人博卡病毒VP2病毒样颗粒诱导特异性细胞免疫反应的研究

目的 探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测人博卡病毒(HBoV) VP2病毒样颗粒(VLPs)诱导特异性细胞免疫反应的最佳条件.方法 HBoV VP2 VLPs免疫小鼠后,用ELISPOT方法检测小鼠的特异性细胞免疫反应,观察不同多肽刺激、不同细胞培养时间、不同细胞浓度以及不同浓度特异性刺激多肽条件下ELISPOT结果.结果 多肽P3(GYIPIENEL)及P5(LYQMPFFLL)刺激HBoV1 VLPs免疫小鼠脾脏淋巴细胞产生斑点数分别为233个/10(6)和157个/10(6)细胞,P8(GYIPVIHEL)刺激HBoV2 VLPs免疫小鼠脾脏淋巴细胞产生斑点数为113个/10(6)细胞;培养时间以24 h为最佳,此时HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(ｒ)的比率分别为232个/10(6)和119个/10(6)细胞;小鼠脾脏淋巴细胞浓度以5×10(5)为最佳,此时HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(γ)的比率分别为232个/10(6)和108个/10(6)细胞;刺激物浓度10μg/ml为最佳,HBoV1与HBoV2实验组特异性分泌IFN-(γ)的比率分别为233个/10(6)和96个/10(6)细胞.结论 HBoV1与HBoV2特异性BABL/c小鼠T细胞表位多肽分别为HBoV1:P3;HBoV2:P8.检测人博卡病毒VP2病毒样颗粒诱导特异性细胞免疫反应ELISPOT方法最佳实验条件为:培养时间24 h,细胞浓度5×10(5)细胞/孔,刺激多肽终浓度10 μg/ml,可用于HBoV在小鼠上的细胞免疫研究.     

人博卡病毒载量与儿童急性下呼吸道感染临床特征相关性研究

目的了解人类博卡病毒(HBoV)在儿童急性下呼吸道感染中的检出情况,并探讨HBoV载量与儿童急性下呼吸道感染临床特征的相关性。方法收集2011年3月至2014年3月因急性下呼吸道感染住院患儿的鼻咽抽吸物(NPAs)1 554份,采用实时荧光定量PCR检测12种RNA病毒和ADV、HBoV 2种DNA病毒,并同时检测HBoV阳性患儿的病毒载量。结果 1 554份标本中1 212份(77.99%)检出病毒,275份(17.70%)HBoV检出阳性。HBoV阳性病例中3岁者占94.9%,男性多于女性。275例HBoV阳性病例中,单一感染45例(16.36%),混合感染230例(83.64%),两者病毒载量的差异无统计学意义(P0.05)。有发热症状的HBoV阳性患儿病毒载量高于无发热者,有喘息症状的病毒载量高于无喘息者,差异均有统计学意义(P0.05)。轻、中、重度组急性下呼吸道感染患儿之间的病毒载量差异无统计学意义(P0.05)。结论 HBoV是儿童急性下呼吸道感染重要病原之一。病毒载量高的患儿,临床更易出现发热、喘息等症状,但疾病严重程度及混合感染与病毒载量之间无显著相关性。     

湖南省2020年度儿科医师转岗培训学员结业后转归特点分析

目的 调查2020年度湖南省儿科医师转岗培训学员结业后转归特点,探讨转岗培训成功率的影响因素。方法 2020年11月—2021年11月通过问卷调查收集湖南省2020年儿科医师转岗培训学员结业后相关信息,比较转岗成功与不成功的学员特点。结果 81名完成转岗培训,100%完成了本次调查。81名学员中,中位年龄33岁。男性18名,女性63名,男女比例0.29:1。58人（71.6%）来自二级医院,行政区域划分以县级为主。54人（66.7%）来自非儿科专业。2020年度儿科医师转岗培训的转岗成功率为77.8%(42/54)。儿科医师转岗结业后转岗成功与否在性别、年龄、医院等级、转岗前专业、单位设立儿科、单位变动、薪酬变化方面差异无统计学意义（P> 0.05）。转岗成功学员较转岗失败学员培训后工作量的变化以及所属医院重视程度差异有统计学意义（P=0.007,P=0.002）,52.4%的学员认为转岗后工作量较转岗前增加。结论 在政府支持下的儿科转岗培训已有一定成效,对健全儿童疾病分级诊疗体系具有重要意义,但从根源上解决儿科医师工作量大、县级医院儿科重视度不够等问题仍是一个挑战。     

人类疱疹病毒6型荧光定量PCR检测方法的建立和应用

目的 建立人类疱疹病毒6型(HHV-6)荧光定量PCR检测方法,并检测临床样本.方法 根据文献合成HHV-6 U65-66基因片段的特异性引物和TaqMan探针,构建质粒制备标准品,评估该方法的特异性、灵敏度和重复性;并用该方法检测93份临床诊断为病毒性脑炎的脑脊液标本.结果 本实验检测HHV-6的灵敏度为3×10(0)拷贝/μl;标准曲线间线性关系(R2)为0.999,扩增效率为97.9％;同一样本重复检测3次,组内Ct值的变异系数最大为0.61％,组间为3.13％;特异性检测中只有HHV-6阳性标本出现扩增曲线.93份临床标本中检出HHV-6阳性2例,检出率为2.15％.结论 本实验所建立的荧光定量PCR检测HHV-6的方法特异强、灵敏高、重复性好,具有应用于临床检测的潜在价值.     

