褪黑素受体1B基因多态性与青少年骨密度的相关性

目的探讨褪黑素受体1B基因(MTNR1B)多态性与骨密度之间的相关性。方法选取140名16~20岁之间的正常女性,采用双能X线骨密度吸收仪测量双侧近端股骨的骨密度。同时,采取外周静脉血,采用试剂盒提取DNA。根据人类单倍体图计划(HapMap)提供的汉族人数据,我们在MTNR1B基因上选取了6个标签SNP(tagSNPs)。通过PCR-RFLP的方法检测褪黑素受体1B基因上6个标签SNP的基因型。采用ANOVA的统计学方法比较不同基因型对应骨密度大小。结果MTNR1B基因6个多态性位点各基因型所对应的骨密度,没有明显差异(P>0.05)。结论褪黑素受体1B基因多态性与骨密度之间没有相关性。     

青少年特发性和先天性脊柱侧凸患者的骨微结构及骨密度比较

目的探讨青少年特发性脊柱侧凸(adolescentidiopathicscoliosis,AIS)、先天性脊柱侧凸(congenitalscoliosis,CS)患者与同年龄正常人骨密度(BMD)的差异,并用高分辨率微焦点CT(microCT)扫描成像,定量研究AIS、CS患者的骨小梁形态计量学特征。方法AIS患者15例,均为女性,年龄12～19岁,Cobb角48°～104°。CS患者16例,男4例,女12例,年龄13～18岁,Cobb角40°～125°。正常对照组35例,均为女性,年龄13～16岁。正常组和术前AIS、CS患者均接受双能X线吸收骨密度仪(DEXA)扫描,评估腰椎和股骨颈BMD状况。对AIS与CS患者的髂骨进行骨形态计量学分析。结果AIS患者腰椎和股骨颈BMD低于正常人,CS患者BMD和骨量(BMC)均低于正常人。CS与AIS患者比较股骨颈BMD和BMC显著降低。microCT中的骨容积比与DEXA下的BMD显著相关。AIS骨组织体积比值(19.9%±3.4%)明显高于CS患者(13.3%±3.0%)。AIS患者骨小梁厚度和骨面积比值与CS患者比较,差异均有统计学意义,骨小梁厚度分别为(155.5±54.9)μm和(108.1±17.4)μm,骨面积比值分别为16.4%±3.3%和22.0%±3.4%。CS患者骨连接度和骨小梁数目低于AIS患者。结论AIS患者骨量低,髂骨骨小梁微结构异常,骨容积比低,骨小梁细小。CS患者BMD与骨小梁微结构均低于正常人和AIS患者。     

青少年特发性脊柱侧凸胸椎形态学的MRI测量及临床意义

目的 通过磁共振成像(MRI)观察青少年特发性脊柱侧凸(AIS)和正常同年龄组青少年胸椎的形态学差异,探讨其临床意义.方法 胸椎轻度侧凸(MS)组患者10例(Cobb角15°～39°),胸椎中度侧凸(SS)组患者10例(Cobb角40°～75°).另选健康青少年10名作为对照(非侧凸组).所有研究对象均为女性,年龄13～14岁.用1.5 T磁共振扫描仪(Sonata,Siemens,Erlanger,德国)对所有研究对象进行全脊柱矢状面扫描,在图像工作站(Easy Vision,Philips Medical Systems,Best,荷兰)上重建脊柱矢状面图像,测量每个胸椎椎体前壁高度,后壁高度,棘突间高度,在横截面测量椎体横径长度,并进行对比分析.结果 椎体前后高度、宽度从T1到T12逐渐增加,并呈线性分布,脊柱侧凸组椎体高度普遍>正常同年龄非侧凸组患者.脊柱侧凸组患者椎体高度横径比值以及脊椎前后高度比值均>无侧凸组.胸椎侧凸顶椎区T6～T9椎体前方高度、椎体高度横径比值以及脊椎前后高度比值,脊柱侧凸组明显>非侧凸组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AIS胸椎侧凸女性患者胸椎顶椎区存在显著的脊柱生长模式异常,与正常胸椎相比AIS的胸椎更高、并显得更为瘦长.     

