安氏隐孢子虫在HCT-8和AGS细胞中增殖效果的研究

目的比较安氏隐孢子虫（Cryptosporidium andersoni）在人结肠腺癌（human ileocecal adenocarcinoma,HCT-8）细胞和人胃腺癌（humanstomachadenocarcinoma,AGS）细胞中的增殖。方法取培养至对数生长期的HCT-8细胞和AGS细胞,接种于6孔培养板中,待细胞生长融合至60％～70％时,加入2．5×10^5个安氏隐孢子虫卵囊,培养至24h和48h,以Giemsa染色法和Real—time PCR技术检测虫体在细胞中的增殖。结果Giemsa染色法观察24h和48h HCT-8细胞中虫体数量均高于ACTS细胞（P〈0.05）。Real—time PCR技术测得24h和48h HCT-8细胞中安氏隐孢子虫卵囊COWP基因拷贝数均高于AGS细胞（P〈0.05）。结论与AGS细胞相比,以HCT-8细胞作为体外感染模型更利于安氏隐孢子虫的增殖。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿潮气肺功能检测及临床意义

对42例呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿(观察组)急性期、恢复期及20例正常组婴儿进行肺功能检查.结果 与正常组比较,观察组急性期呼吸频率(RR)升高,每千克体质量潮气量(Vt/kg)、吸呼时间比(tI/tE)、达峰时间比(tPTEF/tE)及达峰容积比(vPTEF/vE)下降(P<0.05,<0.01);与恢复期比较,RR、tI/tE、tPTEF/tE及vPTEF/vE有统计学差异(P<0.05);恢复期RR与正常组比较无统计学差异,但tPTEF/tE及vPTEF/vE仍有差异(P<0.05).提示RSV毛细支气管炎急性期肺功能主要表现为小气道阻塞性通气障碍,恢复期仍有小气道功能异常;潮气呼吸肺功能检查是判断其病情、评估疗效及预后实用和可靠的方法.     

诱导痰在急性毛细支气管炎中运用的安全性分析

1992年Pin等首先将痰液诱导方法用于支气管哮喘病人,以后许多学者对其进行了广泛的研究,但大部分受检者为成人和大于6岁的儿童,有关在婴幼儿中的运用报导较少,诱导痰对于儿童安全性仍存在争议。本文主要对诱导痰液分析方法用于急性毛细支气管炎（毛支）婴幼儿的安全性进行探讨。     

中性粒细胞、白介素-8和弹性蛋白酶在急性毛细支气管炎发病中的作用

目的 探讨急性毛细支气管炎(毛支)患儿气道中中性粒细胞、白介素8(IL-8)和弹性蛋白酶(NE)在发病中的作用及相互关系.方法 2006年11月至2007年4月常州儿童医院诊断为急性毛支的41例患儿和对照组8例为研究对象,其中急性毛支根据入院lowell评分为莺度组(≥10分,10例)和轻度组(<10分,31例),所有毛支患儿在急性期和恢复期以及对照组进行诱导痰的细胞分类检查和ELISA方法检测IL-8和弹性蛋白酶.结果 急性毛支患儿诱导痰细胞中中性粒细胞明显升高,急性发作期诱导痰中性粒细胞数明显高于缓解期和对照组,毛支患儿缓解期中性粒细胞数明显高于对照组(P均<0.05);急性毛支患儿诱导痰中IL-8、弹性蛋白酶浓度与对照组比较有明显升高(P均<0.01).结论 中性粒细胞在急性毛支发病中扮演重要角色,IL-8趋化中性粒细胞聚集于气道,中性粒细胞产生和释放弹性蛋白酶,三者相互影响,共同参与急性毛支的发病.     

高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立与评价

目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定糖化血红蛋白(GHb)方法,并对其进行评价.方法:以Bio-Rex 70阳离子交换树脂为填料,在HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定GHb,对其分析性能进行评价.对50例健康人和50例糖尿病患者标本中糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的含量进行测定.结果:Hb、HbA0和HbA1c的吸收...     

