MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育

目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region, UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G₁/G₀期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。     

4种检测血清抗环瓜氨酸肽抗体的方法学比较

目的 评估4种抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体检测方法,并筛选出符合临床要求的检测方法。方法 分别用酶联免疫法、免疫胶体金法、免疫透色比浊法和化学发光法检测该院有关节炎症状的100例患者血清抗CCP抗体。以国家卫生健康委临床检验中心室间质评采用的定性方法(酶联免疫法)作为参比方法,分别比较其他3种方法与其检测结果的符合率。根据WS/T505-2017指南对符合率较高的方法进行精密度和准确度评价。结果 免疫胶体金法、免疫透色比浊法和化学发光法与酶联免疫法的阳性符合率分别为：100.0%[95%CI(83.9%,100.0%)]、90.0%[95%CI(69.9%,97.2%)]和100.0%[95%CI(83.9%,100.0%)];阴性符合率分别为：62.5%[95%CI(51.6%,72.3%)、82.5%[95%CI(72.7%,89.3%)]和98.8%[95%CI(93.1%,99.8%)];总体符合率分别为：70.0%[95%CI(60.4%,78.1%)]、84.0%[95%CI(75.6%,89.9%)]和99.0%[95%CI(94.4%,99.8%)];κ值分别为：0.4...     

乌体林斯联合顺铂治疗恶性胸腔积液的临床研究

目的研究乌体林斯联合顺铂治疗恶性胸腔积液的临床疗效.方法将64例恶性胸水患者随机分为治疗组和对照组各32例,治疗组用乌体林斯加顺铂胸腔内注射,对照组单用顺铂胸腔内注射,观察治疗前后的近期疗效、活动状况、外周血免疫指标变化和不良反应.结果治疗组的近期疗效、活动状况改善程度均明显优于对照组(P<0.01);治疗组治疗后的CD3、CD4、CD4/CD8及自然杀伤细胞活性均高于治疗前(P<0.05),对照组免疫指标治疗前后无明显变化,治疗后两组免疫指标比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组不良反应仅为发热、胸痛,而对照组出现骨髓抑制、胃肠道反应和胸痛. 结论乌体林斯联合顺铂胸腔注射治疗恶性胸水有较好的临床疗效.     

星莲合剂治疗恶性组织细胞增生病1例报告

我们用星莲合剂治疗1例重症恶性组织细胞增生病收到良好效果,现报道如下。患者:男,21岁,教师。因发热3~+月,加重10天,左腹股沟出现包块1月,于1989年11月12日住院。查体:体温40℃,脉搏90次/分,吸呼24次/分,血压13.3/11.9Kpa。下腹正中、左腹股沟、左大腿、阴     

四种肺科疾病外周血T淋巴细胞亚群检测的意义

对四种常见肺科疾病外周血T细胞亚群检测结果如下：结核性胸膜炎CD~+_3、CD~+_4、4／8（CD~+_4／CD~+_8）比值非常显著降低（P＜0.01），CD~+_8显著降低（P＜0.05），慢性肺心病组CD~+_3、CD~+_4、4／8比值显著降低（P＜0.01），文学组CD~+_8明显下降而4／8比值明显升高（P＜0.01），肺癌组CD~+_4、4／8比值明显下降（P＜0.01）．提示上述四种肺科疾病在发生发展中均存在细胞免疫功能紊乱和失调．临床上不失时机地使用免疫调节剂，是应该和必要的．     

雾化吸入布地奈德对肺纤维化大鼠肺组织MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的探讨布地奈德雾化吸入对博莱霉素（BLM）致肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分成博莱霉素模型组（BLM组）、生理盐水空白对照组（NS组）和布地奈德干预组（Bud组）各15只,BLM组和Bud组气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化,NS组在相同条件下灌注生理盐水。气管内灌注药物后,第0~6天Bud组给予布地奈德雾化吸入,其余组在相同条件下给予生理盐水雾化吸入。各组分别于第7、142、8天随机处死5只,收集肺组织作切片、行HE及Masson染色,判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;行免疫组化染色,检测MMP-2和TIMP-2在肺组织的表达水平。结果与NS组相比,Bud组第7、14、28天肺组织的肺泡炎和肺纤维化程度明显加重（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、14天肺组织的肺泡炎程度明显减轻（P〈0.05）,第7、14、28天肺纤维化程度明显减轻（P〈0.05）;与NS组相比,BLM组第7、14、28天MMP-2和TIMP-2表达明显增加（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、142、8天MMP-2和TIMP-2表达明显降低（P〈0.05）。结论布地奈德雾化吸入可减轻BLM致肺纤维化大鼠的肺泡炎和肺纤维化程度,其干预机制可能为降低肺组织内MMP-2及TIMP-2的表达,并在一定程度上调整MMP-2/TIMP2的比值。     

1种检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术构建

目的构建1种检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术。方法将多重连接探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术与实时PCR技术相结合,优化杂交和连接反应条件,建立MLP-RT-PCR反应步骤。设计检测HBV耐药相关基因5个突变位点的4类MLPA探针,根据反应特异性筛选出高特异性探针。同时对5个突变位点进行检测,考察该方法的特异性。检测不同浓度突变株的样本考察该方法的灵敏度。结果统一优化了各个位点的探针反应条件,提高了检测通量;选择单个错配碱基的MLPA探针,可提高检测特异性,5个突变位点检测之间无交叉反应;该方法的扩增效率可达99%～105%,可检测最低0.1%突变率的样本。结论成功构建了检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术,该方法可在1个反应管中同时检测HBV耐药相关基因的5种突变形式,1次检测时间为4～5 h,为临床提供1种能够快速检测HBV耐药相关基因点突变的方法。     

重庆市10～12岁儿童年龄别与性别别微量元素参考值与微量元素之间相关性研究

目的 探讨重庆地区10～12岁儿童微量元素参考值范围及微量元素间的相关关系。方法 采取分层整群抽样方法在重庆城乡地区抽取10～12岁儿童2058例,采集静脉血,测量静脉全血微量元素水平。采用非参数参考值估计方法计算儿童微量元素参考值,并采用广义线性回归模型分析微量元素间的相关关系。结果 研究结果表明钙(Ca)、锌(Zn)、镁(Mg)、铜(Cu)和铁(Fe)的总体参考值范围分别为1.35～2.13 mmol/L,56.42～107.00μmol/L,1.23～1.81 mmol/L,8.25～22.37μmol/L和6.14～9.45mmol/L。女性儿童Mg、Cu和Fe的水平均低于男性儿童(P<0.05),城市儿童Zn和Cu的水平高于农村儿童,Ca、Mg和Fe的水平低于农村儿童(P<0.01)。Ca和Cu的水平随着年龄的增加呈现降低的趋势,Zn、Mg和Fe的水平随着年龄的增加呈现增加的趋势。广义线性回归模型显示Ca、Zn、Mg、Cu和Fe五种微量元素间均存在显著的相关关系(P<0.01)。结论 该研究建立了青春期儿童年龄-性别别Ca、Zn、Mg、Cu和Fe的参考值范围...