三氧化二砷联合化疗药物对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系杀伤作用的研究

目的观察三氧化二砷(As_2O_3)联合化疗药物对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系的毒性作用和细胞周期的影响,为临床寻找新的治疗手段和合理用药提供依据。方法采用流式细胞术检测单药,即As_2O_3、长春瑞滨、多西他赛、依托泊苷(VP16)或顺铂(DDP),或As_2O_3分别与另一种药物双药联合(同步给予As_2O_3和另一种药物;先予As_2O_3使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期后再予另一种药物)作用于SK-N-SH细胞24 h、48 h后不同处理组的凋亡率和细胞周期分布的差异。结果同步给药双药组的凋亡率均高于相应的单药组的凋亡率;As_2O_3与M期特异性化疗药物(长春瑞滨或多西他赛)联合用药时,非同步给药组即先予As_2O_3使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期后再加用长春瑞滨或多西他赛组的凋亡率高于相应单药组的凋亡率,As_2O_3与非M期特异性化疗药物(VP16或DDP)联合用药时,同步给药组即As_2O_3与VP16或DDP同步给药组的凋亡率高于相应单药组的凋亡率。联合用药组随着细胞凋亡率的变化,细胞周期的分布也发生了显著的变化,表现为随着SK-N-SH细胞凋亡率的增高,处于G2/M期的细胞比例减少。结论 As_2O_3与化疗药物联合用药或许能提高它们对SK-N-SH细胞的杀伤效果;当As_2O_3与M期特异性化疗药物(长春瑞滨或多西他赛)联合用药时,宜先采用As_2O_3的周期阻滞作用将NB细胞周期阻滞在G2/M期后再加M期特异性化疗药物的非同步给药方式;而当As_2O_3与非M期特异性化疗药物(VP16或DDP)联合用药时,宜采用同步给药的方式以提高杀伤效果。     

不同培养条件对真菌菌丝形成影响的比较研究

目的 探讨不同培养条件在体外诱导实验中对白色念珠菌、烟曲霉菌菌丝形成率的影响.方法 通过添加胎牛血清(FBS)改变培养基成分、调整孢子浓度及培养时间诱导两种真菌菌丝的形成,以了解不同培养条件对真菌菌丝形成率的影响.结果 白色念珠菌在含10％ FBS的RPMI1640液体培养基中,孢子密度在1×106个/mL,培养时间为3h时菌丝形成率最高,为(99.3±0.6)％(P＜0.05);而烟曲霉菌在相同的培养基及孢子密度相同的条件下,培养时间为5h时,菌丝形成率最高,为(99.6±0.4)％(P＜0.05).结论 优化培养条件可提高白色念珠菌、烟曲霉菌菌丝形成率并缩短培养时间.     

顺铂及依托泊苷对神经母细胞瘤细胞中Trk基因家族表达的影响及临床意义

目的神经母细胞瘤(NB)是儿童常见的实体瘤,而三种不同Trk基因的表达变化与NB的预后及转归关系密切;为研究如何优化化疗药物疗效以提高NB患儿的生存率,本文检测了顺铂(DDP)及依托泊苷(VP16)对人NB的SK-N-SH细胞系的杀伤作用及对细胞中Trk基因家族表达的影响。方法通过CCK-8药物诱导细胞毒性实验检测不同浓度梯度的DDP及VP16对SKN-SH细胞的杀伤作用以及半数杀伤浓度(IC50);用qRT-PCR方法检测DDP及VP16在不同浓度下分别作用24 h及48 h后,对SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB和TrkC基因表达变化。结果(1)IDDP及VP16药物浓度的增加与其对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈线性关系;且48 h比24 h杀伤作用更明显。(2)SK-N-SH细胞中TrkA及TrkC的表达均随着DDP浓度和作用时间的增加而上调,尤其在10μg/mL浓度、24h最明显;而TrkB的表达在24 h时随着DDP浓度增加而上调,48 h时该促进作用不明显;(3)SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB及TrkC的表达亦随着VP16浓度和作用时间的增加而上调。结论 DDP及VP16对NB细胞SK-N-SH有明显杀伤作用并对其Trk基因家族的表达有影响。     

