过敏性紫癜患儿尿中单核细胞趋化蛋白-1及转化生长因子-β1检测的意义

目的 探讨过敏性紫癜(HSP)患儿尿中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平变化的临床意义.方法 78例HSP患儿按尿白蛋白排泄率(UAER)分成正常白蛋白尿组(A组,n=24)、微量白蛋白尿组(B组,n=33)和大量白蛋白尿组(C组,n=21);同时选取25例健康儿童为对照组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组尿液中MCP-1、TGF-β1水平.结果 各组HSP患儿尿中MCP-1、TGF-β1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而且尿中MCP-1、TGF-β1水平随UAER增加呈递增趋势,尿液MCP-1、TGF-β1水平与UAER呈正相关(r=0.79,P<0.05;r=0.75,P<0.05),尿液MCP-1与TGF-β1水平呈正相关(r=0.71,P<0.05).结论 MCP-1与TGF-β1 参与了HSP肾损害的发生发展,尿MCP-1和TGF-β1水平可作为HSPN早期诊断的敏感指标之一.     

Xyloketal B对发育期大鼠惊厥后脑损伤的保护作用及机制研究#br#

目的　探讨Xyloketal B（Xyl-B）对发育期大鼠惊厥后脑损伤的保护作用及对氧化应激通路的调控。方法　40只20日龄SD大鼠随机分为Control组、海人酸（KA）组、KA+Xyl-B（25 mg/kg）组及KA+Xyl-B（50 mg/kg）组,通过腹腔注射KA制作大鼠惊厥模型,Control组注射生理盐水;KA+Xyl-B各组在KA诱导惊厥前2 h腹腔注射Xyl-B预治疗。惊厥后24 h处死大鼠,取海马组织,采用免疫荧光检测成熟神经元和活化星形胶质细胞,实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot分别检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶1（HO-1）、依赖还原型辅酶/Ⅱ醌氧化还原酶1（NQO1）、caspase3、Bcl-2和白细胞介素（IL）-6 mRNA及蛋白的表达。结果　与Control组比较,KA组神经元数量明显减少,活化星形胶质细胞显著增多;Keap1 mRNA和蛋白表达水平升高,Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白表达水平降低;caspase3和IL-6 mRNA和蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低（P＜0.05）。Xyl-B干预可逆转惊厥后上述病理变化,且KA+Xyl-B（50 mg/kg）组的干预效果整体上优于KA+Xyl-B（25 mg/kg）组。结论　Xyl-B能激活Nrf2抗氧化应激通路,抑制星形胶质细胞活化、炎性因子及凋亡蛋白的表达,对惊厥后脑损伤发挥保护作用。     

TSA对发育期大鼠癫痫后脑损伤的保护作用及其机制

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑素A(TSA)在癫痫后脑损伤发病中的作用及其机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为4组:对照组、海人酸(KA)组、小剂量TSA干预组(0.03 mg/kg)及大剂量TSA干预组(0.1 mg/kg)组,通过腹腔注射海人酸(KA)制作发育期大鼠癫痫模型,TSA于KA诱导癫痫前2 h腹腔注射给药,评估惊厥发作的等级及记录惊厥的潜伏期。癫痫后24 h处死大鼠,HE染色观察脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;CD68染色检测活化的小胶质细胞;Western blot检测IL-1β和TNF-α蛋白的表达。结果KA组均达到Ⅳ~V级惊厥发作,而TSA干预组能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期。HE染色可见KA组明显的神经元凋亡及细胞水肿,伴有较多的炎症细胞浸润,而TSA干预组能减轻神经元凋亡及细胞水肿,同时减少炎症细胞浸润。与对照组比较,KA组神经元凋亡数、小胶质细胞活化数及炎症因子的表达均显著增加(P<0.05),而TSA能抑制KA诱导的改变。相对于0.03 mg/kg TSA干预组,0.1 mg/kg TSA干预组治疗作用更明显(P<0.05)。结论TSA能抑制癫痫后海马神经元凋亡、小胶质细胞活化及炎症因子的表达,同时能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期,从而对癫痫后脑损伤起到保护作用。     

