角膜基质细胞体外长期培养过程中生物学特性的改变

目的 研究兔角膜基质细胞在体外长期培养传代过程中,细胞增殖能力和胞外基质表达水平的改变。方法 取体外培养兔角膜基质细胞,由光镜对各代细胞的形态学变化进行观测。通过对各代细胞生长曲线的绘制,得出其各自的群体倍增时间;MTT法比较各代细胞增殖能力的改变。RT-PCR和Western杂交检测各代细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平的改变;爱茜蓝法检测糖胺聚糖(GAG)的含量。结果 体外培养兔角膜基质细胞随着传代的进程,逐渐显现衰老的形态特征。细胞群体倍增时间由第7代起显著延长(P<0.01);MTT比色法的结果亦显示,第7代细胞的增殖能力开始大幅下降(P<0.01)。第9-11代时,Ⅰ、Ⅲ型胶原在mRNA和蛋白水平的表达都有明显减少(P<0.01),降至第1代细胞的30％左右;GAG的含量也降至40％左右。结论 兔角膜基质细胞经历长期体外培养后,细胞增殖能力和胞外基质表达水平显著下降,逐渐丧失原有的功能。但作为构建组织工程化角膜的种子细胞,在它的生物学特性未发生改变之前,经3次传代培养,获取的细胞量达到组织块消化所得细胞的240倍左右,已足以用于构建之用。     

骨髓基质干细胞-藻酸钙复合物构建骨组织的实验研究

目的 研究犬骨髓基质干细胞(BMSCs)体外成骨活性和在犬体内异位成骨能力，探讨其作为骨组织工程种子细胞的可能性。方法 抽取成年犬骨髓，梯度离心法获取单个核细胞，条件培养液体外培养、诱导、扩增后，进行组织化学、免疫细胞化学染色，透射电镜下观察其成骨活性。将培养的第3代细胞与藻酸钙所形成的复合物植于犬皮下，3月后行组织学检测。结果 体外培养的BMSCs Von Kossa染色可见钙结节，AKP染色及I型胶原、Osf2／Cbfαl、骨钙素免疫细胞化学染色先后呈现阳性；透射电镜下见基质钙化；组织学检测提示细胞一藻酸钙复合物体内培养3月后形成骨样组织。结论 BMSCs在大量扩增的同时，在一定条件下能向成骨细胞分化，细胞与藻酸钙复合物能在具免疫力的哺乳动物皮下形成骨样组织。BMSCs可作为骨组织工程较理想的种子细胞。     

长脉冲Nd:YAG激光非侵入性治疗皮肤浅表静脉畸形

目的前瞻性研究长脉冲1064nm Nd:YAG激光非侵入性治疗皮肤浅表静脉畸形的疗效。方法22例不同部位皮肤浅表静脉畸形患者接受长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗,6mm直径光斑,7～8ms双脉宽,脉冲间隔20ms,140～150J/cm2能量,接触式冷却,治疗间隔3周至1个月,治疗后1、6个月随访,评价病灶清除率分为五级。结果22例患者完成治疗,最多治疗5次。随访6个月,96.3%浅表静脉畸形获得76%～100%的清除,37%获得病灶的完全清除,未见复发。治疗部位无一例发生紫癜,治疗后8例(38.1%)出现红斑,1d至1个月消退。无色素改变和形成。结论长脉冲1064nm Nd:YAG激光能有效安全地治疗皮肤浅表静脉畸形,选择性地清除浅表血管,并使用接触冷却系统保护表皮,减少紫癜发生及色素改变和瘢痕的形成,达到理想的美容效果。     

Marchac法治疗中重度乳房肥大的疗效

目的 观察Marchac巨乳缩小术治疗中重度乳房肥大的临床疗效.方法 2001～2006年,应用Marchac法对21例中重度乳房肥大患者施行巨乳缩小手术,平均每侧切除组织700 g.术后1年随访,通过对乳房整体外形、乳头感觉、瘢痕大小等方面的4级评分,进行疗效评价.结果 21例患者中伤口一期愈合17例,二期愈合4例(脂肪液化4例,合并血肿1例),无感染及乳头和乳晕坏死病例.14例患者术后1年随访,外形评价"好"12例,"中"2例;部分患者保留乳头感觉;乳房下皱襞瘢痕均短于8.5 cm.结论 Marchac法治疗中度乳房肥大具有效果持久,外形好,瘢痕短等优点;对于重度肥大的乳房,通过控制术中腺体瓣的厚度及配合术后积极处理,也可取得满意的治疗效果.     