放疗及二次根治手术对儿童横纹肌肉瘤的疗效影响分析

目的探讨儿童横纹肌肉瘤(RMS)的治疗手段与疗效、预后的关系。方法回顾性分析中山大学孙逸仙纪念医院儿科2013年1月—2017年12月收治的24例儿童RMS的临床资料,总结儿童RMS的治疗策略、疗效,分析放疗及二次根治手术对儿童RMS预后的影响。结果初治儿童RMS共24例,男18例,女6例,发病中位年龄3.6岁(11个月~11岁),其中原发于颌面部14例,颈部1例,腹盆腔2例,肢体4例,生殖系统2例,肝脏1例;病理类型包括胚胎型22例,腺泡型2例;低危组3例,中危组18例,高危组3例。所有患儿均按横纹肌肉瘤全国协作组重庆方案(RMS-CQ-2009)进行化疗,并依据实际病情及疗效反应选择性采取根治手术及放疗。截止2020年6月1日共9例患儿死亡,3年总体生存率(OS)为65.7%。化疗+放疗组的3年OS(80.0%)高于化疗+二次根治术组(50.0%)(χ²=3.896,P=0.048)。对于颌面部RMS,行二次根治术的患儿3年0S(25.0%)低于未行二次根治术的患儿(80.0%)(χ²=6.521,P=0.011);行放疗的患儿3年OS(80.0%)高于未行放疗的患儿(25.0%)(χ²=4.168,P=0.041)。对于非颌面部RMS,行二次根治术和未行二次根治术的患儿3年OS分别是68.6%和66.7%(χ²=0.035,P=0.852),行放疗和未行放疗的患儿3年OS分别为53.3%和80.0%(χ²=0.076,P=0.783)。结论放疗有助于提高儿童RMS生存率,二次根治术并不能显著改善颌面部RMS的预后。     

三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞Trk基因家族表达的影响

目的 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童常见的实体瘤,三氧化二砷(Arsenic troxide,As2O3)现已广泛应用于治疗实体肿瘤,为了探讨As2O3治疗NB的可行性,本研究检测As2O3对人SK-N-SH细胞周期及Trk基因家族表达的影响.方法 通过流式细胞术检测4 μmol/L浓度的As2O3作用48 h后SK-N-SH细胞细胞周期的变化;qRT-PCR法检测As2O3在1、2和4μmol/L浓度下对SK-N-SH细胞分别作用24和48 h后,对SK-N-SH细胞内TrkA、TrkB和TrkC基因表达的影响.结果 用4μmol/L As2O3作用48 h后,SK-N-SH细胞的G2/M期细胞比例为(30.93士0.34)％,而对照组G2/M期细胞比例为(5.29±0.23)％,两组间差异有统计学意义,P＜0.01.1μmol/LAs2O3作用SK-N-SH细胞24 h的TrkA比值为1.43±0.17,48 h为3.88±0.26,两者比较差异有明显统计学意义,P＜0.01,但随着As2 O3浓度继续增大至4μmol/L TrkA反而下调.SK-N-SH细胞的TrkB及TrkC基因表达均随着As2 O3浓度增加而上调,4μmol/L浓度下与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),48 h比24 h上调更明显.结论 初步研究结果表明,As2 O3不仅对NB的SK-N-SH细胞有明显杀伤作用,使其阻滞在G2/M期,还能使与NB预后密切相关的Trk基因的表达发生变化,As2O3有用于NB治疗的潜在临床价值.     

儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症临床特征与 BRAF V600E基因突变的相关性分析

目的:总结儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)的临床特征,分析 BRAF V600E基因突变与LCH的相关性。 方法:回顾性分析中山大学孙逸仙纪念医院儿科肿瘤专科2013年4月至2019年12月收治的60例LCH患儿的临床特征,其中有39例患儿完善 BRAF V600E基因检测,分...     

