体外培养表达人β-NGF基因的猫角膜内皮细胞

目的:体外培养表达人β-神经生长因子基因(β-nerve growth factor,β-NGF)的工程化猫角膜内皮细胞,为进一步猫角膜内皮细胞的移植做准备。方法:将人β-NGF重组真核表达载体pcDNA4-β-NGF,通过EffecteneTM脂质体介导转染到体外培养的猫角膜内皮细胞中,选择性培养基筛选转基因后细胞,人NGF单克隆抗体行细胞免疫组织化学染色(immunohistochemistry)。结果:选择性培养基培养2wk后筛选出独立细胞克隆,该细胞高表达人β-NGF基因。结论:转基因方法可体外培养出表达人β-NGF基因的工程化猫角膜内皮细胞。     

双眼色素性青光眼一例

患者 女 56岁 以双眼视力下降偶伴眼胀不适6y入院。全身体格检查未见明显异常。右眼视力0．25（-1．25DS／＋0．75DC×90°）→1．0，右眼压：38．5mmHg，右眼结膜无充血，角膜不水肿，角膜后色素沉着呈菱形，前房深，周边深度约2CT，房水无明显混浊，虹膜后陷，无前后粘连，虹膜中周部透照试验阴性，瞳孔正圆中等大。     

超声生物显微镜评价联合激光治疗急性原发性闭角型青光眼

目的 观察激光周边虹膜成形术联合周边虹膜切除术在治疗初次发作的急性闭角型青光眼中的安全性和有效性.方法 初次发作的急性闭角型青光眼患者67例70眼,诊断后立即行氪激光周边虹膜成形术同时或待角膜透明后行YAG激光周边虹膜切除术,观察激光治疗前后视力、眼压及超声生物显微镜监测下的房角开放度数变化.结果 视力术后24 h 92.85%的患眼视力提高2行以上;眼压术前32～80 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),平均(42.5±18.5) mmHg,术后1 h平均眼压(27.5±9.5) mmHg,术后4 h平均眼压(20.2±6.7) mmHg;中央前房深度术前平均(1.69±0.34) mm,术后平均(2.13±0.20) mm;房角开放情况术前均1/2以上关闭,术后92.85%患眼(65/70)房角不同程度改善,以下方和颞侧增宽明显;平均房角开放度数术前平均2.15°±0.17°,术后6.23°±0.26°.激光术后各时间点眼压及术后超声生物显微镜下的房角开放度数、前房深度与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 氪激光周边虹膜成形术联合YAG激光周边虹膜切除术是急性闭角型青光眼早期快速降眼压的一种安全有效的方法.     

人β神经生长因子基因转染体外培养猫角膜内皮细胞促进分裂再生的研究

目的 探讨人β神经生长因子真核表达载体(pcDNA4-13-NGF)转染体外培养猫角膜内皮细胞并促进细胞分裂再生的机制,为将该基因应用于促进人角膜内皮细胞再生的研究打下基础.方法 为实验研究.通过EffecteneTM脂质体介导将自行构建并经测序证实的人pcDNA4-B-NGF转染到体外培养的猫角膜内皮细胞中.采用分组对照的方法研究转染前后猫角膜内皮细胞分裂再生能力.转基因后48 h通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色方法分别在mRNA和蛋白水平检测人β神经生长因子(β-NGF)的表达.转基因后96 h采用细胞四甲基偶氮唑盐染色(MTT)测量吸光度值、细胞有丝分裂指数、流式细胞仪检测G1期细胞比例及细胞损伤后愈合面积测量等方法检测目的 基因对猫角膜内皮细胞增殖活性的作用.结果 EffecteneTM脂质体可有效介导重组真核表达载体peDNA4-β-NGF转染到经改良方法体外培养的猫角膜内皮细胞中,转染效率为11.3%,并促进该细胞表达β-NGF.正常对照组β-NGF/β-actin比值结果为3.14,加脂质体组为3.23,pcDNA4质粒转染组为3.21,pcDNA4-β-NGF重组质粒转染组为4.53.培养液、正常对照组、加脂质体组、pcDNA4质粒转染组及pcDNA4-β-NGF重组质粒转染组平均A值分别为0.178±0.007、0.482±0.033、0.488±0.017、0.520±0.021及0.623±0.041.正常对照组、加脂质体组、pcDNA4质粒转染组及pcDNA4-β-NGF重组质粒转染组细胞有丝分裂指数分别为3.3%、3.0%、3.1%及7.7%.正常对照组、加脂质体组、pcDNA4质粒转染组及pcDNA4-β-NGF重组质粒转染组G1期细胞比例分别为68.1%、51.6%、60.4%及87.9%.结论 人β-NGF基因可通过EffecteneTM脂质体介导有效转染到体外培养的猫角膜内皮细胞中,并促进细胞分裂再生,为进一步将此基因转入人角膜内皮细胞的研究提供实验经验.     

