826例0岁至学龄前健康儿童外周血淋巴细胞亚群分布的调查分析

目的 调查分析0岁至学龄前健康儿童外周血淋巴细胞亚群的分布。方法 826例0岁至学龄前汉族儿童分为新生儿组、婴儿组、幼儿组、学龄前组,使用流式细胞术检测各组外周血淋巴细胞亚群。结果 CD3⁺细胞、CD3⁺CD4⁺细胞、CD3^-CD19⁺细胞和CD4⁺/CD8⁺在0岁至学龄前儿童不同性别之间的差异具有统计学意义（P < 0.05）,CD3^-CD19⁺细胞以女童较低,其他3个指标以女童较高;CD3⁺、CD3⁺CD4⁺及CD4⁺/CD8⁺均以新生儿组最高,其中CD3⁺CD4⁺及CD4⁺/CD8⁺含量随年龄增长逐渐降低,至学龄前最低（P < 0.05）;CD3^-CD19⁺和CD3^-CD16⁺CD56⁺细胞含量以新生儿组最低,随年龄增长而增高,CD3^-CD16⁺CD56⁺细胞以学龄前组最高,而CD3^-CD19⁺细胞含量在幼儿期达峰值后降低（P < 0.05）;CD3⁺CD8⁺细胞含量以学龄前组最高（P < 0.05）。不同年龄组男童的淋巴细胞亚群分布的变化趋势与不同年龄组儿童的规律一致;在女童中,CD3⁺CD4⁺及CD4⁺/CD8⁺含量也是以新生儿组最高（P < 0.05）。结论 淋巴细胞亚群在不同年龄、性别健康儿童之间的分布不同,建议按年龄、性别分别建立参考值。     

登革热不同病程中核酸、NS1抗原及IgM/IgG抗体测定的价值

目的探讨核酸、NS1抗原和Ig M/Ig G抗体在登革热(DF)不同病程中的检测价值,为合理选择DF检测项目提供科学依据。方法以开始发热为病程第1天,收集138例DF住院患者不同病程的血清标本共254例,以实时荧光PCR法检测登革病毒核酸,免疫层析法分别检测登革病毒特异性NS1抗原和Ig M/Ig G抗体,分析这4个指标在DF不同病程中的诊断价值。结果核酸总阳性率为78.7%,其中第1~5天核酸阳性率均为100%,第6天开始下降;NS1总阳性率为85.4%,第1~8天均大于80%,第9天开始降低;Ig M抗体总阳性率为68.9%,从第3天开始检出,第5天以后大于80%;Ig G抗体总阳性率为28.7%,第1~7天阳性率均低于20%,第8天开始迅速升高。第1~8天核酸联合NS1检测阳性率均为100%,第7天开始NS1联合Ig M/Ig G检测阳性率为100%。结论核酸、NS1和Ig M/Ig G抗体分别适用于病程早期、中期和后期的检测,而病程早中期核酸联合NS1、后期NS1联合Ig M/Ig G可以实现100%的检出率。     

重组登革病毒包膜蛋白第Ⅲ结构域抑制登革病毒感染的研究

目的通过原核基因工程技术获得登革2型病毒(DENV2)包膜蛋白第Ⅲ结构域(EDⅢ)重组蛋白,检测其抑制登革病毒感染细胞的效率。方法利用聚合酶链反应技术扩增DENV2编码EDⅢ重组蛋白的基因片段,构建pET28b(+)-EDⅢ原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导EDⅢ重组蛋白表达,进行质谱鉴定。将登革病毒感染VeroE6细胞(经EDⅢ重组蛋白孵育),根据空斑减少数量计算EDⅢ重组蛋白对登革病毒感染的抑制率。结果成功表达并纯化EDⅢ重组蛋白。EDⅢ重组蛋白可以抑制登革病毒感染的VeroE6细胞,且抑制率与蛋白水平呈正相关,当蛋白水平为100μg/mL时,病毒抑制率为90.5%。结论 DENV2EDⅢ重组蛋白能够抑制DENV2吸附和感染细胞,为以EDⅢ重组蛋白为靶标研制药物和疫苗提供重要的实验基础。