大鼠肝肠联合移植对移植肠内ATP酶、AKP和AChE活性的影响

采用肝/小肠联合移植模型,观察对移植肠ATPase、AKP和AChE活性的影响,结果发现肝小肠联合移植与单纯小肠移植相比①前者能延长受体动物的存活期,并对移植小肠产生的免疫排斥反应有明显的减轻和延迟作用;②肝小肠联合移植的移植物内ATPase、AKP和AChE活性反应较好。结果表明上述3种酶活性的改变能相应地反映移植器官产生免疫排斥反应的程度和受体动物的生存状态,并可以作为器官移植后临床监测中的一种辅助措施。     

外周神经损伤后对大鼠脊髓运动神经元及背根节感觉神经元的影响

大鼠左腓总神经离断后与胫神经端侧吻合,于术后第1至8周取L4～5脊髓和背根节（DRG）做冰冻切片,分别显示前角运动神经元（SMN）AChE活性和DRG神经元NOS活性。结果发现;①正常鼠SMN－AChE活性中－强度阳性反应。实验组外侧核SMN－AChE活性和阳性细胞数,于术后2～3周比正常者明显减低,有的SMN－核周体出现空泡样变性;术后4～8周,SMN酶活性和阳性细胞数渐增,并明显高于正常者。同体对照组与实验组同期比较,SMN酶活性相对较弱。②正常鼠部分中－小型DRG神经元NOS活性为中－强度阳性反应。实验组于术后第1～4周,NOS活性和阳性细胞数较正常者明显增高;术后第5～8周其渐趋正常。对照组DRG神经元NOS活性表达较强及与实验组有相应的变化梯度。二组DRG内均见到空泡样变性的神经元核周体。结果提示,坐骨神经慢性损伤所产生SMN－AChE活性增强,可能是轴突再生的反应,并对由NO介导的一级感觉信息传导有一定影响。     

胃化学性炎性痛时幽门括约肌肠神经系统内一些神经活性物质的变化

采用组织化学和免疫组织化学技术,研究大鼠幽门括约肌内NOS,AChE,VIP和CGRP阳性神经元成分的分布及其在甲醛致胃炎性痛时的变化,拟阐明括约肌内肠神经系统(ENS)中一些神经成分与胃肠运动功能的相互关系.结果发现:①正常括约肌黏膜下层有散在的含AChE和NOS神经元胞体.括约肌肌层有含NOS和AChE神经丛,内含数个神经元胞体;也可见个别CGRP和VIP免疫反应性神经元胞体.肌层内四种阳性纤维丰富.在肌纤维增厚的括约肌部位这些神经元成分特别丰富.②甲醛致胃炎性痛鼠,括约肌黏膜下神经丛及肌间神经丛NOS,AChE,VIP神经元阳性反应产物(平均光密度)均比对照组显著降低(P＜0.01),但CGRP较对照组升高(P＜0.01).结果提示:ENS中上述这些神经元成分可能参与幽门括约肌活动和胃肠运动的调控机制.     

先天性巨结肠病结肠壁内SP免疫电镜研究

本实验取5例小儿先天性巨结肠病手术标本，含近端结肠(扩张段)及远端结肠(狭窄段)，2例非本病的“正常”对照直肠标本，然后以4％多聚甲醛-0．2％戊二醛-0．2％苦味酸液冰箱内固定3天，振动切片40μm，按我室改良的PAP法显示SP免疫反应性。SP抗体(1：8000)4℃冰箱内孵育7天，羊抗兔IgG(11200)、PAP(11400)，25℃各2h，DAB显色后入1％锇酸冷固定1h，常规电镜脱水，平板包埋，聚合后取肌间神经丛部位超薄切片，电镜观察。     

电针对大鼠内脏痛结肠壁、背根节和脊髓内乙酰胆碱的影响

目的:观察电针治疗内脏痛时结肠壁、背根节和脊髓内胆碱酯酶(AchE)阳性神经元成分的变化,以探讨胆碱酯酶(AchE)阳性神经元成分在痛觉传递中的作用及电针镇痛的机制。方法:26只SD大鼠随机分为正常对照组(6只)、内脏痛组(10只)和电针加内脏痛组(10只)。电针取双侧"足三里"穴,运用酶组织化学技术方法,观察电针对福尔马林诱导的大鼠内脏疼痛时脊髓背根节和结肠壁内胆碱酯酶(AchE)阳性神经元成分的影响。结果:内脏痛组大鼠在注射福尔马林后,结肠壁、背根节和脊髓内胆碱酯酶(AchE)阳性神经元成分显著高于正常组(P<0.01);而电针加内脏痛组,结肠壁、背根节和脊髓内胆碱酯酶(AchE)阳性神经元成分显著低于内脏痛组(P<0.01)。结论:电针对大鼠急性盆腔内脏痛具有预防性治疗作用,Ach可能参与了电针对内脏痛的调节作用。     