腺病毒肺炎12例临床分析

目的 提高对腺病毒肺炎临床特点的认识.方法 回顾分析2010年10月 - 2011年5月12例确诊为腺病毒肺炎患儿的临床资料,对其临床、影像及纤维支气管镜(纤支镜)下特点,以及治疗进行总结.结果 12例患儿均有持续高热、热程长,喘鸣音顽固,肝肿大,感染中毒症状重,易出现合并症,其中低氧血症11例,呼吸衰竭5例,中毒性心肌炎5例,中毒性肝炎6例,脑病6例,典型川崎病改变3例,死亡2例.肺部由早期斑片状影迅速融合成大片影,病变部位以双下叶尤其是左下叶为甚.纤支镜镜下9例(75%)患儿有灰白色黏液栓致开口堵塞,吸出为支气管塑形样物,8例(66.6%)患儿有黏膜糜烂剥脱.结论 腺病毒肺炎纤支镜下黏膜糜烂剥脱可能预示其病情更重,治疗上除抗感染及常规对症治疗外,可酌情采用激素和静脉用丙种球蛋白以及纤维支气管镜灌洗等综合治疗.     

肺炎支原体脂质膜蛋白诱导人支气管上皮细胞SPLUNC1的表达

[目的]观察不同浓度肺炎支原体脂质相关膜蛋白(MP-LAMPs)对人支气管上皮细胞(HBEC)表达短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的影响,探讨SPLUNC1在呼吸道感染中的作用及肺炎支原体(MP)感染与SPLUNC1表达的量效关系及时效关系.[方法]通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测不同浓度的MP-LAMPs刺激HBEC后,在不同时间点(2h、4h、8h、16h及24 h)SPLUNC1基因表达的变化；同时用Western-blot检测0.5 μg/mL MP-LAMPs刺激HBEC后不同时间点SPLUNC1蛋白表达情况.[结果]正常人HBEC有SPLUNC1表达；在相同时间点,不同浓度的MP-LAMPs均能诱导SPLUNC1基因表达上调,其中0.5 μg/mL s浓度组表达量最高,不同浓度组间比较差异有统计学意义(P＜0.01)；在同一浓度组,MP-LAMPs刺激细胞2h后SPLUNC1基因及蛋白表达量开始上调,并在4h时达高峰,随着时间延长逐渐下降,不同时间点组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]MP-LAMPs能诱导HBEC的SPLUNC1基因表达上调,并成一定的剂量依耐性,其表达量最佳浓度和时间点为0.5 μg/mL MP-LAMPs刺激HBEC 4 h.     

铬及其化合物与噪声联合作用对听力影响的分析

目的探讨铬及其化合物与噪声联合作用对听力损失的影响。方法选择某化学制品企业同时接触铬酸盐与噪声的人员127名男性为实验组,另选择接触噪声但不接触铬酸盐的91名男性为对照组,采用职业卫生学调查、工作场所职业病危害因素现场检测和职业健康检查进行综合评价。结果实验组听力损失的发生率为29.1%,对照组为15.4%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,实验组听力损失发生的相对危险度是对照组2.4倍（P〈0.05）。累积噪声量达80 dB（A）及以上时,实验组的RR值（9.094）大于两个变量独立作用之和。结论同时接触铬和噪声可导致听力损失发生率增高,在高强度噪声暴露情况下,铬和噪声对听力损失存在协同作用。     

长沙地区急性下呼吸道感染住院儿童的病毒病原学分析

目的：了解长沙地区急性下呼吸道感染（ALRTI）住院儿童中常见呼吸道病毒的流行特点,为本地区儿童ALRTI的防治提供依据。方法：收集2013年4月～2014年3月诊断为ALRTI的住院患儿鼻咽抽吸物（NPA）标本603份,采用实时荧光PCR方法检测呼吸道合胞病毒（RSV）、鼻病毒（HRV）、流感病毒A（IFVA）、流感病毒B （IFVB）、副流感病1-4（PIV1-4）、人偏肺病毒（hMPV）、肠道病毒（EV）、冠状病毒HKU1（HCoV-HKU1）、冠状病毒NL63（HCoV-NL63）、腺病毒（ADV）及人博卡病毒（HBoV）,结合临床资料进行统计分析。结果：603份标本中有527份检出病毒,总检出率87.4%,RSV检出率居首位为42.6%,其次HRV为25.4%、HBoV为17.7%、PIV3为15.4%, ADV为14.76%。病毒总检出率在男女之间差异无统计学意义;病毒阳性检出率在各年龄段之间差异有统计学意义,以6个月至1岁以内年龄段检出率最高。病毒总检出率季节分布差异有统计学意义,以冬季检出率最高。结论：病毒病原在长沙地区儿童ALRTI中占重要地位,其中RSV、HRV、HBoV、PIV3、ADV是常见病毒病原,易感人群以低年龄段儿童为主,冬春季为高发季节。     

122例重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的病毒检测分析

目的 了解湖南长沙地区重症肺炎患儿中呼吸道病毒的感染状况.方法 2011年1月至2011年12月,收集重症肺炎儿童的肺泡灌洗液标本122份,采用巢氏或普通逆转录聚合酶链反应(nested-PCR或RT-PCR)对腺病毒(ADV)、博卡病毒(HBoV)及副流感病毒1、2和4(PIV1、2、3、4)、呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A、B(IFVA-B)、人偏肺病毒(HMPV)、冠状病毒HKU1及NL63(HCoV-HKU1、HCoV-NL63)进行检测.结果 122份重症肺炎患儿肺泡灌洗液标本中,60份病毒阳性(49.1％),其中ADV检出率最高(40.98％,50/122),其次为RSV (7.37％,9/122),HBoV(7.37％,9/122).2种病毒混合感染有21例,占35％ (21/60),40％(20/50)的ADV阳性存在混合感染.结论 2011年,腺病毒感染是长沙地区重症肺炎的重要病因,其中腺病毒的混合感染在重症肺炎中常见.