过敏性紫癜患儿血浆可溶性CD146与可溶性血管细胞黏附分子-1检测的意义

目的 探讨可溶性CD146(sCD146)与可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)在过敏性紫癜(HSP)患儿血浆中的表达水平及临床意义.方法 采用ELISA法检测HSP患儿(急性期42例、缓解期39例)及健康对照组儿童(30例)外周血浆sCD146、sVCAM-1水平,比较HSP患儿急性期、缓解期和健康对照组之间的差异以及急性期肾脏受累组、无肾脏受累组之间的差异,并对HSP患儿急性期血浆sCD146与sVCAM-1水平进行相关性分析.应用SPSS 13.0软件进行统计学处理.结果 HSP患儿急性期sCD146、sVCAM-1水平明显高于缓解期和健康对照组,差异均有统计学意义(Pa＜0.01);缓解期sCD146水平仍高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),缓解期sVCAM-1水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);急性期肾脏受累组sCD146、sVCAM-1水平高于无肾脏受累组,差异均有统计学意义(Pa＜0.01);HSP患儿急性期血浆sCD146与sVCAM-1水平呈正相关(r=0.79,P＜0.01).结论 sCD146与sVCAM-1在HSP和紫癜性肾炎的发生发展中起重要作用.动态监测HSP患儿血浆sCD146、sVCAM-1水平对于判定其病情发展及预后有一定意义.     

SAHA对发育期大鼠惊厥后海马TLR4/MYD88信号通路及神经元凋亡的影响

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(即辛二酰苯胺异羟肟酸,SAHA)在惊厥性脑损伤发病中的作用及机制。方法:32只雄性SD大鼠随机分为control组、戊四唑(pentylenetetrazole,PTZ)组、PTZ+10mg/kg SAHA组及PTZ+50 mg/kg SAHA组,通过腹腔注射PTZ制作发育期大鼠惊厥模型,SAHA于PTZ诱导惊厥前2 h腹腔注射给药。本实验中PTZ造模成功率约85%,注射后约30 min到1 h后出现惊厥发作,评估惊厥发作的等级。惊厥后24 h处死大鼠,RT-qPCR及Western blot检测海马组织TLR4、MYD88、NF-κB P65和IL-1βmRNA及相应蛋白的表达;HE染色观察脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元凋亡。结果:(1)PTZ组均达到Ⅳ~V级惊厥发作,而SAHA预处理能减轻惊厥发作的等级;(2)PTZ组大鼠海马组织中TLR4、MYD88、NF-κB P65和IL-1βmRNA及相应蛋白的表达均较对照组显著增高(P0.05),而SAHA预处理能抑制mRNA和相应蛋白表达水平的增高;(3)HE染色可见PTZ组明显的细胞水肿及神经元凋亡,伴有较多的炎症细胞浸润,而SAHA预处理能减轻细胞水肿及神经元凋亡,同时减少炎症细胞浸润;(4)大鼠海马组织中的神经元凋亡数PTZ组较对照组显著增加(P0.05),而SAHA预处理能抑制海马神经元的凋亡;(5)相对于10 mg/kg SAHA治疗组,50 mg/kg SAHA治疗作用更明显(P0.05)。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA能抑制惊厥后TLR4/MYD88炎症信号通路和海马神经元的凋亡,从而减少炎症反应及惊厥性脑损伤。     

MS275对发育期惊厥大鼠p38 MAPK信号通路的调控机制研究

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS275在发育期大鼠惊厥发病中对p38 MAPK信号通路的调控机制。方法 将32只雄性大鼠随机分为对照组、戊四唑（PTZ）组、低剂量MS275组（3?mg/kg）及高剂量MS275组（6?mg/kg）（n=8）。通过腹腔注射PTZ制作发育期大鼠惊厥模型,对照组仅注射生理盐水;MS275在PTZ诱导惊厥前2?h腹腔注射给药。造模成功后24?h,每组取6只大鼠,Western blot法检测海马组织p38、MK2、CREB和IL-6蛋白表达;qRT-PCR法检测p38、MK2、CREB和IL-6 mRNA表达;苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织病理变化;Western blot法检测小胶质细胞活化标志物CD11b的表达。结果 PTZ组大鼠海马组织中p38、MK2、CREB和IL-6 mRNA及其蛋白的表达均较对照组显著增高（P < 0.05）;而MS275能抑制上述指标mRNA及其蛋白在发育期惊厥大鼠中的表达水平（P < 0.05）;6?mg/kg MS275对CREB mRNA及其蛋白、IL-6 mRNA的抑制作用比3?mg/kg MS275更显著（P < 0.05）。HE染色结果可见PTZ组海马组织有明显的神经元凋亡及细胞水肿,伴有较多的炎性细胞浸润;而MS275干预组能减轻发育期惊厥大鼠神经元凋亡及细胞水肿,同时减少炎性细胞浸润。PTZ组小胶质细胞活化明显增多,而MS275能抑制发育期惊厥大鼠小胶质细胞活化（P < 0.05）;且6?mg/kg MS275的抑制作用比3?mg/kg MS275更显著（P < 0.05）。结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS275能抑制发育期惊厥大鼠p38 MAPK信号通路、海马神经元的凋亡和小胶质细胞活化,从而减少炎症反应及惊厥性脑损伤;且MS275的作用可能存在剂量依赖性。