0.01%阿托品对学龄期儿童近视防控作用研究

探讨0.01%阿托品对学龄期儿童近视防控的有效性和安全性,为改善儿童视力提供有效措施.方法 在2012-2016年期间收集来温州市人民医院眼科门诊进行视力检查的7~12岁近视临近期及近视眼儿童217例,随机分为2组:试验组110例,每晚睡前用0.01%阿托品滴眼液;对照组117例,不做任何处理.随访时间为1年.检查2组对象在干预前和干预后1年的屈光状态及度数、眼轴、眼压变化,记录近视度数快速增长率及有无发生不良反应,并进行比较.采用多元性线性回归分析影响近视度数变化的相关因素.结果 随访1年后,试验组屈光度数变化为(-0.20±0.84)D,低于对照组的(-0.63±0.88)D,差异有统计学意义(t=-3.734,P<0.01);试验组中近视度数快速增长率为10.91%,低于对照组的43.59%(x2=30.200,P<0.01);试验组眼轴变化为(0.11±0.62) mm,低于对照组的(0.37±0.65) mm(t=3.096,P=0.002);试验组眼压变化为(0.30± 3.81) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),与对照组的(-0.44±4.17)mmHg比较,差异无统计学意义(t=-1.386,P=0.167).多元线性回归分析显示,0.01%阿托品对抑制近视度数变化影响有统计学意义(B=0.238,95%CI=0.209~0.551,P<0.01).所有试验组对象自诉未出现畏光、视近模糊或其他不能耐受的副作用.结论 在1年规律地局部滴眼使用下,0.01%阿托品能安全有效防控学龄期儿童近视的发生及进展.     

我国老年居家护理的研究进展

居家护理服务是配合我国医疗改革实施的一项重要工作,但目前我国居家护理正处于起步阶段,通过对居家护理研究现状的介绍,发现我国居家护理现存的问题,并提出相应的改进措施,为我国居家护理服务对象提供更完善、更优质的居家护理服务,同时为居家护理质量评价体系和评估的完善提供进一步的参考。     

急性冠脉综合征中医证型与Ghrelin的相关性研究

目的：探讨急性冠脉综合征患者与人生长激素释放肽（Ghrelin）水平的相关性,为急性冠脉综合征辨证分型及辨证论治提供参考。方法：将160例急性冠脉综合征患者（其中气虚血瘀证86例、非气虚血瘀证74例）纳入急性冠脉综合征组（观察组）,选择同期健康体检者160例为对照组。ELISA法检测血Ghrelin水平,分析观察组患者Ghrelin水平与中医辨证分型的相关性。结果：（1）观察组Ghrelin水平低于对照组（P<0.05）;(2)观察组患者Ghrelin水平与年龄呈负相关,随着年龄的增加,Ghrelin水平降低;（3）观察组气虚血瘀证、非气虚血瘀证患者Ghrelin水平均低于正常对照组（P<0.05）,且气虚血瘀证患者Ghrelin水平低于非气虚血瘀证患者,存在统计学差异（P<0.05）。结论：急性冠脉综合征患者Ghrelin水平减低,年龄越大,Ghrelin水平越低;急性冠脉综合征中医辨证以气虚血瘀证居多,且气虚血瘀证患者的Ghrelin水平最低。     

鲜红斑痣内皮细胞的分离培养及鉴定

目的 探讨从鲜红斑痣分离培养内皮细胞的方法。方法 鲜红斑痣标本经胶原酶消化，CD31-免疫磁珠分选纯化细胞，接种于纤维连接蛋白铺层的培养皿；分别进行细胞形态学观察、细胞生长曲线的测定、培养细胞免疫荧光鉴定、低密度脂蛋白吸收试验。结果 从鲜红斑痣组织分离纯化出CD31＋细胞，在纤维连接蛋白铺层上6 h开始贴壁，细胞呈梭形，7 d生长融合呈铺路石状，CD31-免疫磁珠黏附于细胞上。鲜红斑痣内皮细胞CD31、vWF表达阳性，可摄取低密度脂蛋白。结论 建立鲜红斑痣内皮细胞的分离培养方法。     

组织工程技术构建角膜组织研究进展

同种异体角膜移植是目前治疗角膜盲最常用、最有效的治疗方法，但由于供体来源匮乏限制了此技术的应用。组织工程技术是应用细胞生物学和工程学原理，研究开发制作用于修复、改善损伤组织结构和功能替代物的一门技术。本就组织工程技术构建角膜组织的研究进展进行综述。     

增强型绿色荧光蛋白表达在同种异体组织工程软骨构建中的示踪作用

目的 观察重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞能否形成同种异体组织工程化软骨并示踪构建过程，方法 利用重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞和组织工程材料pluronicF-127复合物构建兔同种异体组织工程软骨，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其构建过程。结果 重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞能形成组织工程软骨，增强型绿色荧光蛋白（EGFP）在3周和6周后均得到了明显表达，且未影响软骨组织的形成过程，结论 重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞能形成组织工程软骨，EGFP是组织工程化软骨形成过程的良好示踪剂，且不影响组织的形成。