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人T-bet基因的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆人T-bet基因全长编码区的cDNA,并进行豁定和测序分析,为从转录水平研究Th1/Th2平衡及其与免疫相关性疾病发生发展的关系奠定基础。方法:采用RT-PCR方法,从人外周血淋巴细胞获得T-bet基因的cDNA;连接至pGEM-Teasy载体,导入大肠杆菌DH5α并选择阳性克隆;应用M13F/R通用引物进行双向反应测序,以作序列鉴定。结果:扩增得到的T-bet基因cDNA全长1670 bp,包括编码区1607 bp,编码530个氨摹酸残基,与Genbank中发表的序列完全一致。结论:获得了人T-bet基网的克隆,为进一步研究其生物学功能构建了基础平台,为寻找多种免疫性疾病的有效治疗提供新思路。 相似文献
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常州地区过敏性鼻炎儿童吸入性过敏原分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:分析常州地区过敏性鼻炎患儿吸入性过敏原检测结果及不同年龄组过敏原分布情况。方法采用德国敏筛过敏原检侧系统(Allergy Screen)测定473例0~12岁过敏性鼻炎患儿血清中过敏原特异性 IgE 抗体水平。根据年龄分为婴幼儿组(0~3岁)、学龄前儿童(4~6岁)和学龄儿童(7~12岁),并比较不同年龄组过敏原阳性率及变化趋势。结果473例患儿过敏原阳性340例(71.9%),前三位过敏原分别是户尘螨(55.6%)、混合真菌(25.8%)和屋尘(18.8%),随年龄增长阳性率均呈升高趋势。其中户尘螨(χ2=21.061,P =0.000)、屋尘(χ2=15.111,P =0.000)和猫狗毛皮屑(χ2=7.597,P =0.022)组间分布比较差异有统计学意义。单一过敏原阳性率最高(38.5%),第二位为双重过敏原阳性(23.7%)。单一过敏原阳性前三位与各类过敏原总体阳性排序相同。最常见双重过敏原是户尘螨+屋尘组合,多重过敏原阳性率组间分布差异有统计学意义(χ2=13.399,P =0.001)。结论常州地区过敏性鼻炎患儿吸入性过敏原以户尘螨、混合真菌和屋尘为主,阳性率随年龄增长呈上升趋势,不同年龄组过敏原构成有差异,单一过敏原阳性最常见,其次为双重过敏原阳性。 相似文献
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为探讨ILC2和滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell, Tfh)是否协同促进并维持肺腺癌免疫抑制状态,选择肺腺癌患者为研究对象,采用FACS检测患者外周血中ILC2和Tfh的比例;qRT-PCR检测外周血ILC2及Tfh相关因子的表达水平,并对ILC2及Tfh进行相关性分析。结果显示,与对照组比较,肺腺癌患者外周血中ILC2的比例及其相关因子IL-33、IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)、IL-13、IL-5及IL-4 mRNA的表达水平均升高(P<0.05),CD3+CD4+CXC趋化因子受体5(CXC chemokine receptor 5, CXCR5)+T细胞及PD-1+CXCR5+Tfh的比例升高(P<0.05),CD3+CD4+CXCR5-T细胞的比例下调(P<0.01),Tfh相关... 相似文献
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目的:探讨CpG-ODN干预对婴幼儿喘息性支气管炎外周血单个核细胞(PBMC)T-bet表达和IFN-γ分泌的影响。方法:对28例喘息性支气管炎(喘支组)患儿于急性期和恢复期分别抽取抗凝静脉血并分离PBMC,以终浓度为10μg/ml的B型CpG-ODN刺激48小时,分别应用RT-PCR和Western blot检测CpG-ODN刺激前后患儿PBMC的T-bet mRNA和蛋白表达情况,以ELISA检测PBMC培养上清IFN-γ的变化,同时设立26例健康婴儿对照组。结果:与正常对照组比较,喘支患儿PBMC表达T-bet mRNA及蛋白明显减少(P〈0.05),应用CpG-ODN刺激后,两组小儿PBMC表达T-bet均显著上调,但产生IFN-γ无明显增多,对照序列ODN对T-bet表达及IFN-γ的分泌无明显影响。相关分析表明,喘支患儿T-bet mRNA与IFN-γ分泌呈正相关(r=0.57,P〈0.01),CpG-ODN刺激后,二者相关性明显下降(r=0.19,P〉0.05)。结论:T-bet在喘支患儿PB-MC中表达减少,提示T-bet表达缺陷参与了喘支的免疫病理,B型CpG-ODN作为一种免疫调节剂,可有效上调T-bet的表达,但不能诱导IFN-γ的产生。 相似文献
