内毒素在小鼠过敏性哮喘模型所起作用的实验研究

目的建立小鼠过敏性哮喘模型,在过敏原的致敏和激发阶段给予不同剂量内毒素(即脂多糖LPS),探讨内毒素在哮喘模型中的作用机制。方法建立BALB/c小鼠哮喘模型,设立实验组和对照组开展后续实验。实验组包括:鸡卵清白蛋白(OVA)致敏,OVA激发组;OVA致敏,LPS激发组;OVA致敏,OVA+LPS联合激发组;LPS暴露于OVA致敏前,OVA激发组;对照组包括试剂对照组和健康对照组。各实验组的LPS剂量均分为高、中、低三个剂量组。通过测定小鼠气道阻力和肺顺应性来反映其肺功能改变;流式细胞术(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数,表征CD4+CD2+5调节性T淋巴细胞(以下简称Treg细胞)的相对比例;荧光实时聚合酶链反应定量测定肺脏和脾脏Foxp3mRNA表达的水平;ELISA法测定血浆总IgE和OVA特异性IgE水平,抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th2细胞因子(IL-4和IL-5)的水平;计数BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞等各类白细胞所占百分比;常规病理切片观察肺组织改变情况。结果结果表明,与哮喘模型组小鼠相比,在LPS各处理组中,总体上能诱导Treg细胞的产生,改善肺功能,降低IgE滴度,降低Th2介导的免疫反应,同时诱导肺部炎症。尤其是在致敏阶段腹腔注射内毒素可以缓解由过敏原诱导的气道炎症和改善肺功能,诱导肺组织和脾组织Foxp3mRNA表达的增加。结论LPS抑制了Th2介导的过敏反应,可能与Foxp3表达量的增加相关,后者诱导Treg细胞增殖,对哮喘症状起到缓解作用。     

小鼠哮喘模型胸腺中胸腺基质淋巴生成素、Foxp3的表达及调节

目的通过建立小鼠哮喘模型，探讨胸腺在过敏性疾病发病机制中的作用，以及胸腺肽干预哮喘模型的作用和可能的机制。方法40只小鼠随机分为哮喘模型组、卵清蛋白（OVA）＋胸腺肽组、对照组和胸腺肽组，每组各10只。①采用OVA腹腔注射和超声雾化吸入建立BALB/c小鼠哮喘模型；②通过血清总IgE水平和肺组织病理学检查评价哮喘模型；③用Real time PCR检测哮喘模型和胸腺肽干预下，小鼠肺组织和胸腺中胸腺基质淋巴生成素（TSLP）以及胸腺Foxp3 mRNA表达变化，并通过血清总IgE水平和肺组织病理学评价胸腺肽干预下哮喘模型的过敏状态。结果①哮喘模型组与对照组相比，血清总IgE浓度明显增高，肺组织病理学检查示气道炎症明显，胸腺和肺组织TSLP mRNA表达均显著增高，胸腺Foxp3 mRNA表达显著降低；②OVA＋胸腺肽组肺组织病理学检查示气道炎症减轻，胸腺TSLP mRNA表达显著低于哮喘模型组。结论 ①OVA哮喘模型胸腺TSLP mRNA的表达水平上调、Foxp3 mRNA的表达水平下调，提示OVA可影响中枢性免疫器官--胸腺；②OVA哮喘模型引起胸腺Foxp3 mRNA表达降低，提示胸腺功能的改变可能与过敏性疾病的发生有关；③胸腺肽可改善过敏状况，其作用机制至少部分是通过胸腺而发挥。     

自身抗体检测在儿童自身免疫性疾病中的意义

目的 研究抗核抗体（ANA）、ANA荧光分型、抗可溶性抗原（ENA）抗体和抗双链DNA（ds-DNA）抗体检测在儿童自身免疫性疾病中的意义。方法 对住院患儿中ANA、抗ENA，或抗ds-DNA抗体至少1项阳性者共135例进行总结，分别计算其阳性预测值（PV）。结果 ANA阳性中自身免疫性疾病的PV=0．36，ANA荧光强度与PV成正比，ANA荧光分型中细颗粒型对于SLE有较高的PV；抗ENA抗体和抗ds-DNA抗体对自身免疫性疾病PV高于ANA。结论 ANA荧光强度，抗ENA抗体和抗ds-DNA抗体阳性对自身免疫性疾病有较高的诊断价值。     

全身型幼年特发性关节炎中性粒细胞自身活化

目的通过检测全身型幼年特发性关节炎(JIA)患儿外周血中性粒细胞(PMN)自身活化水平,研究PMN在全身型JIA病程中的自身活化状况,比较全身型JIA与少关节型JIA,川崎病(KD)和系统性红斑狼疮(SLE)等其他风湿性疾病PMN自身活化区别,并探讨PMN自身活化在全身型JIA中的意义。方法选取临床确诊的全身型JIA18例,少关节型JIA15例,KD10例,SLE9例,另设年龄匹配的正常对照27例。使用二氢若丹明(DHR)荧光染色外周血样本PMN,流式细胞术检测PMN自身活化水平,即DHR分析[活化细胞率和平均荧光强度(MFI)]。结果全身型JIA活动期PMN自身活化率为(33·94±24·95)%,MFI为10·68±5·03,显著高于正常对照组[自身活化率为(8·02±8·11)%,MFI为3·18±1·05,P<0·01];其他风湿性疾病PMN自身活化率和MFI分别为:少关节型JIA[(5·58±2·77)%,3·38±0·69],KD[(10·65±6·65)%,4·19±1·14],SLE[(7·29±2·97)%,3·73±0·87],与正常对照组比较差异均无统计学意义;住院期间复查全身型JIA患儿PMN自身活化率较JIA活动期下降,但差异无统计学意义,出院后第1次随访自身活化率下降至(7·00±2·96)%,MFI为4·32±1·31,与JIA活动期比较,P<0·01。结论PMN在全身型JIA活动期存在明显的自身活化;随着病情缓解,PMN的自身活化率降低;本组其他风湿性疾病DHR分析显示PMN无明显自身活化现象。提示PMN在全身型JIA的发生和发展过程中可能起重要作用;评价外周血PMN自身活化水平,可能为诊断全身型JIA及鉴别其他风湿性疾病提供有价值的实验室指标。