大鼠瘙痒模型中瘙痒信号的初级传入通路追踪研究

目的建立大鼠瘙痒模型,观察瘙痒信号的外周传入部位。方法大鼠颈背部皮内注射2%5-羟色胺(5-HT)建立大鼠瘙痒模型。1周后,随机挑选4只大鼠行颈背部皮内注射辣根过氧化物酶(HRP),再用神经束路追踪术(TMB法)观察大鼠颈2~5(C2~C5)背根神经节(DRG)内HRP阳性细胞的分布。结果DRG中HRP阳性细胞呈散在分布,C3 DRG中阳性细胞最多见,C4中较少,C2,C5中缺乏。结论大鼠颈背部中线区域的瘙痒信号主要通过C3 DRG传入脊髓。     

胃起搏对大鼠胃窦肌间神经丛单胺氧化酶mRNA表达的影响

目的研究胃窦肌间神经丛中单胺氧化酶mRNA表达,探讨5羟色胺(5-HT)在胃起搏机制中的作用。方法通过手术建立Wistar大鼠胃起搏模型(近远端胃各缝制一对电极),分为起搏组(n=10)和对照组(n=6)。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测起搏组和对照组胃窦肌间神经丛中MAO-A mRNA、MAO-B mRNA的表达量,以恒定表达的β-actin作为内参照。计算MAO-AmRNA、MAO-B mRNA与β-actin mRNA表达积分光密度值的比例(MA/B,MB/B),以反映组织中MAO-AmRNA、MAO-B mRNA的相对表达量。结果RT-PCR研究显示起搏组MAO-A mRNA表达显著弱于对照组,起搏组MA/B比值明显较对照组较少(0.37±0.11vs0.95±0.57,P<0.001);而起搏组MAO-B mRNA表达与对照组无差别,两组间MB/B比值比较也无显著性意义(0.97±0.24vs1.01±0.58,P>0.05)。结论胃起博后胃肌间神经丛内单胺氧化酶mRNA表达量明显减少,表明胃窦肌间神经丛内5-HT可能在胃起搏中发生了重要作用。     

改良PAP技术在胃肠道及皮肤内肽能神经定位中的应用

Sternberger(1970)PAP技术是目前应用广泛的免疫组织化学方法，多用在中枢研究，对胃肠道及皮肤等外周组织内神经肽的显示尚有困难。本文根据其基本程序作了一些改良。     

胃起搏对大鼠胃窦肌间神经丛5-羟色胺能神经的影响

背景:胃起搏治疗胃动力障碍性疾病已引起广泛关注,但其作用机制尚不清楚。目的:观察胃起搏后胃窦肌间神经丛5-羟色胺(5-HT)能神经的活性变化,探讨胃起搏促胃动力作用的神经化学机制。方法:建立Wistar大鼠胃起搏模型,将大鼠分为起搏组(n=10)和对照组(n=6)。选用适宜的起搏参数以控制起搏组胃电慢波,1h后取胃窦组织,以免疫组化方法结合图像分析技术分析5-HT免疫反应阳性产物的分布、数量和免疫反应强度。结果:对照组大鼠5-HT免疫反应阳性神经纤维以肌间神经丛和节间束中稍多,神经节内阳性神经细胞体少见。起搏组大鼠胃窦组织5-HT免疫反应阳性神经纤维较对照组明显增多,神经节内阳性神经细胞体和带膨体的神经纤维也明显增多,免疫反应增强;肌间神经丛5-HT免疫反应阳性产物面积和平均光密度值均显著高于对照组(P<0.001)。结论:胃起搏后,胃窦肌间神经丛5-HT免疫反应阳性神经纤维和神经细胞体分布增多,5-HT能神经活性增强,表明5-HT能神经可能参与了胃起搏的促胃动力作用。     

NO参与了胃起搏调控胃慢波活动

目的观察NOS抑制剂L-NAME对胃慢波以及刺激能量的影响,旨在探讨胃起搏作用机制。方法通过手术建立Wistar大鼠胃起搏模型,随机分为4组(每组8只),分别腹腔给予不同剂量L-NAME,以生理盐水作对照。应用多导胃肠电记录仪记录胃慢波,L-NAME对胃慢波的影响应用频谱分析方法进行分析。结果大剂量(50mg/kg)注射时,L-NAME能引起胃电紊乱。正常慢波百分比明显降低(55.3%±4.0%),与对照组(91.7%±3.0%)比较,P<0.001。胃起搏仍能纠正胃电紊乱,正常慢波百分比得到改善(90.9%±2.5%),且所需的EPS较对照组明显升高(878.1±11.4vs537.5±91.6ms×mA,P<0.001)。L-NAME诱发的胃电节律失常以胃电过缓多见(41.3%±1.8%)。但给小剂量L-NAME(12.5mg/kg、25mg/kg)时,正常慢波百分比变化不明显(87.4%±4.9%、86.3%±5.6%),与对照组比较(91.7%±3.0%)差异无显著性;其慢波被控制时所需EPS分别为(487.5±64.1、550±53.5ms×mA),与对照组比较(537.5±91.6ms×mA),P>0.05。结论NOS抑制剂L-NAME能引起大鼠胃电紊乱,增大刺激能量能纠正之,表明NO可能参与了胃起搏对胃慢波活动的调控作用。