解整合素-金属蛋白酶33基因T1位点多态性与哮喘相关性研究

目的 探讨解整合素-金属蛋白酶33(ADAM33)基因中的T1位点不同基因型及等位基因的分布频率,与支气管哮喘及血浆IgE水平的相关性.方法 对122例陕西关中地区汉族哮喘儿童(哮喘组)及137例对照儿童(对照组)应用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测位点多态性;通过ELISA法检测血浆IgE水平.结果 与对照组相比,哮喘组血浆总IgE水平显著上升(P ＜ 0.001).在该地区儿童中只检测到T1位点的2种基因型(TT和CT),哮喘组2种基因型的分布频率分别为85.2%和14.8%,对照组分别为86.1%和13.9%,两组分布频率差异无统计学意义(χ2 ＝ 0.041,P ＞ 0.05);哮喘组的T等位基因和C等位基因频率分别为92.6%、7.4%,对照组分别为93.1%、6.9%,两组分布差异也无统计学意义(χ2 ＝ 0.038,P ＞ 0.05).259例(包括对照组和哮喘组)样本和122例哮喘样本的血浆IgE水平在不同基因型均无差异.结论 在陕西关中地区汉族儿童中,ADAM33基因T1位点基因多态性与哮喘不相关,也不影响血浆IgE水平.     

一种人诱导多能干细胞向内皮细胞定向分化方案的建立及鉴定

背景：人诱导多能干细胞是一种与胚胎干细胞性状高度类似的多能干细胞,其具备三胚层分化潜能和持续自我更新能力,因此能够为临床细胞替代治疗提供足量目的细胞。目的：构建并鉴定一种高效的基于人诱导多能干细胞的内皮细胞定向分化实验方案。方法：采用免疫荧光技术对人诱导多能干细胞干性和增殖活性进行鉴定。采用转录因子重组蛋白和小分子化合物时序性调控系列信号通路,即在第0,1,2,5天顺序加入激活素A、GSK通路抑制剂CHIR99021/骨形态发生蛋白4、碱性成纤维细胞生长因子/血管内皮生长因子/骨形态发生蛋白4、碱性成纤维细胞生长因子/血管内皮生长因子/CHIR99021,人诱导多能干细胞经历心脏中胚层、内皮前体细胞命运转变并最终分化成为有功能的内皮细胞。采用明场显微镜、实时定量PCR、免疫荧光动态观察不同阶段细胞形态特征和分子标记物,采用血管成环实验验证内皮细胞的体外血管形成功能。结果与结论：(1)人诱导多能干细胞内源性高表达诱导多能干细胞干性特异标记物(OCT4、NANOG、SSEA4)和增殖标记物(Ki67);(2)开始分化后的人诱导多能干细胞经历了诱导多能干细胞、心脏中胚层、内皮前体细胞、内皮细...     

陕西关中地区汉族支气管哮喘患儿解整合素-金属蛋白酶33基因S2位点的多态性

目的 研究陕西关中地区汉族儿童解整合素-金属蛋白酶33(ADAM33)基因S2位点不同基因型及等位基因的分布频率,探讨其与支气管哮喘(哮喘)及血浆IgE水平的相关性.方法 研究对象为123例陕西关中地区汉族哮喘儿童(哮喘组)及136例健康儿童(健康对照组),采用ELISA法检测其血浆IgE水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测位点多态性,PCR产物长度458 bp,使用的限制性内切酶为BspT107I.电泳分离后CC基因型为1个片段(458 bp),CG基因型为3个片段(135 bp,324 bp和458 bp),GG基因型为2个片段(135 bp和324 bp).结果 1.与健康对照组比较,哮喘组血浆总IgE水平显著升高(P<0.001).2.ADAM33基因S2位点的3种基因型(CC、CG和GG)在哮喘组分布频率分别为63.4%、30.1%和6.5%,在健康对照组分布频率分别为64.7%、34.6%和0.7%,2组分布频率比较差异有统计学意义(χ2=6.601,P=0.037);但等位基因频率2组间比较差异无统计学意义.3.与ADAM33基因S2位点CC基因型比较,GG基因型可显著增加哮喘发生的危险性(OR=9.026,P=0.016 9),而CG基因型与CC基因型比较差异无统计学意义;2种等位基因对哮喘的相对危险度比较差异无统计学意义.结论 在陕西关中地区汉族儿童中,ADAM33基因S2位点基因多态性与哮喘相关,且GG基因型罹患哮喘的风险升高.CC、CG及GG基因型对血浆IgE水平无显著影响.