舒利迭吸入与普米克联合喘康速吸入治疗儿童哮喘疗效对比观察

舒利迭(沙美特罗与氟替卡松粉吸入剂,seretide)是一种新型的糖皮质激素和吸入型长效β2受体激动剂的复方制剂,我们于2003年8月开始在我院哮喘门诊应用沙美特罗50 μg 丙酸氟替卡松100 μg粉吸入剂(商品名舒利迭,系葛兰素史克生产),治疗中度哮喘25例,疗效满意,报告如下.     

急性呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎白三烯测定及临床意义和感染后气道高反应性的临床干预

<正>毛细支气管炎(以下简称毛支)是2岁以下婴幼儿常见的呼吸道感染性疾病,以咳嗽、呼吸急促、喘憋为主要临床表现,病原体多数为呼吸道合胞病,且临床部分患儿出现反复喘息。本研究通过孟鲁斯特和布地奈德来干预毛细支气管炎后反复喘息的发生,现报道如下。     

HbA1c和HbA0的分离纯化

目的从健康人红细胞分离并纯化血红蛋白A1c（HbA1c）和血红蛋白A0（HbA0）。方法采集健康人全血,分离红细胞并制备溶血液,采用弱酸阳离子交换层析法分离HbA1c和HbA0,并用硼酸琼脂糖亲和层析法分别纯化。结果健康人红细胞溶血液采用弱酸阳离子交换层析法手工装柱分离提取HbA1c和HbA0峰值部分,高效液相色谱（HPLC）法测定纯度分别为79．78％和97．42％;再经硼酸琼脂糖亲和层析分别纯化,HbA1c纯度可达94．3％,HbA0纯度可达99．7％。结论单一的离子交换方法分离糖化Hb并不理想,必须与亲和层析结合,才能得到较高纯度HbA1c和HbA0。     

哮喘儿童不同时期血清白细胞介素-8、白细胞介素-17及痰液中性粒细胞的变化

目的 探讨白细胞介素(interleukin,IL)-8、IL-17及气道中性粒细胞在儿童哮喘发病中的作用.方法 2007年1月至2009年1月,常州市儿童医院收治的符合儿童哮喘诊断,经过诱导痰液检测的12例非嗜酸粒细胞哮喘患儿为哮喘组;以12例健康儿童为对照组.对哮喘组患儿急性期、恢复期及对照组进行诱导痰的细胞分类检查和ELISA方法检测血清IL-8和IL-17浓度.结果 哮喘急性期患儿血清中IL-8[(357.84 ±215.36) pg/ml]、IL-17[(62.76 ±44.13) pg/ml]及诱导痰的中性粒细胞百分比[(43.14±5.79)％]明显高于缓解期[(164.95 ±60.22) pg/ml、(34.57±11.82) pg/ml、(23.25±3.75)％]及对照组[(88.68±38.76) pg/ml、(20.35±10.02) pg/ml、(13.34±3.21)％],差异有统计学意义(P＜0.01);缓解期IL-8、IL-17及诱导痰的中性粒细胞百分比仍高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 IL-8、IL-17趋化中性粒细胞聚集于气道,参与加重支气管哮喘发作.     

刚地弓形虫绿色荧光蛋白突变株的构建

目的构建稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的弓形虫突变株,探讨以其检测宿主细胞感染率的效果。方法在人子宫颈癌(HeLa)细胞中培养弓形虫RH株速殖子,电穿孔法向虫体导入质粒ptubP30-GFP/sag-CAT,氯霉素和极限稀释法筛选稳定表达P30-GFP融合蛋白的突变株,RT-PCR法和荧光显微镜检测GFP蛋白在虫体内的表达。HeLa细胞分别感染1×104～1×107个突变株虫体,24 h后,显微镜计数各孔10个高倍镜视野下具有GFP荧光的HeLa细胞数。流式细胞仪检测纳虫泡,评估HeLa细胞感染率。结果导入ptubP30-GFP/sag-CAT质粒后,经氯霉素筛选获得阳性克隆。RT-PCR检出虫体GFP基因表达,镜下可见GFP荧光聚集于虫体外膜。HeLa细胞感染率随虫体接种量的增多而增加,接种1×104～1×107个虫体24 h后,具有GFP荧光的HeLa细胞数分别为(14±6)、(133±45)、(332±93)和(443±90)个;流式细胞仪检测HeLa细胞感染率分别为(0.49±0.09)%、(8.76±0.50)%、(21.02±1.49)%和(39...