自发性颈动脉海绵窦瘘合并不同类型青光眼2例

病例1, 男, 64岁, 因"左眼眼红、眼胀伴复视2个月余"至厦门眼科中心就诊。患者半个月前就诊于当地医院检查发现左眼眼压高, 诊断为左眼青光眼, 予卡替洛尔滴眼液点眼治疗后症状未见好转。否认全身病史, 否认外伤史。眼部检查:右眼裸眼视力(UCVA)0.5, 眼压17.0 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa), 结膜无充血水肿, 角膜透明, 前房浅, 周边约1/3角膜厚度(Corneal thickness, CT), 瞳孔圆, 直径3 mm, 晶状体皮质灰白色不均匀混浊, 眼底视盘色红, C/D约0.4, 视网膜平伏, 眼球无突出, 各向活动无受限;左眼UCVA 0.4, 眼压34.5 mmHg(卡替洛尔滴眼液用药后), 球结膜充血水肿, 球结膜血管呈螺旋状迂曲扩张, 鼻侧结膜增生呈三角翼状侵入角膜约1 mm(图1A), 角膜透明, 前房浅, 周边约1/3 CT, 瞳孔圆, 直径3 mm, 晶状体皮质灰白色不均匀混浊(图1B), 眼底视盘色淡红, C/D约0.5, 视网膜静脉迂曲扩张, 视网膜面散在出血点, 视网膜平伏(图1C), 眼球突出, 外展受限。眼球突出度检查示:右眼...     

改良泪道冲洗在新生儿泪囊炎的临床应用

目的:评价加压泪道冲洗对新生儿泪囊炎的临床治疗效果。方法:在门诊治疗中对3mo以上的新生儿泪囊炎280例340眼进行泪道冲洗,随机分为2组,A组140例164眼采用常规方法冲洗,B组140例176眼进行加压泪道冲洗,对比并观察冲洗治疗效果。结果:A组冲洗1～3次通畅9眼(5.5%);冲洗4次以上通畅14眼(8.5%);需加泪道探通141眼(86.0%)。B组冲洗1～3次通畅128眼(72.7%);冲洗4次以上通畅31眼(17.6%),需加泪道探通术17眼(9.7%)。改良方法的成功率明显高于常规方法。结论:加压泪道冲洗可明显提高新生儿泪囊炎泪道冲洗成功率。     

猫角膜内皮细胞的快速体外培养及其鉴定

角膜内皮细胞是维持角膜正常生理功能的关键细胞，角膜内皮细胞体外培养的纯度是进一步研究该细胞生物学功能的关键。本研究组织块法体外培养猫角膜内皮细胞，通过细胞形态学观察、神经特异性烯醇化酶（neuron—specific enolase，NSE）的特异染色及透射电镜观察来鉴定细胞的类型、纯度及生理特性。     

非人灵长类动物恒河短尾猴眼压测量分析

青光眼是主要的不可逆性致盲眼病之一,根据不完全的调查统计,我国青光眼患病率约为0．21％～1．64％^[1]。早期诊治是保持良好视功能的最有效方法^[2]。眼压与青光眼有着密切联系,也是唯一可调控的指标。灵长类动物的青光眼模型对青光眼视神经损害的研究具有重要指导意义^[3]。作者自2006年5月至2007年5月通过调查猕猴眼压分布情况,为人青光眼的研究提供数据。现将猕猴眼压测量过程情况报告如下。     

原发性青光眼患者术后低视力及康复效果观察

目的 :了解原发性青光眼术后低视力患者远近矫正视力及应用助视器后的矫正视力 ,研究针对造成低视力的相关因素所进行康复治疗的效果。方法 :对 10 4例原发性青光眼患者 16 5只眼术后近期 (第 4周 )裸眼及矫正远近视力进行分析 ,分析导致低视力的病因 ,并观察给予相应助视器矫正后的视力康复情况。结果 :16 5眼中有 38眼为低视力 ,主要病因为青光眼性视神经萎缩、眼底病变、并发性白内障、角膜病变等。应用助视镜后 ,76 .3%的低视力眼的矫正远视力和 84.2 %的矫正近视力可提高到有用视力。结论 :助视镜的应用仍是较为可靠、有效的康复治疗方法之一 ,但仍需改进