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1.
兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征 总被引:9,自引:2,他引:7
[目的]探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况.[方法]无菌条件下,从 2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按 1× 106个 /孔接种于 6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线.利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态.应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定.[结果]每克软骨能获取 1 5× 106个软骨细胞,活性率为 95%.培养 2~ 3 d,细胞贴壁、变形,呈多角形; 8 d左右,细胞融合成层.透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性.细胞传至 5代后,出现"成纤维细胞样".[结论]本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第 2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞 5代培养后,细胞表型发生改变. 相似文献
2.
患者 男 ,6 4岁 ,以咳嗽 1个月余 ,伴轻微气短 ,胸部X光片发现右肺下叶肿块收住院。胸部CT显示右肺下叶 5cm× 4cm肿块 ,肿块密度不均、边缘不规则 ,CT值 5 2~ 6 8Hu。纤维支气管镜检查发现右肺下叶肿块 ,累及右中间段支气管开口 ,刷片未找到癌细胞。患者心电图及肺功能正常 ,各项常规化验均在正常范围。术前临床诊断为右肺下叶癌累及中间段支气管。于 2 0 0 2年 2月 2 2日在全麻下对患者行右后外切口开胸探查。术中见右肺水平裂未发育 ,斜裂发育良好 ,肿块位于右肺下叶根部 ,大小约 5cm× 4cm× 4cm ,质硬 ,肉眼判断为… 相似文献
3.
【目的】观察压力对体外培养SD大鼠髁突软骨细胞增殖、凋亡以及合成蛋白多糖的影响,探讨压力与软骨退变之问的相互关系。【方法】在一个大气压基础上,分别对3组体外培养髁突细胞进行加压-10kPa、10kPa,20kPa(5%CO2),以未加压组作为对照,用四唑盐法(MTY法)和流式细胞技术分别检测各组标本在加压3h和加压24h后细胞增殖、凋亡的情况:应用硫酸-咔唑法检测各组标本在加压3h和加压24h后蛋白多糖的含量。【结果】加压3h后,各加压组与对照组相比,细胞的增殖、凋亡以及蛋白多糖含量无明显变化;加压24h后,压力值为20kPa时可以明显拟制增殖,并诱导髁突软骨细胞发生凋亡增加,蛋白多糖含量明显减少。【结论】长时间的异常压力负荷可使髁突软骨细胞增殖减缓、凋亡增加,蛋白多糖含量减少,诱发或加重关节软骨退变。 相似文献
4.
【目的】探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件,观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性。【方法】在无菌条件下,切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘,剪至1.0m^3的碎块,0.5g/mL胰酶消化30min、胶原酶消化4h,200目筛网过滤,获得关节盘纤维软骨细胞。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定,测定其生长曲线。透射电镜观察细胞超微结构。【结果】原代培养的关节盘纤维软骨细胞12h可观察到贴壁细胞,48h贴壁细胞逐渐增多,大部分细胞为短梭形,小部分为多角形,第4天可见多个细胞克隆形成,第8天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12h贴壁率达90%,大部分为多角形,4~5d即可张满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达。【结论】体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力。 相似文献
5.
目的研究恶性肿瘤患者病理组织中人纤维介素(human fibrinogen-like protein2,hfgl2)的表达及与纤维蛋白沉积的关系。方法采用免疫组化方法检测了11例结肠癌、15例宫颈癌、10例乳腺癌、9例食管癌、12例肺癌、16例胃癌患者的病理组织切片中hfgl2及纤维蛋白的表达,分析二者的组织学关系,用RT-PCR方法检测了部分肿瘤组织与肿瘤细胞系中的hfgl2 mRNA。结果免疫组化显示hfgl2在上述肿瘤中均有表达,主要分布于间质浸润细胞、肿瘤实质细胞、肿瘤血管内皮细胞及细胞外基质,且在邻近有明显的纤维蛋白沉积。通过RTPCR,在体外培养的数种肿瘤细胞系中未检出hfgl2 mRNA,但在肿瘤组织中检出hfgl2 mRNA表达明显高于正常组织。结论恶性肿瘤时存在hfgl2的高表达,并且可能与肿瘤高凝状态的形成及肿瘤的演进有关。 相似文献
6.
【目的】探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件,观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性。【方法】在无菌条件下,切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘,剪至1.0m^3的碎块,0.5g/mL胰酶消化30min、胶原酶消化4h,200目筛网过滤,获得关节盘纤维软骨细胞。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定,测定其生长曲线。透射电镜观察细胞超微结构。【结果】原代培养的关节盘纤维软骨细胞12h可观察到贴壁细胞,48h贴壁细胞逐渐增多,大部分细胞为短梭形,小部分为多角形,第4天可见多个细胞克隆形成,第8天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12h贴壁率达90%,大部分为多角形,4~5d即可张满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达。【结论】体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力。 相似文献
7.
8.
9.
目的 探讨基线TC与中国男性肺癌发病风险的关联及其强度。方法 自2006年5月,以开滦集团全体在职及离退休男性职工为调查对象,建立开滦集团男性动态队列并随访。基线调查时收集研究对象的社会人口学、个人疾病史、身体测量指标和TC等基线信息,并利用随访收集肺癌发病结局信息。参考《中国成人血脂异常防治指南》与研究人群TC分布特征,TC按照五分位数进行分组:<160、160~、180~、200~、≥240 mg/dl,以TC 160~mg/dl组为参比组,利用Cox比例风险模型分析基线TC与男性肺癌发病风险的关联性、限制性立方样条曲线分析其非线性关系。结果 截至2014年12月31日,109 884名男性进入队列,共计随访763 819.25人年,随访时间M=7.88年,收集肺癌新发病例808例。调整年龄、文化程度、收入、吸烟、饮酒、粉尘暴露史、FPG、BMI后,以160~mg/dl组为对照,TC偏低(<160 mg/dl)和TC升高(≥240 mg/dl)组男性肺癌发生风险分别升高34%(HR=1.34,95% CI:1.04~1.72)和45%(HR=1.45,95% CI:1.09~1.92)。剔除随访2年内肺癌新发病例及有高血脂病史者后,结果无显著变化。结论 TC与男性肺癌发生相关,TC过高或过低男性的肺癌发病风险均升高,保持适当的TC水平可能是预防和控制肺癌的有效措施之一。 相似文献
10.
目的 探讨中医治疗妊娠合并糖尿病59例的临床疗效.方法 选择2012年4月-2014年2月期间收治的妊娠合并糖尿病患者59例,根据中医辩证分型,采用相应的中医治疗方法.结果 治疗效果显效37例(62.71%),有效17例(28.82%),无效5例(8.47%),总有效率91.53%.结论 应用中医治疗妊娠合并糖尿病,疗效明显,改善患者临床症状,值得推广应用. 相似文献