青少年特发性脊柱侧弯患儿褪黑素受体1B基因多态性研究

目的 研究褪黑素受体1B(melatonin receptor 1B, MTNR1B)基因启动子区域多态性与青少年特发性脊柱侧弯(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)发生发展的关系.方法 本研究包括814例AIS患儿及651例正常对照,所有AIS患儿最大cobb角大于20°.采用PCR-RFLP的方法 对所选取多态性位点(rs4753426、rs7941837)进行基因分型.结果 AIS患儿组rs4753426多态性位点基因型分布为TT 6.5%、TC 41.5%、CC 52.0%,正常对照组为TT 9.5%、TC 44.4%、CC 46.1%.AIS患儿组rs4753426多态性位点等位基因分布为T 27.3%、C 73.7%,正常对照组为T 31.7%、C 68.3%.AIS患儿组与正常对照相比,rs4753426多态性位点基因型分布及等位基因分布差异都有统计学意义(P值分别为0.025,0.009).AIS患儿组rs7941837多态性位点基因型分布为AA 21.2%、AT 50.2%、TT 28.6%,正常对照组为AA 17.6%、AT 50.6%、TT 31.7%.AIS患儿组rs7941837多态性位点等位基因分布为A 46.3%、T 53.7%,正常对照组为A 43.0%、T 57.0%.AIS患儿组与正常对照相比,rs7941837多态性位点基因型分布及等位基因分布差异都无统计学意义(P＞0.05).在已经达到骨骼成熟或者已经接受手术治疗的患儿组,MTNR1B基因启动子区2个多态性位点不同基因型所对应的平均最大Cobb角差异都没有统计学意义(P＞0.05).结论 MTNR1B基因启动子区域多态性位点rs4753426与AIS的发病相关,MTNR1B基因是AIS的一个易感基因,但它可能不是AIS的修饰基因.     

青少年特发性脊柱侧凸患者髂骨中双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖的表达

目的:观察非胶原骨基质蛋白中双糖链蛋白多糖(Biglycan)和核心蛋白聚糖(Decorin)在青少年特发性脊柱侧凸(adolescentidiopathicscoliosis,AIS)患者髂骨中的表达情况。方法:从10例行后路自体骨融合的AIS女性患者(AIS组)和6例无骨代谢性疾病需行髂骨自体骨移植的其它骨科疾病女性患者(对照组)获取髂骨标本。AIS组患者年龄11.9￣19.1岁,平均14.9岁,Cobb角55°(45°￣61°);对照组平均年龄40.8岁。标本于10%缓冲福尔马林液中固定6h,在福尔马林酸中脱钙3周。切片厚度为5!m,行免疫组化染色。用半定量方法分析双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖在单位视野骨细胞与骨基质中的表达。结果:AIS组髂骨中骨细胞与骨基质表达核心蛋白聚糖各6例,表达双糖链蛋白多糖各6例。对照组核心蛋白聚糖在骨细胞与骨基质中均为阳性表达;双糖链蛋白多糖在骨基质中均为阳性表达,在骨细胞中阳性表达5例。!2检验显示AIS组上述两种非胶原骨基质蛋白多糖的阳性表达率明显低于对照组(P<0.05)。结论:双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖在AIS患者髂骨中的表达较对照组低,研究其在AIS患者骨骼中的表达和分布,有助于研究AIS的骨质密度和骨生长发育异常的分子基础,进一步认识该病的病因与发病机理。     

特发性脊柱侧凸患者二肽基肽酶9基因多态性研究

目的:探讨二肽基肽酶9(dipeptidyl-peptidase 9,DPP9)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)发生发展的关系.方法:选择571例AIS患者及236例正常对照,AIS患者的Cobb角均大于20°.结合汉族人单倍体型资料,选取rs10406145、rs11670570、rs2286367、rs2277733及rs732631 5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的方法对这5个SNPs位点进行基因分型.结果:AIS患者组DPP9基因5个SNPs位点的基因型及等位基因分布与正常对照比较没有明显差异.在已经达到骨骼成熟或者已经接受手术治疗的患者中,这5个SNPs位点不同基因型所对应的最大Cobb角没有明显差异.结论:DPP9基因多态性与AIS的发生发展没有明显关系.     

淫羊藿黄酮类成分预防去势大鼠骨质疏松的作用机制

目的 研究中药淫羊藿的黄酮类成分(FE)预防绝经后骨质疏松的作用是否通过促进肠钙吸收途径.方法 12月龄雌性Wistar大鼠45只,随机分为假手术组和卵巢切除组,即OVX组(卵巢切除+溶媒)、FE组(卵巢切除+淫羊藿黄酮类成分)、CS组(卵巢切除+钙剂+溶媒)和FE+CS组(卵巢切除+淫羊藿黄酮类成分+钙剂).卵巢切除4 d后,给药组开始灌喂,FE和(或)CS,连续用药12周.处死动物留取尿液和血清分别测定肠钙吸收指标,钙代谢自稳调节激素和骨转换标志物.截取左侧股骨近端,分别测定骨强度、骨材料-结构参数(包括肢体定量CT测定的体积骨密度、骨截面分布和显微CT定量测定的骨小梁三维结构)以及肢体定量CT定义的骨表面参数.结果 FE能显著预防大鼠去势引起的骨强度和材料结构的退化,对去势后子宫重量的改变没有影响,OVX组为(572±23)g,FE组为564 g,P＞0.05.钙剂(CS组)不能预防去势导致的骨强度的下降.FE和CS之间的析因分析结果表明两者联合应用能够分别在促进肠钙吸收和抑制骨吸收方面产生协同增强作用,但在抑制甲状旁腺激素方面没有协同效应;FE和CS在骨形成参数和骨材料-结构-强度参数方面也并没有体现协同增强作用.结论 中药淫羊霍的黄酮类成分能有效地预防去势大鼠骨质疏松,且不刺激子宫增生,其抑制骨吸收和促进骨形成的作用机制并非依赖肠钙吸收途径.     

