K562细胞转染HLA-B分子对NK细胞杀伤功能的影响

为了研究不同HLA B分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,我们分别构建pcDNA3 HLA B 390 5 2、B 2 70 4、B 5 1 0 2 2基因真核表达载体 ;借助脂质体将各质粒转染入K5 6 2细胞 ,经G4 1 8筛选 ,分别获得阳性表达细胞株 ;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果显示 :与转染了空质粒的对照组相比 ,外周血NK细胞对K5 6 2 B39的杀伤率无明显影响 ,而对K5 6 2 B2 7,K5 6 2 B5 1的杀伤率降低。当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后 ,此抑制效应大部分消失。提示靶细胞表达HLA Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应 ,而表达HLA Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响     

HLA-E的表达对RSA及PIH患者外周血γδT细胞细胞毒效应的影响

探索HLA-E分子的表达对习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)及妊高症(pregnancy-induced hypertension,PIH)患者外周血γδT细胞细胞毒效应的影响。通过固相抗体法体外分离并扩增外周γδT血细胞作为效应细胞,以HLA-E转染的LcL721.221细胞(.221E)及滋养层细胞JAR作为靶细胞,采用4 h乳酸脱氢酶(LDH)释放试验观察NK细胞对靶细胞的细胞毒效应。结果显示,来自RSA、PIH及正常对照组的γδ细胞均不能有效杀伤HLA-E转染的.221E细胞及JAR细胞,但未经HLA-E转染的LcL721.221细胞则被溶解;抗HLA-E单抗3D12及抗CD94单抗HP-3B1的阻断可以分别部分恢复效应细胞对靶细胞LcL721.221E的杀伤,但对JAR细胞没有影响;与正常对照组相比,RSA及PIH患者外周血γδT细胞对.221、.221E及JAR细胞的细胞毒活性没有显著性差异(P>0.05)。这说明HLA-E分子的体外表达可以保护靶细胞防止γδT细胞的杀伤,该保护机制主要是通过γδT细胞受体CD94/NKG2对靶细胞表面HLA-E分子的识别来实现的;滋养层细胞对γδT细胞杀伤的抵抗可能存在MHC I类非依赖的机制。     

HLA-DR和 HLA-DQ等位基因与口腔扁平苔藓的相关性

目的研究上海及江浙地区汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1、HLA-DQB1等位基因与口腔扁平苔藓(OLP)发病的关系。方法采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法,检测上海及江浙地区44例OLP患者和150例正常对照者的HLA-DRB1、HLA-DQB1等位基因表现频率,所得数据在OLP与正常对照之间以及不同类型OLP患者之间进行比较分析。结果与正常对照组相比,OLP组HLA-DRB1*09和HLA-DRB1*07基因表现频率均明显增高,分别为56.8%vs31.3%(P<0.01)和27.3%vs13.3%(P<0.05);而HLA-DQB1*06基因表现频率则显著降低(18.8%vs42.5%)(P<0.01)。OLP组内比较显示,HLA-DRB1*04表达频率在具有糜烂表现的OLP患者中显著升高,与白纹组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论HLA-DRB1*09、DRB1*07等位基因与上海及江浙地区部分人群的OLP易感性相关;HLA-DQB1*06等位基因可能与OLP的抵抗性相关联;HLA-DRB1*04可能与糜烂型OLP的发生有关。     

上海地区汉族群体HLA-G基因多态性分析

目的　调查上海地区汉族人群 HL A- G等位基因的分布及基因频率 ;比较不同群体中 HL A-G等位基因检出率。方法　 HL A- G等位基因分型采用聚合酶链反应 -序列特异性寡核苷酸探针杂交方法 ,对 146名上海地区汉族正常人进行了调查。结果　这一人群中共检测到 G* 0 10 11、G* 0 10 12、G* 0 10 13、G* 0 10 18、G* 0 10 3、G*0 10 41、G* 0 10 42、G* 0 10 43、G* 0 10 5 N9种等位基因 ,其中 G* 0 10 11的频率最高 ,为 37.33% ,其次为 G*0 10 13和 G* 0 10 41,分别占 2 0 .2 1%和 12 .5 6 % ,G* 0 10 3的基因频率最低 ,为0 .34 %。结论　上海汉族人群中 HL A- G等位基因具有较高的多态性 ,HL A- G等位基因频率在不同群体中的分布差异有显著性。     

