克隆（命名为pcDNA3.1-CT120-A549）。RT-PCR和Western blot 检测CT120表达。流式细胞仪和软琼脂集落形成实验分析细胞生长,同时用RT-PCR检测P53、CYCLIND1 和CDK4的表达。结果 成功构建了含有CT120基因的反义表达载体,而且该载体能够有效抑制CT120在肺腺癌细胞A549中的表达。抑制CT120基因的表达能够抑制细胞的生长,促进细胞凋亡。在稳定表达CT120反义基因的克隆中P53表达明显上调,CYCLIND1 和CDK4表达明显下调。结论 反义寡核苷酸抑制CT120的表达有可能是肺癌基因治疗的一个新的靶点。     

依据RF滴度及抗CCP抗体的变化评价早期联合治疗类风湿性关节炎的临床疗效

目的通过对病人随机分组对照的研究方法,对联合用药治疗RA的疗效进行观察和评价,探索治疗RA较为有效的方法,指导临床用药。方法选择滨州医学院附属医院2012年3月~2014年3月收治确诊为RA的患者80例,随机分为实验组和对照组,其中实验组41例,对照组39例。实验组同时应用2种慢作用抗风湿药及免疫抑制剂药物治疗,对照组每次服用1种慢作用抗风湿药及免疫抑制剂药物治疗,详细记录两组患者治疗及随访时的各项观察指标数据,然后将观察数据应用SAS统计软件进行统计学分析处理,将两组的ACR-20、X线改变、症状/体征、生存质量HAQ量表、RF及抗CCP抗体变化等资料进行统计学分析以评价两种治疗效果。结果发现治疗第12周时两组ACR-20的改善率相当,差异无统计学意义（P〉0.05）;但治疗第24周时两组ACR-20的改善出现了明显差异,分析显示实验组优于对照组,统计学分析两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。两组治疗后第12周、第24周两项观察指标数据（患者对疾病的治疗效果评价及医生对患者疾病治疗的评价）进行比较分析,结果显示实验组优于对照组,两组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。治疗后24周两组间生存质量HAQ分析的数据进行比较,结果同样显示实验组效果明显优于对照组,两组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论通过本研究,证明了对于RA的两种治疗方案均有效,实验组对于RF滴度及抗CCP抗体改变优于对照组,也为临床治疗RA的联合用药提供了参考。     

去甲斑蝥素致凋亡K562细胞中miRNA表达的变化

目的研究去甲斑蝥素(CA)致白血病细胞凋亡后miRNA表达谱的变化,寻找差异表达的miRNA。方法应用不同质量浓度的去甲CA处理K562细胞,四甲基偶氮唑盐法检测其细胞生长抑制率,筛选有效的药物质量浓度和作用时间;提取细胞内miRNA,微阵列杂交技术筛选药物作用后细胞内发生变化的miRNA;实时定量PCR技术验证微阵列杂交结果。结果 20 mg.L-1的去甲CA作用36 h为理想的药物浓度和作用时间;miRNA微阵列杂交筛选出表达升高的miRNA 160多种,降低的miRNA 120多种;实时定量PCR进一步分析发现miR-193B、miR-511、miR-212等的表达降低,而miR-769、miR-125A、miR-100等的表达显著升高。结论去甲CA可诱发白血病细胞凋亡,并引起细胞内多种miRNA的改变。