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目的 探究血清鸢尾素(Irisin)与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)的相关性。方法 选取2013年9月至2014年3月于同济大学附属第十人民医院心脏中心住院患者182例,其中男性108例,女性74例;根据入院检测心肌肌钙蛋白T(cTNT)的水平,分为正常对照组(cTNT 0~0.014ng/ml)、心肌损伤组(cTNT 0.015~0.05ng/ml)、急性冠脉综合征组(cTNT>0.051ng/ml)。ACS组根据责任血管分为左前降支(left anterior descending branch, LAD)病变组及非左前降支病变组。所有的受试者均进行病史采集、体格检查、血生化指标及血清Irisin水平测定。结果采用单因素方差分析、t检验和Person相关分析进行统计学分析。结果 ACS组的血清Irisin水平较对照明显升高[(145.35±10.11) ng/ml vs (102.68±5.60) ng/ml,P<0.01],左前降支病变组(LAD病变)较非左前降支病变组(非LAD病变)Irisin水平升高[(123.86±8.05) ng/ml vs (108.27±5.72) ng/ml,P<0.05]。Irisin与N-端脑钠肽前体(NT-proBNP)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、空腹血糖(FBG)呈正相关(分别r=0.259,P<0.01;r=0.445,P<0.01;r=0.179,P<0.05)。结论 Irisin在ACS时明显升高,对ACS有预测和诊断意义,有望成为ACS治疗的新型分子靶点。 相似文献
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转录因子T-bet和GATA-3对婴幼儿喘息性支气管炎的免疫调控作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨转录因子T-bet和GATA-3对小儿喘息性支气管炎的免疫调控作用。方法对32例喘息性支气管炎(喘支组)和30例正常儿童(对照组)抽取抗凝静脉血5 mL,Ficoll分离外周血淋巴细胞,以终质量浓度为100 mg/L的植物血凝素(PHA)刺激48 h,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测淋巴细胞T-bet、GATA-3的mRNA表达水平。结果喘支组淋巴细胞培养上清液IFN-γ水平[(528±164)ng/L]低于对照组[(870±203)ng/L](P<0.05),而IL-4水平[(106±29)ng/L]明显高于对照组[(47±15)ng/L](P<0.01);喘支组和对照组淋巴细胞T-bet mRNA水平分别为(0.11±0.03)(、0.17±0.03),GATA-3 mRNA分别为(0.54±0.09)、(0.41±0.07),提示喘支组T-bet mRNA表达较对照组减少(P<0.05),而GATA-3 mRNA明显高于对照组(P<0.01);喘支组IFN-γ水平与T-bet mRNA表达I、L-4与GATA-3 mRNA表达均呈正相关(r=0.57,0.60 P均<0.01);IFN-γ与IL-4水平、T-bet mRNA与GATA-3 mRNA表达均呈负相关(r=-0.38,-0.46 P均<0.05)。结论1.喘支组患儿淋巴细胞合成IL-4水平增高,IFN-γ减少,存在以Th2细胞过度分化为特征的T辅助细胞分化失衡。2.喘支组患儿T细胞分化失衡受到核转录因子T-bet和GATA-3的调控,T-bet表达减少可能是一重要因素。 相似文献
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T-bet、GATA3及相关因子的表达与胃癌及转移的相关性研究 总被引:3,自引:1,他引:3
目的:分析胃癌患者Th1和Th2两类细胞因子的基因表达与转录因子T-bet和GATA3表达的相关性,从细胞因子与转录因子角度考证胃癌患者Th1/Th2细胞分化趋势,探讨p53与T-bet的相关性,了解T-bet与肿瘤转移之间的关系。方法:利用荧光定量PCR技术检测55例胃癌患者及45例正常人外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA3转录因子和IFN-γ、IL-4等细胞因子的水平,应用免疫组化法检测胃癌组织中p53的表达状况。结果:55例胃癌患者T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的表达率依次为51%(28/55)、78%(43/55)、27%(15/55)、69%(38/55)。定量PCR结果显示,病人组的T-bet和IFN-γ明显低于正常对照组(P〈0.01),而GATA3和IL-4则明显高于正常对照组(P〈0.01)。T-bet与IFN-γ在病人体内的mRNA表达存在正相关性(P〈0.01),正常人则没有。GATA3与IL-4的表达在两组中均呈明显正相关(P〈0.01和P〈0.05),且在p53阳性的患者中,T-bet的表达率较低,而GATA3的表达率较高。结论:胃癌患者有明显Th2漂移现象,且p53的表达与T-bet的表达呈负相关。 相似文献
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目的对胶乳增强免疫比浊法(LEIA法)测定甲胎蛋白(AFP)水平,并进行方法学评价。方法用LEIA法测定178例血清的AFP水平,同时采用化学发光免疫分析仪法(CLIA法)对AFP水平进行测定。结果 LEIA法测定AFP的灵敏度为0.65 ng/mL,低、中、高水平的批内CV分别为0.98%、0.92%、0.89%;批间CV分别为1.63%、1.53%、1.45%。回收率96.3%~102.9%。结论 LEIA法是测定AFP较好的方法,适合普及推广。 相似文献