小剂量重组人白细胞介素-2维持治疗对肿瘤患儿免疫细胞亚群的影响

目的：探讨小剂量重组人白介素-2(r IL-2)维持治疗对恶性实体肿瘤患儿免疫细胞亚群的影响及相关副反应。方法：选取2012年12月-2017年11月在本科治疗的22例肿瘤患儿,男女各11例,开始IL-2治疗的中位年龄9(3-16)岁,给予小剂量r IL-2免疫治疗前均完成全部手术及放化疗,其中完全缓解17例,部分缓解5例。化疗结束1个月后开始使用r IL-2小剂量维持治疗：4×10⁵ IU/(m²·d),隔日皮下注射,每周3次,共1年。每3个月行免疫细胞亚群检测至治疗终止,同时随访患儿病情转归及治疗相关副反应。结果：22例患儿经r IL-2治疗后外周血T淋巴细胞(CD3⁺)、自然杀伤细胞(CD3-CD56⁺)、辅助性T细胞(CD3⁺CD4⁺)、杀伤性T细胞(CD3⁺CD8⁺)的绝对值及辅助T细胞/抑制T细胞比例均显著升高(均P<0.05),而调节性T细胞(CD4⁺CD25^+...     

真菌不同接触方式对自然杀伤细胞表面受体表达的影响

目的本研究通过Transwell隔离培养体系探讨烟曲霉菌、白色念珠菌的不同菌体形态及不同接触方式对脐血来源细胞因子诱导自然杀伤(NK)细胞表面受体表达的影响,揭示NK细胞抗真菌与抗肿瘤作用机制的异同。方法利用聚碳酯膜孔径0.4μm的Transwell隔离培养系统,将实验组分为直接混合培养组(即直接接触组)和隔离组(即间接接触组);将NK细胞与真菌(烟曲霉菌孢子或菌丝、白色念珠菌孢子或菌丝)、K562细胞按10∶1比例进行直接混合和隔离培养,每组3个重复孔;培养6 h后通过流式细胞仪检测各组NK细胞胞膜受体NKG2D、TLR2及CD94/NKG2A的表达。结果烟曲霉菌、白色念珠菌的孢子和菌丝的直接接触作用均可上调NK细胞表面受体TLR2的表达(P值均<0.05),但间接接触作用对TLR2的表达无影响(P值均>0.05),真菌的直接、间接接触作用对NKG2D、CD94/NKG2A的表达均无影响(P值均>0.05);与K562细胞的直接接触可上调NK细胞表面受体NKG2D的表达(P值<0.05),但对TLR2、CD94/NKG2A的表达无影响(P值均>0.05)。结论真菌可以直接接触作用的方式通过上调TLR2的表达激活NK细胞,这与肿瘤细胞激活NK细胞的方式不同;真菌及肿瘤细胞的刺激均对NK细胞胞膜受体CD94/NKG2A的表达无影响。     

三氧化二砷联合长春瑞滨、多西他赛对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系杀伤作用和细胞周期的影响

目的观察三氧化二砷(As_2O_3)、长春瑞滨(vinorelbine)、多西他赛(docetaxel)对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系的杀伤作用和细胞周期的影响,为临床寻找新的治疗手段及合理用药提供依据。方法采用流式细胞术检测经过As_2O_3、vinorelbine或docetaxel作用后SK-N-SH细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化,探讨它们对SK-N-SH细胞的杀伤作用和细胞周期的影响。结果As_2O_3作用48h、72h、96h和120h时SK-N-SH细胞的凋亡率分别为(10.91±2.27)%、(23.85±5.52)%、(36.61±14.75)%、(52.93±2.47)%;As_2O_3可使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M,作用48h时处于G2/M期阻滞的细胞比例最高(26.54%±5.67%);Vinorelbine和docetaxel对SK-N-SH细胞具有杀伤作用,它们各自作用于SK-N-SH细胞的IC50分别为35nmol/L和90nmol/L;以不同浓度的vinorelbine或docetaxel作用于SK-N-SHI细胞48h,随着G2/M期阻滞的比例增高,SK-N-SH细胞的凋亡率随之升高。结论 As_2O_3对SK-N-SH细胞的杀伤作用具有时间依赖性,As_2O_3可使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期。Vinorelbine和docetaxel对SK-N-SH细胞的杀伤作用和G2/M期阻滞有关,属于G2/M期特异性杀伤药物。     

复发性或难治性神经母细胞瘤的治疗进展

<正>神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童时期最常见的颅外实体肿瘤之一,占小儿恶性肿瘤的8%～10%;其起源于神经嵴细胞,可发生于交感神经系统的任何部位,恶性程度高、进展快,大部分患