上海汉族人群MICA基因第5外显子微卫星多态性研究

目的 了解上海地区汉族人群ＭＩＣＡ基因第５外显子微卫生多态性分布,以及ＭＩＣＡ基因与其紧密连锁的ＨＬＡ－Ｂ基因位点的关系。方法 用ＰＣＲ－异源双链分析法,对１７５名正常无关个体的ＭＩＣＡ基因第５外显子微卫星多态性的分布进行研究。结果 （１）上海地区汉族人群ＭＩＣＡ基因第５外显子存在５种等位基因,其中ＭＩＣＡ＊Ａ５最为常见（３９．１４％）,其次为＊Ａ５．１（２２．２９％）;（２）ＭＩＣＡ等位基因与Ｈ     

人类白细胞抗原-DQB1与儿童十二指肠溃疡和幽门螺杆菌感染的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DQB1等位基因与儿童十二指肠溃疡(DU)和幽门螺杆菌(H.pylori)感染的遗传关联性。方法采用非同位素标记的聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSO)杂交的方法,对上海地区汉族健康儿童80例、DU患儿58例的HLA-DQB1等位基因进行分型;并同时检测DU患儿H.pylori感染情况。结果在DU患儿中,HLA-DQB1×05031等位基因频率明显高于正常健康儿童(分别为:6.02%、0.63%,P<0.05,RR=9),而在H.pylori阳性和H.pylori阴性DU组之间差异无显著性。结论HLA-DQB1×05031与DU呈正相关,DU患儿与正常对照组儿童之间存在着遗传学的差异;虽然H.pylori感染是DU的重要致病因素,但HLA-DQB1×05031并不是通过H.pylori感染而影响DU的遗传易感性。     

云南傣族、彝族和上海汉族人群中Miltenberger复合物频率调查

云南傣族、彝族和上海汉族人群中Ｍｉｌｔｅｎｂｅｒｇｅｒ复合物频率调查２０００２５上海第二医科大学上海市免疫学研究所范丽安许玲娣杨珏琴姚芳娟对我国各民族间的分化程度、祖缘关系及遗传变异的分布进行研究和探讨是遗传学研究的一个重要内容，红细胞血型作为人类遗...     

正常人群中HLA-I类基因多态性初步研究

HLA基因簇位于第6号染色体短臂,它至少编码三类抗原。用血清学方法表明编码Ⅰ类细胞表面蛋白有三位点,HLA-A、-B、-C。这些位点具广泛多态性。本文应用Southern技术,以~(32)P标记的HLA-I类cDNA为探针,和纯血清学分型个体的白细胞DNA限制性内切酶酶解片段杂交,从DNA水平对HLA-I类抗原与限制性片段长度多态性(RFLP)相关性进行初     

三个HLA-B分子影响血清阴性脊柱关节病外周血NK细胞毒活性的研究

目的探讨HLA-B27、B39和B51抗原分别在K562细胞表达后,对血清阴性脊柱关节病(SpA)外周血NK细胞毒活性的影响。方法采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法,分别测定9例SpA病人和9名正常人外周血NK细胞对表达HLA-B27、B39和B51抗原的K562细胞及转染空pcDNA3质粒的K562细胞的杀伤效应。结果SpA病例组和正常对照组均显示B27和B51抗原表达于K562细胞后,能阻断NK细胞毒活性,而B39不能阻断NK细胞毒性;当比较病例组和正常组之间NK细胞分别对K562,K562-B27、B39和B51细胞的杀伤效应时,显示两组外周血NK细胞对K562细胞、转染B27、B39和B51分子的K562细胞的毒性差异均无显著性(P>0.05)。但是,SpA病例组中NK细胞对HLA-B27转染的K562细胞杀伤效应与正常组相比,虽然差异未达到显著水平,但显示了一定程度的偏低(P<0.1)。结论K562细胞表达HLA-Bw4分子后,明显抑制NK细胞的杀伤效应,而表达HLA-Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响;而且提示B27阳性的SpA患者体内,外周血NK细胞毒活性偏低。     

三个群体MICA基因外显子2、3和4的多态性研究

目的 调查上海地区汉族、云南傣族和新疆维吾尔族3个群体MICA基因外显子2、3和4的多态性。方法 采用聚合酶链反应－序列特异的寡核苷酸探针杂交（polymerase chain reaction and sequence-specific oligonucleotide robing,PCR-SSOP）方法，分析183名汉族、41名傣族和66名维吾尔族正常人群的MICA胞外区等位基因多态性。结果 分别在汉族、傣族和维吾尔族中检测出10、7和9个MICA等位，其中MICA^*008在汉族和维吾尔族中频率最高，而傣族中MICA^*010的频率最高。3个民族MICA等位基因分布方式各不相同，而且维吾尔族的等位基因分布与另外两个民族相比，差异具有显著性。结论 MICA等位基因分布方式具有民族地区特异性。