青少年特发性脊柱侧凸患者颅颈交界处的脑脊液动力学特征的MR比较研究

目的 本研究旨在明确青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者颅颈交界处是否亦存在脑脊液阻塞及其与小脑扁桃体位置、枕骨大孑L大小及体表皮层诱发电位异常的相关性.方法 对30例AIS和30例年龄、性别匹配的正常对照组进行常规和相位对比法核磁共振检查.在枕骨大孑L处蛛网膜下腹侧和背侧分别选择4个兴趣Ⅸ测量两组的脑脊液流动峰值速度.在正中矢状面上测量小脑扁桃体相对枕骨大孔连线的位置,枕骨大孔前后径、横径以及面积.将测量参数与体表皮层诱发电位进行相关性分析.结果 AIS患者枕骨大孔处脑脊液流动速度峰值与正常对照组差异无统计学意义.尽管AIS患者中有50％的小脑扁桃体低于枕骨大孔连线1 mm且位置明显低于正常对照组,其枕骨大孔的前后径及面积明显大于正常对照组,小脑扁桃体位置和枕骨大孔面积呈明显负相关.体表皮层诱发电位止常和异常的AIS患者脑脊液流速以及枕骨大孔形态均无明显差异.结论 尽管A1S患者存在低位小脑扁桃体,但其枕骨大孔处脑脊液流动并无明显阻塞,这可能是山于小脑扁桃体位置越低者其枕骨大孔越大而产生的中和代偿结果.AIS患者的体表皮层诱发电位异常亦与其枕骨大孔处的脑脊液流动无相关性.     

特发性脊柱侧凸患者骨组织中唾液酸蛋白的表达

目的:检测青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者脊柱不同部位和髂骨松质骨骨唾液酸蛋白(bone sialo-protein,BSP)的表达量,并与先天性脊柱侧凸(CS)患者比较,探讨非胶原结构蛋白与AIS患者骨代谢异常的关系。方法:从12例平均年龄为13.8岁的AIS患者取7块髂骨(7例患者)、12对关节突和17个棘突,从10例平均年龄为11.2岁的CS患者中收集10块髂骨。骨组织块固定脱钙处理,石蜡包埋切片,片厚5!m,免疫组织化学染色,观察骨基质中BSP阳性面积比、骨基质总光密度/骨面积和阳性细胞比率。结果:BSP在骨细胞和骨基质中均有表达,AIS组和CS组患者髂骨骨基质总体光密度/骨面积(total OD/bone area)为0.0678±0.0003和0.0803±0.0013,差异有显著性(P<0.05),AIS患者顶椎区凹、凸侧关节突的骨基质BSP阳性面积比和骨基质BSP面积×平均光密度/骨面积分别为0.7363±0.0632、0.5552±0.0259和0.0761±0.0079、0.0632±0.0058,差异有显著性(P<0.05)。AIS患者上胸椎棘突与胸腰段棘突骨基质BSP染色阳性率分别为63.2%和65.5%,阳性细胞表达率分别为58.7%和61.2%,差异无显著性(P>0.05)。结论:BSP对AIS患者骨异常代谢及骨量降低的影响不大,非胶原结构蛋白可能不是AIS患者骨代谢研究的首要考虑对象;脊柱侧凸异常应力影响脊椎骨骼塑型和代谢,脊柱侧凸畸形对脊椎各结构的影响是多方面的。     

青少年特发性脊柱侧凸生长激素基因多态性研究

目的 研究生长激素(GH)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)发生发展的关系.方法 本研究包括265例AIS患者及193名正常对照.在AIS患者组,记录其最大Cobb角.采用PCR-RFLP的方法 对GH基因启动子区域多态性位点rs2854184进行基因分型.结果 在AIS患者组,GH基因rs2854184多态性位点的3个基因型AA、AT、TT分别占38.3%,50.3%,11.4%,正常对照组分别占39.6%,50.2%,10.10k,2组比较差异无统计学意义.同样,在MS患者组rs2854184多态性位点的2个等位基因A、T分别占63.5%,36.5%,正常对照组分别占64.7%,35.3%,2组比较差异无统计学意义.另外在AIS组内,多态性位点rs2854184不同基因型所对应最大Cobb角分别是从33.8°±10.0°,AT 36.4°±15.0°,TT34.5°±9.1°,3者比较差异无统计学意义.结论 GH基因rs2854184位点多态性与AIS的发生发展没有明显关系.